Anticorps anti-RNF168

La protéine ubiquitine ligase E3 RNF168 (UniProt Q8IYW5 ; également appelée hRNF168 ou protéine à doigt RING 168) est codée par le gène RNF168 (identifiant du gène : 165918) chez l'être humain. L'ubiquitylation/ubiquitination est un signal précurseur essentiel du processus de réparation des dommages à l'ADN. Plusieurs ligases E3, notamment la RNF2 (RING2), la RNF8 et la RNF168, participent à l'ajout de chaînes de polyubiquitine liées à la K63 à l'histone 2A (H2A) et à l'H2AX, qui, à leur tour, recrutent des protéines de réparation des dommages à l'ADN, p.ex., RAP80, BRCA1. De plus, la sumoylation et la neddylation sont également impliquées dans le processus de réponse aux dommages à l'ADN. La RNF168 est une ligase E3 à double spécificité qui intervient dans l'ubiquitination et la neddylation de l'H2A et de l'H2AX. Les deux types de modification sont en concurrence l'un contre l'autre et la modification par NEDD8 de l'H2A et de l'H2AX bloque le recrutement de la BRCA1 aux sites de réparation des dommages à l'ADN. La RNF168 elle-même est également sujette à une modification par NEDD8 et la neddylation de la RNF168 est nécessaire pour son activité d'ubiquitine ligase. L'inhibition de la neddylation de la RNF168 altère son interaction avec l'enzyme E2 Ubc13 (UBE2N). De la même façon, la régulation à la baisse de la neddylation de la RNF168 par l'enzyme NEDP1, ou en raison de mutations de l'enzyme UBC12 de conjugaison de NEDD8, réduit l'ubiquitination de l'H2A et de l'H2AX. Les mutations de la RNF168 sont liées au syndrome de RIDDLE (radiosensibilité, déficit immunitaire, dysmorphie et difficultés d'apprentissage).

Poids réel (observé) : env. 75 kDa. Une ou plusieurs bandes non caractérisées peuvent apparaître avec certains lysats.

RNF168 recombinante humaine avec étiquette GST.

Épitope : extrémité C-terminale

Analyse par immunocytochimie : une concentration de 1,0 µg/ml d'un lot représentatif a permis de détecter la protéine RNF168 dans des cellules HeLa, A431, HUVEC et NIH/3T3.
Analyse par immunohistochimie : un lot représentatif a permis de détecter la protéine RNF168 dans des coupes de tissu d'adénocarcinome pulmonaire humain (Xie, X., et al. (2018) Nat. Cell Biol. 20(3); 320-331).

Domaine de recherche
Épigénétique et fonction nucléaire

Sous-domaine de recherche
Biologie de la chromatine

Utiliser l'anticorps anti-RNF168 (anticorps polyclonal de lapin), validé en WB, en ICC et en IF pour détecter la protéine RNF168, également appelée protéine ubiquitine ligase E3 RNF168.

Cet anticorps détecte la protéine RNF168 dans une lignée cellulaire lymphoblastoïde (LCL) dérivée d'un donneur sain, mais pas dans une LCL dérivée d'un patient atteint d'un syndrome de RIDDLE (radiosensibilité, déficit immunitaire, dysmorphie et difficultés d'apprentissage).

Anticorps polyclonal de lapin purifié, dans un tampon à base de Tris-glycine 0,1 M (pH 7,4) et de NaCl 150 mM contenant 0,05 % d'azoture de sodium.

Produit purifié par affinité

Stable entre 2 et 8 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.

Produit évalué par western blotting sur un lysat de lymphocytes B SA13 humaines.

Analyse par western blotting : une dilution au 1/1 000e de cet anticorps a permis de détecter la protéine RNF168 dans 8 µg d'un lysat de cellules B SA13 humaines.

Témoin
Lysat de cellules HeLa

Concentration : pour connaître la concentration spécifique du lot, voir le certificat d'analyse.

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