Anticorps anti-phospho-histone H3 (Ser10), clone 3H10

Produit évalué en routine par western blotting sur des protéines extraites en conditions acides de cellules HeLa mitotiques traitées à la colcémide (réf. 17-306).

Analyse par western blotting :
Une concentration de 0,05 à 0,5 μg/ml de ce lot a permis de détecter l'histone H3 phosphorylée parmi des protéines extraites en conditions acides de cellules HeLa traitées à la colcémide (réf. 17-306), mais pas l'histone 3 non modifiée recombinante (réf. 14-494) (Figure A).

Témoin
Extraits de cellules 293 traitées aux UV, extraits de cellules HeLa traitées aux UV, tissu de cancer du sein, ou extraits de cellules HEPG2.

Cytométrie en flux :
Un laboratoire indépendant a signalé que cet anticorps permet de détecter l'histone H3 phosphorylée par cytométrie en flux.

Test de spécificité pour les histones Beadlyte :
Des dilutions au 1/1 000-1/81 000e d'un précédent lot ont été incubées avec des peptides d'histone H3 contenant diverses modifications conjugués à des microsphères Luminex (Figure B). Seul le peptide contenant de la phospho-sérine 10 a été détecté.


Immunocytochimie :
Une concentration de 0,2 μg/ml d'un précédent lot a donné un immunomarquage chromosomique positif pour des cellules A431 et HeLa mitotiques fixées avec 95 % d'éthanol et 5 % d'acide acétique et perméabilisées avec 0,1 % de Triton X-100.

Analyse par inhibition peptidique :
La détection, par l'anticorps anti-phospho-histone H3 (Ser10), de l'histone H3 dans des immunoblots d'extraits acides de cellules HeLa traitées à la colcémide, a été diminuée par une concentration 10 μM d'histone H3 contenant de la phospho-sérine 10, mais pas par des peptides contenant de la phospho-sérine 28 ou une séquence d'histone H3 non modifiée (Figure C).

Immunofluorescence :

L'anticorps anti-phospho-histone H3 (Ser10), clone 3H10, est un anticorps monoclonal de souris qui permet de détecter l'histone H3 phosphorylée au niveau de la sérine 10. Cet anticorps monoclonal purifié, aussi connu sous le nom de H3S10p, a été cité dans des revues à comité de lecture et a été validé en FC, ICC, IF, PIA, WB et Mplex.

Histone H3 phosphorylée au niveau du résidu Ser10.

Une réactivité croisée est attendue avec une large gamme d'espèces.

L'histone H3 est l'une des cinq principales protéines de type histone impliquées dans la structure de la chromatine chez les cellules eucaryotes. Caractérisée par un domaine principal globulaire et une longue queue N-terminale, l'histone H3 détermine la structure en "collier de perles" des nucléosomes. La queue N-terminale de l'histone H3 dépasse de la structure globulaire centrale du nucléosome et peut subir différentes modifications épigénétiques qui affectent les processus cellulaires. Ces modifications comprennent la fixation covalente de groupements méthyle ou acétyle sur les acides aminés lysine et arginine, et la phosphorylation de la sérine en thréonine.

17 kDa

Concentration : Pour connaître la concentration spécifique du lot, veuillez vous référer au certificat d'analyse.

Format : purifié

IgG1k de souris purifiée dans un tampon contenant de la Tris-glycine 0,1 M à pH 7,4, du NaCl 0,15 M et 0,05 % d'azoture de sodium.

Stable pendant 1 an entre 2 C et 8 °C à compter de la date de réception.

Recommandations relatives à la manipulation du produit :
Dès réception, et avant retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Répartir en aliquotes dans des microtubes à centrifuger et conserver ces derniers à -20 °C. Éviter les congélations/décongélations répétées, qui peuvent détériorer les IgG et nuire aux performances du produit. Remarque : En raison de la variabilité des températures à l'intérieur du congélateur en dessous de -20 °C, les solutions de glycérol risquent de congeler pendant le stockage.

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