Anticorps anti-Eck/EphA2, clone D7

140 kDa

L'EPH est les récepteurs associés à l'EPH sont impliqués dans la gestion des événements développementaux, en particulier dans le système nerveux. Les récepteurs appartenant à la sous-famille EPH possèdent généralement un seul domaine kinase et une région extracellulaire contenant un domaine riche en Cys et 2 répétitions de fibronectine de type III. Les récepteurs d'éphrine sont divisés en deux groupes en fonction de la similarité des séquences de leur domaine extracellulaire et de leur affinité de liaison aux ligands d'éphrine-A et d'éphrine-B.
Les protéines kinases sont des enzymes qui transfèrent un groupe phosphate d'un donneur phosphate, généralement le phosphate g de l'ATP, sur un acide aminé récepteur dans une protéine substrat. Par le biais de ce mécanisme de base, les protéines kinases assurent la plupart des transductions de signaux dans les cellules eucaryotes, régulant ainsi le métabolisme et la transcription cellulaires, la progression du cycle cellulaire, la réorganisation du cytosquelette ainsi que le mouvement, l'apoptose et la différenciation cellulaires.

Protéine native isolée par purification de protéines contenant de la phosphotyrosine. Clone D7.

Domaine de recherche
Neurosciences

L'utilisation de cet anticorps anti-Eck/EphA2, clone D7, a été validée en IC, IP, EA et WB pour la détection de l'Eck/EphA2.

Sous-domaine de recherche
Cônes de croissance et guidage axonal

Test de protéine kinase :
un précédent lot de cet anticorps a été utilisé en test d'autophosphorylation par immunoprécipitation, en utilisant un tampon de réaction Mn-PIPE (Romer, L., 1994).

Immunoprécipitation :
un précédent lot de cet anticorps a permis d'immunoprécipiter l'Eck à partir de 500 µg d'une lignée de cellules épithéliales de sein humain lysées dans du TBS contenant 1 % de Triton X-100. Utiliser 1 à 4 µg par réaction.

Immunocytochimie :
un précédent lot de cet anticorps a permis d'immunomarquer l'Eck dans des cellules épithéliales humaines, de souris et de rat fixées avec une solution de formaldéhyde à 3,7 % et perméabilisées avec 0,5 % de Triton X-100 dans du TBS.

Cet anticorps reconnaît la kinase des cellules épithéliales (Eck/EphA2), PM 140 kDa

Format : Produit purifié

IgG1 polyclonale de souris purifiée, dans un tampon à base de Tris-glycine 0,2 M (pH 7,4) et de NaCl 0,15 M contenant 0,05 % d'azoture de sodium et 30 % de glycérol.

Produit purifié sur protéine G

Stable à -20 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.

Recommandations relatives à la manipulation du produit :
dès réception, et avant retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Répartir en aliquotes dans des microtubes à centrifuger et conserver ces derniers à -20 °C. Éviter les congélations/décongélations répétées, qui peuvent détériorer les IgG et nuire aux performances du produit. REMARQUE : Les variations de température à l'intérieur des congélateurs en-dessous de -20 °C peuvent provoquer la congélation des solutions à base de glycérol durant le stockage.

Produit évalué en routine par immunoblotting sur des lysats (RIPA) de cellules A431 humaines, de fibroblastes de prépuce, de cellules 3T3/A31 de murine ou de cellules L6 de rat.

Analyse par western blotting :
une concentration de 0,5 à 2 µg/ml de ce lot a permis de détecter l'Eck dans lysats (RIPA) de cellules A431 humaines, et précédemment de fibroblastes de prépuce, de cellules 3T3/A31 de murine et de cellules L6 de rat.

Témoin
Témoin positif (antigène) : Référence 12-301, lysat de cellules A431 non stimulées. Ajouter 2,5 µl de 2-mercaptoéthanol pour 100 µl de lysat et réduire la préparation en la portant à ébullition pendant 5 minutes. Appliquer 20 µg de lysat réduit par piste pour une analyse sur minigel.

Concentration : pour connaître la concentration spécifique du lot, voir le certificat d'analyse.

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