Colagenasa from Clostridium histolyticum

Clostridium histolyticum es un clostridio patógeno que produce colagenasas crudas. Se trata de una mezcla de enzimas que contienen colagenasa, proteasas inespecíficas y clostripaína.

La colagenasa puede utilizarse:

• para la preparación de tejido arterial para el estudio de los productos finales de la glucosilación avanzada (AGE)
• para utilizarse junto con otras proteasas para la desagregación de tumores humanos, riñón de ratón, cerebro humano, epitelio pulmonar y muchos otros tejidos.
• en los estudios de perfusión del hígado y el riñón, de digestión del páncreas y de aislamiento de hepatocitos no parenquimatosos.
• para la preparación de hepatocitos viables de hígado de rata y para el aislamiento de células grasas del tejido adiposo de rata.

La colagenasa es activada por cuatro átomo-gramos de calcio por mol de enzima. Es inhibida por el ácido etilenglicol-bis(beta-aminoetil éter) - N, N, N′,N′-tetraacético, el beta-mercaptoetanol, el glutatión, el ácido tioglicólico y la 8-hidroxiquinolina.

La colagenasa es activada por cuatro átomo-gramos de calcio por mol de enzima. Es inhibida por el ácido etilenglicol-bis(β-aminoetil éter) - N, N, N′,N′-tetraacético, el β-mercaptoetanol, el glutatión, el ácido tioglicólico y la 8-hidroxiquinolina. Las enzimas colagenasa y proteasa neutra desempeñan un papel importante en la liberación efectiva de las células de los tejidos. La colagenasa reconoce la secuencia -R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-, donde X representa un aminoácido neutro.

También contiene actividades clostripaína, proteasa neutra inespecífica y trípticas.

Una unidad de digestión de colágeno (CDU) libera péptidos del colágeno del tendón de Aquiles bovino que equivalen en la reacción de color de la ninhidrina a 1,0 μmoles de leucina en 5 horas a pH 7,4 y 37 °C en presencia de iones calcio. Una unidad de hidrólisis FALGPA hidroliza 1,0 μmoles de furilacriloil-Leu-Gly-Pro-Ala por minuto a 25°C. Una unidad de proteasa neutra hidroliza la caseína para producir color equivalente a 1,0 μmoles de tirosina por 5 horas a pH 7,5 y 37°C. Una unidad de clostripaína hidroliza 1,0 μmoles de BAEE por minuto a pH 7,6 y 25°C en presencia de DTT.