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About This Item
General description
El conjunto de ChiPAb+ fosfo-histona H3 (Ser10) contiene el anticuerpo anti-fosfo-histona H3 (Ser10), un anticuerpo de control negativo (IgG de ratón purificada) y cebadores de qPCR que amplifican una región de 166 pb dentro del promotor del gen humano de la GAPDH. Los anticuerpos anti-fosfo-histona H3 (Ser10) y los controles negativos se suministran en un tamaño de reacción escalable «por ChIP» y pueden utilizarse para validar funcionalmente la precipitación de la cromatina asociada a la fosfo-histona H3 (Ser10).
Immunogen
Application
Epigenética y función nuclear
La cromatina tratada con ultrasonidos preparada a partir de células HeLa tratadas con colcemid (2 X 106 equivalentes por IP) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 2 μl de IgG de ratón sano o anticuerpo anti-fosfo-histona H3 (Ser10) y el kit Magna ChIP G (Nº de ref. 17-611). La inmunoprecipitación satisfactoria de fragmentos de ADN asociados a la fosfo-histona H3 (Ser10) se verificó mediante qPCR utilizando cebadores control para muestras de cromatina tratadas y no tratadas (consultar las figuras). Los datos se presentan como porcentaje del "input" de cada muestra para IP con respecto a la cromatina de entrada para cada amplicon y muestra de ChIP, tal como se indica.
Para conocer los detalles experimentales, consulte los protocolos del kit EZ-Magna G ChIP (Nº de ref. 17-409) o del EZ-ChIP (Nº de ref. 17-371).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (WB):
se resolvieron por electroforesis histona H3 recombinante o extractos ácidos de las células HeLa tratadas con colcemid (1 μg), se transfirieron a la membrana de PVDF y se probaron con anti-fosfohistona H3 (Ser10), clon CMA312. Las proteínas se visualizaron utilizando anticuerpo secundario de cabra anti-ratón conjugado con HRP y un sistema de detección de quimioluminiscencia (Véanse las figuras).
Biología de la cromatina
Histonas
Biochem/physiol Actions
Packaging
Physical form
IgG de ratón sano. Dos viales que contienen 25 μg de IgG de ratón purificada en 25 μl de tampón de almacenamiento que contiene azida sódica al 0,1 %. Conservar a -20°C.
Cebadores de control. Un vial que contiene 75 μl de 5 μM de cada cebador específico para la región promotora de la GAPDH humana. Conservar a -20°C.
DIR: TAC TAG CGG TTT TAC GGG CG
INV: TCG AAC AGG AGG AGC AGA GAG CGA
Preparation Note
Analysis Note
Incluye anticuerpos IgG de ratón de control negativo y cebadores de control específicos para el promotor de la GAPDH humana.
La cromatina tratada con ultrasonidos preparada a partir de células HeLa tratadas con colcemid (1 X 106 equivalentes por IP) se sometió a inmunoprecipitación utilizando 2 µl de IgG de ratón sano o anticuerpo anti-fosfo-Histona H3 (Ser10) y el kit Magna ChIP® G (Nº de ref. 17-611). La inmunoprecipitación satisfactoria de fragmentos de ADN asociados a la fosfo-histona H3 (Ser10) se verificó mediante qPCR utilizando cebadores control (consulte las figuras).
Para conocer los detalles experimentales, consulte los protocolos del kit EZ-Magna ChIP G (Nº de ref. 17-409) o del EZ-ChIP (Nº de ref. 17-371).
Legal Information
Disclaimer
Clase de almacenamiento
10 - Combustible liquids
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Número de artículo de comercio global
| SKU | GTIN |
|---|---|
| 17-685 | 04053252278440 |
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