Anticorps anti-transporteur du glutamate glial

Contrôle
Tissu cérébral de rat

Produit évalué par western blotting sur des lysats de membrane cérébrale de souris.

Domaine de recherche
Neurosciences

Détectez le transporteur du glutamate à l'aide de cet anticorps anti-transporteur du glutamate glial, dont l'utilisation a été validée en IH(P), IF et WB.

Produit évalué par western blotting sur des lysats de membrane cérébrale de souris.

Analyse par western blotting : Une dilution au 1/500e de cet anticorps a permis de détecter le GLT-1 dans 10 µg de lysats de membrane cérébrale de souris.

Immunohistochimie :
Une dilution au 1/1000-1/4000e d'un précédent lot a été utilisée avec un système de détection à base de DAB sur du prosencéphale de rat adulte fixé avec 4 % de paraformaldéhyde.

Immunohistochimie :
Une dilution au 1/5 000-1/10 000e d'un précédent lot a été utilisée avec un anticorps secondaire conjugué à de la cyanine.

La détection enzymatique nécessite des dilutions d'anticorps primaire nettement supérieures. Il est recommandé d'utiliser du matériel légèrement fixé avec 4 % de PFA.

Remarques :

Des rats Sprague-Dawley mâles (d'un poids corporel de 100-150 g) ont été anesthésiés avec du pentobarbital sodique et perfusés via l'aorte ascendante avec 50 ml de solution de Tyrode sans Ca2+ puis avec un fixateur du type formol-acide picrique (4 % de paraformaldéhyde avec 0,4 % d'acide picrique dans un tampon phosphate 0,16 M, à pH 6,9) pendant 6 minutes. Les tissus ont rapidement été disséqués, post-fixés dans le même fixateur pendant 90 minutes, puis rincés pendant au moins 24 heures dans du tampon phosphate 0,1 M (à pH 7,4) contenant 10 % de saccharose. Des coupes (de 14 µm) ont été découpées dans un cryostat et incubées à 4 °C toute une nuit avec la référence AB1783 (dilution au 1/5 000-1/10 000e). Après rinçage dans du PBS, les coupes ont été incubées pendant 60 minutes à température ambiante avec des anticorps secondaires conjugués avec du colorant Cy3. Après montage dans un mélange de PBS et de glycérol (1/3) contenant 0,1 % de p-phénylènediamine, les coupes ont été examinées avec un microscope à épifluorescence Microphot-SA de Nikon.



Les dilutions de travail optimales doivent être déterminées par l'utilisateur final.

Sous-domaine de recherche
Canaux ioniques et transporteurs

Transporteur du glutamate glial GLT-1 (EAAT2). L'anticorps a été testé sur du tissu de système nerveux central. La pré-absorption de l'antisérum avec le peptide immunogène (référence AG391) supprime complètement l'immunomarquage.

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Les transporteurs du glutamate (GluT) servent à retirer de la fente synaptique le L-glutamate (Glu), un neurotransmetteur excitateur primaire du système nerveux central (SNC) des mammifères. Nettoyer la synapse de cette manière permet de recycler le Glu en vue d'un usage ultérieur, de maintenir un gradient de diffusion adapté, et d'éviter l'excitotoxicité. De nombreux membres différents d'une famille multigénique de GluT ont été signalés - GLT1, GLAST, EAAC1 et EAAT2. De l'ARNm a été identifié dans le cerveau pour chacune de ces protéines.

EAAT2 transporte le L-glutamate ainsi que le L et le D-aspartate. EAAT2 est essentiel pour l'achèvement de l'action post-synaptique du glutamate, retirant rapidement de la fente synaptique le glutamate libéré. EAAT2 agit comme un symport en cotransportant le sodium.

~62 kDa

Peptide de synthèse issu de l'extrémité carboxy-terminale du GLT-1 humain.

Épitope : Extrémité C-terminale

Concentration : La concentration de chaque lot figure sur le certificat d'analyse.

Antisérum de cochon d'Inde sans conservateurs.

Produit non purifié

Stable pendant 1 an à -20 ºC à partir de la date de réception.

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany