Anticorps anti-phosphosérine

L'anticorps anti-phosphosérine permet de détecter le niveau de phosphosérine ; son utilisation a été publiée et validée en ELISA, IH, IP et WB.

Sous-domaine de recherche
Modifications post-traductionnelles générales

Domaine de recherche
Signalisation

Immunoprécipitation (extraits tissulaires) :
10-20 μg d'un précédent lot d'anticorps anti-pS ont été utilisés pour chaque mg de protéines.
Cet anticorps permet d'immunoprécipiter toutes les protéines à phosphosérine contenues dans les extraits. En cas d'utilisation d'extraits de protéine purifiés contenant uniquement la protéine d'intérêt, la quantité d'anticorps doit être réduite à 5 μg/500 μl d'extraits. Les concentrations optimales doivent être déterminées expérimentalement.

ELISA (essai sur les kinases) :
Un précédent lot de cet anticorps a été utilisé à une dilution au 1/250e-1/500e.

Immunohistochimie :
Un précédent lot de cet anticorps a été utilisé à une dilution au 1/50e.

Comme l'anticorps détecte toutes les phosphosérines, n'importe quel peptide ou protéine à sérine phosphorylée peut être employé pour bloquer le marquage de l'anticorps.
On utilise typiquement un excès 10 M de peptide dans les tampons à base de Tris.

Analyse par western blotting :
Dilution au 1/500e d'un précédent lot.

Il revient à l'utilisateur final de déterminer les dilutions de travail optimales.

L'anticorps anti-phosphosérine est indépendant de l'espèce.

Reconnaît les protéines à phosphosérine, à peptidyl-phosphosérine et à sérine phosphorylée. Ne présente pas de réactivité croisée avec l'ATP, la phosphotyrosine, la peptidyl phosphothréonine et la sérine. Légère réactivité croisée avec la phosphothréonine libre. Réagit facilement avec les phosphoprotéines connues telles que la phosvitine et la caséine alpha. La réactivité de l'anticorps anti-phosphosérine ne dépend pas de l'espèce.

Dépend du poids moléculaire de la protéine à sérine phosphorylée à détecter.

Les réponses cellulaires à divers signaux extracellulaires se font par phosphorylation ou déphosphorylation de protéines intracellulaires. Une phosphorylation anormale des protéines peut être impliquée dans la progression de nombreuses maladies, notamment de nombreuses formes de cancer, de dysfonctionnement du système immunitaire et de maladie cardiovasculaire. Il est possible de détecter ces changements dans la phosphorylation des protéines en établissant une cartographie immunocytochimique des cellules marquées avec des anticorps anti-phosphosérine ou anti-phosphothréonine, et de corréler ces changements à des modifications de l'état cellulaire, électrophysiologique ou comportemental.

Produit évalué en routine par western blotting sur des lysats de cellules PC12 traitées par du NGF.

Analyse par western blotting : Une dilution au 1/500e de ce lot a permis de détecter des protéines à sérines phosphorylées dans 10 μg de lysats de cellules PC12 traitées par du NGF.

Témoin
Cellules NIH 3T3 (+/- TPA), cellules K562, et cellules A431 stimulées par de l'EGF.

Sauf indication contraire dans notre catalogue ou toute autre documentation associée au(x) produit(s), nos produits sont uniquement destinés à la recherche et ne sauraient être utilisés à d'autres fins, ce qui inclut, sans s'y limiter, les utilisations commerciales non autorisées, les utilisations diagnostiques in vitro, les utilisations thérapeutiques ex vivo ou in vivo, ou tout type de consommation ou d'application chez l'être humain ou chez l'animal.

Conjugués de phosphosérine et d'hémocyanine de patelle (KLH).

Concentration : Pour connaître la concentration spécifique du lot, veuillez vous référer au certificat d'analyse.

Chromatographie d'affinité avec phosphosérine

Sérum de lapin purifié dans un tampon contenant 50 % de glycérol.

Stable pendant 6 mois maximum à -20 °C en aliquotes non diluées à partir de la date de réception. Au cours du transport, de petits volumes de produit peuvent parfois se retrouver piégés dans la bande scellée autour du bouchon du flacon. Pour les produits dont le volume est inférieur ou égal à 200 µl, il est recommandé de tapoter doucement le flacon sur une surface dure, ou de le centrifuger brièvement dans une centrifugeuse de paillasse, afin de déloger tout liquide contenu dans le bouchon du flacon.

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany