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A propos de cet article
Nom du produit
Anticorps anti-acétyl-histone H3 (Lys18), serum, Upstate®
biological source
rabbit
antibody form
serum
antibody product type
primary antibodies
clone
polyclonal
species reactivity
yeast, Saccharomyces cerevisiae, human
species reactivity (predicted by homology)
vertebrates (most common)
manufacturer/tradename
Upstate®
technique(s)
ChIP: suitable (ChIP-seq)
dot blot: suitable
western blot: suitable
NCBI accession no.
UniProt accession no.
shipped in
dry ice
target post-translational modification
acetylation (Lys18)
Quality Level
Gene Information
human ... H3C1(8350)
Analysis Note
Application
Données d'un lot représentatif.
De la chromatine préparée à partir de cellules HeLa (1 x 10E6 équivalents cellulaires par IP) et passée aux ultrasons à été soumise à une immunoprécipitation de la chromatine avec soit 2 µl de sérum de lapin normal, soit 2 µl d'anticorps anti-acétyl-histone H3 (Lys18), et le kit Magna ChIP A (réf. 7-610). Le succès de l'immunoprécipitation de fragments d'ADN associés à l'acétyl-histone H3 (Lys18) a été vérifié par qPCR en utilisant des amorces de contrôle spécifiques de la région promotrice du gène GAPDH comme locus positif, et des amorces de globine β comme locus négatif. Les données sont présentées sous la forme d'un pourcentage d'"input" de chaque échantillon d'IP par rapport à la chromatine "input" pour chaque amplicon et chaque échantillon de ChIP, comme indiqué.
Pour les détails expérimentaux, se référer au protocole du kit EZ-Magna ChIP A (réf. 17-408) ou EZ-ChIP (réf. 17-371).
Séquençage ChIP :
Données d'un lot représentatif. Une immunoprécipitation de la chromatine a été réalisée avec le kit Magna ChIP HiSens (réf. 17-10460), 2 μg d'anticorps anti-acétyl-histone H3 (Lys18) (réf. 07-354), 20 µl de billes avec protéine A/G, et la chromatine de 1e6 cellules HeLa réticulée, suivie d'une purification de l'ADN à l'aide de billes magnétiques. Des banques ont été préparées à partir des échantillons d'ADN "input" et ChIP selon des protocoles standard avec des adaptateurs à code-barres Illumina, puis analysées sur un appareil Illumina HiSeq. Plus de dix millions de lectures ("read") tirées de fichiers FastQ ont été alignées ("mapped") avec Bowtie (http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml), après suppression des étiquettes ("tag") avec TagDust (http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource/). Les pics ont été identifiés à l'aide de l'algorithme MACS (http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/), après visualisation des pics et des lectures sous forme de piste personnalisée ("custom track") dans UCSC Genome Browser (http://genome.ucsc.edu) à partir de fichiers BigWig et BED.
Analyse par western blotting :
Données d'un lot représentatif.
De l'histone H3 recombinante (piste 1, réf. 14-494) et des extraits acides de cellules HeLa (réf. 17-305) traitées au butyrate de sodium (piste 2) et non traitées (piste 3) ont été mis en présence de l'anticorps anti-acétyl-histone H3 (Lys18) (dilution au 1/10 000e).
La flèche indique l'acétyl-histone H3 (Lys18) (17 kDa).
Dot blot :
Données d'un lot représentatif.
40 ng et 4 ng de peptides d'histone portant diverses modifications (voir tableau 1) ont été transférés sur une membrane en PVDF et mis en présence de l'anticorps anti-acétyl-histone H3 (Lys18) (dilution au 1/5000e). Les protéines ont été visualisées à l'aide d'une IgG de chèvre anti-lapin conjuguée à de la HRP et d'un système de détection par chimiluminescence. L'image présentée correspond à une exposition de 60 secondes.
Biochem/physiol Actions
General description
L'histone H3 est acétylée au niveau de plusieurs résidus lysine différents de sa queue par une famille d'enzymes connues sous le nom d'histone acétyltransférases (HAT).
Immunogen
Other Notes
Physical form
Legal Information
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Classe de stockage
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
Certificats d'analyse (COA)
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Numéro d'article de commerce international
| Référence | GTIN |
|---|---|
| 07-354 | 04053252620645 |
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