Anticorps anti-paxilline, clone 5H11

68 kDa

La paxilline, une protéine d'échafaudage localisée au niveau des sites d'adhérence focale, est phosphorylée au niveau de plusieurs résidus de tyrosine en réponse à diverses stimulations, notamment la stimulation des intégrines, la stimulation des facteurs de croissance et la transformation oncogénique (v-Src, v-Crk et BCR/ABL). La paxilline se lie à de nombreuses autres protéines d'adhérence focale, notamment la FAK, la vinculine, la taline et la tensine. Par conséquent, la paxilline et sa phosphorylation de tyrosine contribuent à réguler la dynamique des adhérences focales et du cytosquelette d'actine, déterminant ainsi les caractéristiques de morphologie et de migration cellulaires de la cellule. La paxilline est principalement phosphorylée au niveau des tyrosines 31 et 118 (Tyr31 et Tyr118). Il est intéressant de noter que la vinculine et la FAK se lient à des sites qui se chevauchent sur la paxilline. De plus, on observe une augmentation de la phosphorylation de la paxilline au niveau de Tyr118 dans les cellules vinculine (-/-) et vinculine Y822F. L'expression de la paxilline Y31F/Y118F rétablit l'apoptose et inhibe l'activité de Erk.

Protéine de fusion GST contenant de la paxilline humaine complète. Clone 5H11.

Domaine de recherche
Signalisation

Immunoprécipitation :
une quantité de 4 µg d'un précédent lot a permis d'immunoprécipiter la paxilline à partir de 500 µg de lysat de cellules 3T3/A31 obtenu dans un tampon RIPA.

Immunocytochimie :
une concentration de 5 à 10 µg/ml d'un précédent lot a donné un immunomarquage positif pour la paxilline dans des cellules REF 52 (fibroblastes d'embryons de rat) fixées avec 3,7 % de paraformaldéhyde pendant 5 minutes.

L'anticorps anti-paxilline, clone 5H11, est un anticorps dirigé contre la paxilline pour une utilisation en IC, IP et WB.

Sous-domaine de recherche
Signalisation du cytosquelette

Cet anticorps reconnaît la paxilline.

La réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été testée.

Format : Produit purifié

IgG1 monoclonale de souris purifiée dans un tampon à base de Tris-glycine 0,1 M (pH 7,4) et de NaCl 0,15 M contenant 0,05 % d'azoture de sodium. À conserver à -20 °C.

Produit purifié sur protéine G

Stable à -20 ºC pendant 1 an à compter de la date de réception.

Recommandations relatives à la manipulation du produit :
dès la première décongélation, et avant le retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Répartir en aliquotes dans des microtubes à centrifuger et conserver ces derniers à -20 °C. Éviter les congélations/décongélations répétées, qui peuvent détériorer les IgG et nuire aux performances du produit. Remarque : Les variations de température à l'intérieur des congélateurs en dessous de -20 °C peuvent provoquer la congélation des solutions à base de glycérol durant le stockage.

Produit évalué en routine par western blotting sur des lysats de fibroblastes 3T3/A31 obtenus dans un tampon RIPA.

Analyse par western blotting :
une concentration de 0,5-2 µg/ml de ce lot a permis de détecter la paxilline dans des lysats de fibroblastes 3T3/A31 obtenus dans un tampon RIPA.

Témoin
Témoin positif (antigène) : lysat de cellules 3T3/A31, référence n° 12-305. Ajouter 2,5 µl de 2-mercaptoéthanol pour 100 µl de lysat et faire bouillir pendant 5 minutes pour réduire la préparation. Appliquer 20 μg de lysat réduit par piste pour une analyse sur minigel.

Concentration : pour connaître la concentration spécifique du lot, voir le certificat d'analyse.

Remplace le(s) produit(s) suivant(s) : 04-581

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