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Merck

17-648

ChiPAb+ dimetil-histona H3 (Lys9): Conjunto de anticuerpo y cebador validado para CHIP

serum, from rabbit

Sinónimos:

H3K9me2, Histone H3 (di methyl K9), Histone H3K9me2

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Acerca de este artículo

UNSPSC Code:
12352203
NACRES:
NA.52
eCl@ss:
32160702

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Nombre del producto

ChiPAb+ dimetil-histona H3 (Lys9): Conjunto de anticuerpo y cebador validado para CHIP, serum, from rabbit

biological source

rabbit

antibody form

serum

clone

polyclonal

species reactivity

human, mouse

species reactivity (predicted by homology)

mammals

manufacturer/tradename

ChIPAb+
Upstate®

technique(s)

ChIP: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

NCBI accession no.

NM_003493

UniProt accession no.

Q66I33

shipped in

dry ice

Quality Level

100

Gene Information

human ... H3F3B(3021)

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Analysis Note

Control
Incluyó suero de conejo sano con anticuerpo de control negativo y cebadores de control específicos para el promotor de la β-globina humana.
Inmunoprecipitación de cromatina:
La cromatina tratada con ultrasonidos a partir de células HeLa no tratadas (1 X 106 equivalentes de células) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 4 μl de un antisuero de conejo normal o 4 μl de suero anti-dimetil-histona H3 (Lys9) y el kit Magna ChIP A (Nº de ref. 17-610).
La inmunoprecipitación satisfactoria de fragmentos de ADN asociados a la dimetil histona H3 (Lys9) se verificó mediante qPCR utilizando cebadores para ChIP de control que flanqueaban el promotor de la β-globina humana (consulte las figuras).

Application

Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear
Inmunoprecipitación de la cromatina:
La cromatina tratada con ultrasonidos preparada partir de células HeLa no tratadas (1 X 106 equivalentes de célula) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 4 μl de antisuero de conejo sano o suero antidimetilhistona H3 (Lys9) y el kit Magna ChIP A (Nº de ref. 17-610) (Consulte las figuras). La inmunoprecipitación exitosa de fragmentos de ADN asociados con dimetil-histona H3 (Lys9) se verificó mediante qPCR utilizando cebadores de β-globina para ChIP que flanquean el promotor de la β-globina humana o cebadores que amplifican el promotor de la GAPDH humana, que está transcripcionalmente inactivo en las células HeLa. Se muestra el porcentaje de entrada en relación con las curvas patrón para cada conjunto de cebadores de qPCR.
Consulte los detalles experimentales en el protocolo EZ-Magna A ChIP (Nº de ref. 17-408) o el EZ-CHIP (Nº de ref. 17-371).

Análisis de inmunotransferencia Western e inhibición de péptidos:
el extracto ácido de HeLa se resolvió mediante electroforesis, se transfirió a nitrocelulosa y se probó con anti-dimetil-histona H3 (Lys9) (1:500, carril 1) o se preincubó con péptido histona H3 0,4 μM con las siguientes modificaciones:
Carril 2: Lineal no modificada
Carril 3: Ramificado no modificado
Carril 4: Trimetil ramificado
Carril 5: Trimetil lineal
Carril 6: Dimetil ramificado
Carril 7: Dimetil lineal
Carril 8: Monometil ramificado
Carril 9: Monometil lineal
Las proteínas se visualizaron utilizando una anticuerpo secundario de cabra anti–conejo conjugado con HRP y un sistema de detección de quimioluminiscencia.
Juego de anticuerpo y cebador validados para ChIP de dimetil-histona H3 (Lys9), que incluye el anticuerpo de calidad ChIP y los cebadores específicos de control de PCR utilizados para la inmunoprecipitación de cromatina de H3K9Me2.
Subcategoría de investigación
Biología de la cromatina

Biochem/physiol Actions

Dimetil-histona H3 (Lys9)

Disclaimer

Salvo que se indique lo contrario en nuestro catálogo o en otra documentación de la empresa que acompañe al producto, nuestros productos están indicados sólo para investigación y no deben utilizarse para ningún otro propósito, como, entre otros, usos comerciales no autorizados, diagnóstico in vitro, usos terapéuticos ex vivo o in vivo o cualquier tipo de consumo o aplicación en humanos o animales.

General description

17 kDa
La metilación de las histonas puede ocurrir en dos residuos diferentes: arginina o lisina. La metilación de la histona puede estar asociada con la activación o la represión de la transcripción, dependiendo del residuo metilado. La lisina 9 de la histona H3 puede puede estar mono, di o trimetilada por diferentes histona metiltransferasas (HMT) como la SuvH39H1 o la G9a. Esta lisina metilada puede ser desmetilada por histona desmetilasas como la JMJD1A, la LSD1 o la JMJD2C. La metilación de este residuo se asocia principalmente con la represión de la transcripción.
Todos los anticuerpos ChiPAb+ se validan individualmente para la precipitación de cromatina, en cada lote y en todo momento. Cada conjunto de anticuerpos ChiPAb+ incluye cebadores de control (probados en cada lote mediante qPCR) para validar biológicamente los resultados de IP en un contexto específico de locus. Se proporcionan el protocolo de qPCR y las secuencias de los cebadores, lo que permite a los investigadores validar los protocolos de ChIP al utilizar nuestro anticuerpo en su contexto de cromatina. Cada conjunto incluye también un anticuerpo de control negativo para garantizar la especificidad de la reacción de ChIP.
El conjunto ChiPAb+ dimetil-histona H3 (Lys9) incluye el anticuerpo anti-dimetil-histona H3 (Lys9), un anticuerpo de control negativo (suero de conejo normal) y cebadores de qPCR que amplifican una región de 110 pares de bases dentro del promotor del gen la β-globina humana. Los anticuerpos anti-dimetil-histona H3 (Lys9) y controles negativos se suministran en un tamaño de reacción escalable «por ChIP» y pueden utilizarse para validar funcionalmente la precipitación de la cromatina asociada a la dimetil-histona H3 (Lys9).

Immunogen

El suero de conejo dimetil-histona H3 (Lys9) se elabora contra un péptido sintético ramificado que contiene la secuencia ..Rme2KSTG.., en la que me2K corresponde a la dimetil-lisina en el resto 9 de la histona humana H3, conjugado con KLH
Epítopo: Dimetil Lys9

Other Notes

Anti-dimetilhistona H3 (Lys9) (suero de conejo), 1 vial

Suero de control para ChIP negativo, 1 vial

Cebadores ChIP para β-globina, 1 vial

Packaging

25 análisis por kit, ~4 μl por inmunoprecipitación de la cromatina

Physical form

Dimetil-histona H3 (Lys9) (suero policlonal de conejo). Un vial que contiene 100 μl de antisuero con azida sódica al 0,05 %.

Suero de conejo sano. Un vial que contiene 100 µl de antisuero con azida sódica al 0,05 %.

Cebadores para ChIP, β-globina. Un vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador específico para la β-globina humana.
(DIR). AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
INV: TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC

Preparation Note

Estable durante 1 año a -20°C desde la fecha de recepción.

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Clase de almacenamiento

10 - Combustible liquids

Certificados de análisis (COA)

Busque Certificados de análisis (COA) introduciendo el número de lote del producto. Los números de lote se encuentran en la etiqueta del producto después de las palabras «Lot» o «Batch»

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