Pepsina from porcine gastric mucosa

La pepsina de Sigma se ha utilizado junto con otras enzimas para la determinación de almidón resistente a enzimas (RS) en el pan. También se ha utilizado para simular in vitro la digestión gastrointestinal de aislados de proteínas de guisantes o suero.

La pepsina es una peptidasa utilizada para digerir las proteínas y se utiliza normalmente en la preparación de los fragmentos Fab de los anticuerpos. La pepsina, procedente de la mucosa gástrica porcina, se ha utilizado para hidrolizar muestras cervicales secas en ratones. El producto P6887 se suministra como polvo liofilizado y se ha utilizado para digerir proteínas durante el análisis de la fibra alimentaria.

Puede utilizarse hidrólisis con pepsina para producir los fragmentos F(ab′)₂ de los anticuerpos. pepsina en www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer

A diferencia de muchas otras peptidasas, la pepsina hidroliza sólo enlaces peptídicos, no enlaces amida ni éster. La especificidad de rotura incluye péptidos con un ácido aromático a cada lado del enlace peptídico, especialmente si el otro residuo es también un aminoácido aromático o dicarboxílico. Se produce un aumento de la sensibilidad a la hidrólisis si hay un aminoácido que contiene azufre cerca del enlace peptídico, que tiene un aminoácido aromático. La pepsina romperá también preferentemente por el lado carboxilo de los restos de fenilalanina y leucina, y en menor medido en el lado carboxilo de los restos de ácido glutámico. La enzima no rompe los enlaces de valina, alanina o glicina. Para la digestión con pepsina pueden utilizarse como sustratos la Z-L-tirosil-L-fenilalanina, la Z-L-glutamil-L-tirosina o la Z-L-metionil-L-tirosina. Diversos péptidos que contienen fenilalanina inhiben la pepsina.

Escisión preferente: residuos hidrófobos y aromáticos en las posiciones P1 y P1′. Rompe los enlaces Phe-Val, Gln-His, Glu-Ala, Ala-Leu, Leu-Tyr, Tyr-Leu, Gly-Phe, Phe-Phe y Phe-Tyr en la cadena β de la insulina

Proteína determinada mediante E1%/280

pH óptimo es 2-4. Activa en urea 4 M y HCl de guanidina 3 M. Estable a 60 ºC. La pepsina se desactiva de manera irreversible a pH 8,0 - 8,5.

Una unidad producirá un ΔA₂₈₀ de 0,001 por minuto a pH 2,0 y 37  C, medido como productos solubles en TCA utilizando la hemoglobina como sustrato. (Volumen final = 16 ml. Trayectoria de la luz = 1 cm.)

Véase más información sobre la pepsina en www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.