Kit plasmide rapporteur TCF

FOPflash : Plasmide rapporteur du facteur des lymphocytes T (TCF) de qualité transfection contenant deux copies complètes et une copie incomplète du site de liaison au TCF (muté) suivies de trois copies en sens inverse, en amont du promoteur minimal des thymidines kinases (TK) et du cadre de lecture ouvert de la luciférase. Ce plasmide sert de témoin négatif à TOPflash qui contient des sites de liaison au TCF de type sauvage.

TOPflash : Plasmide rapporteur du facteur des lymphocytes T (TCF) de qualité transfection contenant deux jeux (avec le second jeu en sens inverse) de trois copies du site de liaison au TCF (type sauvage) en amont du promoteur minimal des thymidines kinases (TK) et du cadre de lecture ouvert de la luciférase. FOPflash contenant des sites de liaison au TCF muté est également disponible en tant que témoin négatif.

La famille Wnt code pour des glycoprotéines sécrétées impliquées dans la régulation de la croissance cellulaire, la détermination du destin cellulaire, l'organogenèse et l'oncogenèse. D'après l'analyse génétique de la signalisation wingless (wg) chez la drosophile, dans des cellules de mammifères, le signal des Wnt passe par les récepteurs de la famille "Frizzled", pour atteindre la famille "Dishevelled". Les cellules "dishevelled" (ébouriffées) régulent à la baisse l'activité de la glycogène synthase kinase-3ß (GSK-3ß). Il en résulte une stabilisation et une accumulation de la ß-caténine cytosolique, un substrat de la GSK-3ß qui, lorsqu'elle est phosphorylée par la GSK-3ß, est la cible d'une protéolyse médiée par l'ubiquitine. ßLa β-caténine se déplace ensuite vers le noyau, où elle s'associe à des membres de la famille des régulateurs de transcription TCF/LEF, activant ainsi la transcription des gènes répondant au TCF. Ce plasmide rapporteur du TCF, avec FOPflash (réf. 21-169), permet de quantifier la signalisation Wnt/Wg dans des cellules transfectées avec ces construits.

Jeu de plasmides rapporteurs du facteur des lymphocytes T (TCF) de qualité transfection pour utilisation dans les tests d'activité wnt/b-caténine TOPflash et FOPflash.

FOPflash, réf. 21-169, Nº de lot 30860, 5,5 kb. 5 μgADN purifié par affinité, élué et conditionné aseptiquement dans 50 μl de Tris-HCl 10 mM à pH 8,0, et de l'EDTA 1 mM. Solution congelée.

TOPflash, réf. 21-170, Nº de lot 27752, 5,5 kb. 5 μgADN purifié par affinité, élué et conditionné aseptiquement dans 50 μl de Tris-HCl 10 mM à pH 8,0, et de l'EDTA 1 mM. Solution congelée.

Stable 2 ans à -20 °C à partir de la date d′expédition. Pour récupérer le maximum de produit, centrifuger les flacons d'origine après décongélation et avant de retirer le capuchon.

Produit évalué en routine par analyse de la séquence d'ADN pour confirmer l'identité des sites de liaison au TCF.

FOPflash (sites de liaison au TCF mutant) (réf. 21-169)

TOPflash (Plasmide rapporteur du TCF) (réf. 21-170)

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