Anticorps anti-EGFR

180 kDa

Le récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR ; ErbB-1 ; HER1 chez l'homme) est le récepteur de surface cellulaire pour les membres de la famille du facteur de croissance épidermique (famille EGF), laquelle comprend des ligands protéiques extracellulaires. Le récepteur du facteur de croissance épidermique est un membre de la famille des récepteurs ErbB, une sous-famille regroupant quatre récepteurs à tyrosine-kinase étroitement apparentés : EGFR (ErbB-1), HER2/c-neu (ErbB-2), Her 3 (ErbB-3) et Her 4 (ErbB-4). Les mutations affectant l'expression ou l'activité de l'EGFR peuvent entraîner un cancer. L'EGFR (récepteur du facteur de croissance épidermique) se trouve à la surface des cellules. Il est activé par la liaison de ses ligands spécifiques, notamment le facteur de croissance épidermique et le facteur de croissance transformant α (TGFα). Lors de l'activation par ses ligands de facteurs de croissance, l'EGFR passe d'une forme monomérique inactive à un homodimère actif. Outre la formation d'homodimères après liaison des ligands, l'EGFR peut s'associer à un autre membre de la famille des récepteurs ErbB, tel que ErbB2/Her2/neu, pour former un hétérodimère activé. La dimérisation de l'EGFR stimule son activité intrinsèque de protéine-tyrosine kinase intracellulaire. Il en résulte une autophosphorylation de cinq résidus de tyrosine (Y) du domaine C-terminal de l'EGFR.

Peptide synthétique conjugué à l'ovalbumine (ETKPNGIFKGPTAENAEYLRVAPPSSEFIGA) correspondant aux acides aminés 1 156-1 186 du domaine C-terminal du récepteur EGF (EGFR) de souris traité (réf. Q01279). La séquence immunisante partage 28 acides aminés sur 31 avec la séquence du récepteur de l'EGF humain.

Immunoprécipitation :
une quantité de 4 µg d'un précédent lot a permis d'immunoprécipiter l'EGFR à partir de 500 µg de lysat de cellules 3T3/A31 dans un tampon RIPA.
Analyse par immunohistochimie (paraffine) : une dilution au 1/500e de cet anticorps a permis de détecter l'EGFR sur des coupes de tissus de placenta humain.

L'anticorps anti-EGFR détecte les niveaux de protéines EGFR, et son utilisation a fait l'objet de publications et a été validée en IP et WB.

Détection de rat et de hamster.

Reconnaît la protéine EGFR, poids moléculaire de 180 kDa.

IgG polyclonale de lapin purifiée, dans un tampon à base de Tris-glycine 0,1 M, de NaCl 0,15 M et 0,05 % d'azoture de sodium, pH 7,4. À conserver à une température comprise entre 2 et 8 °C.

Format : Produit purifié

Stable à une température comprise entre 2 et 8 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.

Recommandations relatives à la manipulation du produit : dès la première décongélation,
et avant le retrait du bouchon, centrifuger le
flacon et mélanger délicatement la solution.

Produit évalué en routine par western blotting sur un lysat de cellules 3T3/A31 de souris dans un tampon RIPA.

Analyse par western blotting :
0,5-2 µg/ml de ce lot ont permis de détecter l'EGFR à partir d'un lysat de cellules 3T3/A31 de souris dans un tampon RIPA.

Témoin
Témoin positif (antigène) : lysat de cellules 3T3/A31, référence n° 12-305. Ajouter 2,5 µl de 2-mercaptoéthanol pour 100 µl de lysat et faire bouillir pendant 5 minutes pour réduire la préparation. Appliquer 20 μg de lysat réduit par piste pour une analyse sur minigel.

Concentration : pour connaître la concentration spécifique du lot, voir le certificat d'analyse.

Remplace le(s) produit(s) suivant(s) : 04-337; 04-338

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