Poly-ᴅ-Lysine Hydrobromide

La poly-D-lysine (PDL), une forme chirale de l'alpha polylysine, est un polypeptide cationique d'origine synthétique. Il s'agit d'une molécule d'adhésion cellulaire (CAM, cell adhesion molecule) non spécifique. La PDL est largement utilisée comme substance de revêtement dans les expériences in vitro et ex vivo.

La poly-D-lysine a été utilisée :

• pour enduire des récipients de culture et fournir une surface appropriée pour la croissance et la fixation de cellules neuronales.
• pour préparer la surface des lamelles afin de faciliter la fixation de cellules non adhérentes.

Étant cationique, la poly-D-lysine (PDL) facilite l'interaction avec les sites anioniques des tissus ou des cellules, assurant une fixation efficace à la surface de croissance. Chargée positivement, la PDL interagit avec les membranes cellulaires chargées négativement et favorise l'excroissance des neurites. Les couches de PDL liées de manière covalente favorisent la culture à long terme des cellules neuronales.

Liquide. 20 ml dans de l′eau stérile.

Conserver à -20 °C jusqu′à 18 mois.

Le niveau d′application varie en fonction de l′espèce et du type de cellule. En général, des concentrations finales de 3 à 10 µg/cm² de surface permettent d'obtenir un revêtement suffisant pour la plupart des types de cellules. Surface des plaques : (pi)(rayon au carré) en cm² En pratique, des dilutions de travail de l'ordre de 50 μg/m à 100 µg/m sont généralement adéquates. Diluer la poly-D-lysine dans du PBS, de l′eau ou un tampon borate 0,1 M (préparé en ajoutant 1,24 g d′acide borique et 1,9 g de tétraborate de sodium à 400 ml d′eau à pH 8,5) jusqu′à la concentration de travail finale. Les plaques ou les fioles sont enduites pendant une durée allant de 3 h à toute une nuit, et jusqu′à 3 jours si elles sont stockées à 4 °C. Les meilleurs résultats sont généralement obtenus avec une application d'une nuit. Retirer la solution de poly-d-lysine et rincer avec de l'eau ou du PBS stérile 1-2X. Ne pas racler le fond des plaques ou des fioles enduites. Utiliser immédiatement les plaques, ou les conserver avec du PBS jusqu'à 5 jours. Les méthodes d′application de la Poly-D-lysine peuvent varier légèrement d′un laboratoire à l′autre ; vous pouvez donc considérer cette méthode comme un guide général.