Anticorps anti-phospho-CREB (Ser133)

Contrôle
Extraits nucléaires de cellules WI-38 stimulées par de la forskoline.

Produit évalué par western blotting sur des lysats de cellules NIH/3T3 de souris traitées avec de la forskoline 50 mM.

Analyse par western blotting : À une dilution au 1/1000e, cet anticorps a permis de détecter la protéine CREB sous sa forme phosphorylée au niveau de Ser133 dans des lysats de cellules NIH/3T3 traitées par forskoline via SDS-PAGE et transférées sur une membrane en PVDF (Immobilon-P).

Immunoprécipitation :
Un volume de 10 μl d'un précédent lot a permis d'immunoprécipiter la protéine CREB phosphorylée à partir de 500 μg de cellules traitées avec de la forskoline 50 μM.

Immunohistochimie :
Une dilution au 1/1000e de précédents lots a permis de détecter la protéine CREB phosphorylée dans des coupes de cerveaux de rat normal et ischémique fixés au formol et inclus en paraffine.

Retard sur gel (EMSA) :
Des laboratoires indépendants ont montré que cet anticorps génère un retard sur gel.

Domaine de recherche
Signalisation

L'utilisation de l'anticorps polyclonal de lapin anti-phospho-CREB (Ser133) a fait l'objet de nombreuses publications et a été validée en EMSA, IHC, IHC(P), IP et WB pour la détection de la protéine phospho-CREB (Ser133), aussi dénommée facteur de transcription actif CREB, ou protéine 1 se liant au CRE ("cyclic AMP response element-binding protein").

Sous-domaine de recherche
Récepteurs nucléaires

Reconnaît la protéine CREB phosphorylée (p43). Peut aussi reconnaître les protéines p30 et p38 kDa. Les protéines p30 et p38 peuvent correspondre respectivement aux protéines CREM et ATF-1 phosphorylées, puisque les deux protéines partagent une homologie importante avec le peptide immunisant phosphorylé de la protéine CREB.

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CREB est un facteur de transcription à domaine β-ZIP qui active des gènes cibles via les protéines CRE ("cAMP response element"). La protéine CREB est capable de médier les signaux issus de nombreux stimuli physiologiques, entraînant la régulation d'un large éventail de réponses cellulaires. Même si la protéine CREB est exprimée dans un grand nombre de tissus, elle joue un grand rôle régulateur dans le système nerveux. Elle jouerait un rôle essentiel dans la promotion de la survie neuronale, la prolifération des précurseurs, la croissance des neurites et la différenciation neuronale dans certaines populations de neurones. En tant que médiateur des voies des neurotrophines, la protéine CREB favorise la croissance des neurites et la différenciation. Elle est aussi capable d'activer sélectivement de nombreux gènes en aval via des interactions avec différents partenaires de dimérisation. La protéine CREB est activée par phosphorylation du résidu Ser133 par diverses voies de signalisation, notamment la signalisation Erk, Ca2+ et la signalisation du stress.

Détecte uniquement la protéine CREB phosphorylée au niveau de Ser133 (~43 kDa). Peut reconnaître ATF-1 (~38 kDa) et CREM (~30 kDa) car les deux protéines partagent une homologie importante avec le peptide immunisant phosphorylé.

Peptide de synthèse conjugué à de la KLH correspondant aux acides aminés comprenant et entourant le résidu Ser133 phosphorylé de la protéine CREB.

Épitope : phospho-Ser133

Concentration : La concentration de chaque lot figure sur le certificat d'analyse.

Format : Produit purifié

IgG de lapin purifiée dans un tampon contenant de la Tris-glycine 0,1 M (pH 7,4), du NaCl 15 mM, 0,05 % d'azoture de sodium et 30 % de glycérol.

Produit purifié sur résine Sepharose-protéine A puis par chromatographie sur immunoadsorbant avec une colonne de gel d'affinité avec protéine CREB non phosphorylée.

Stable pendant 1 an à -20 °C à partir de la date de réception.

Recommandations d'utilisation :
Dès réception, et avant retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Diviser en aliquotes dans des microtubes à centrifuger et les stocker à -20 °C.
Éviter les congélations/décongélations répétées, qui peuvent détériorer les IgG et nuire aux performances du produit.

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