Anticorps anti-CNPase, clone 11-5B

48 et 46 kDa

L'enzyme nucléotide 2′,3′-cyclique 3′-phosphodiestérase (CNP) est exprimée à des niveaux élevés par les oligodendrocytes du système nerveux central et par les cellules de Schwann du système nerveux périphérique (Sprinkle, 1989). En raison de cette expression spécifique à certaines cellules, la CNP est reconnue comme un marqueur caractéristique de ces deux types de cellules gliales produisant de la myéline (Sprinkle, 1989; Kim et al., 1984; Sheedlo & Sprinkle, 1984; McMorris et al., 1984). Au-delà de son activité enzymatique consistant à cliver l'extrémité 2′,3′-cyclique des nucléotides (Sprinkle, 1989), le rôle physiologique de la CNP est encore en cours d'étude. L'activité de la CNP a été corrélée à la myéline et à la formation de la myéline, et une forte chute de l'activité de la CNP est associée à des maladies liées à la démyélinisation telles que la sclérose en plaques (Sprinkle, 1989). Cette enzyme se compose de deux protéines : CNP1 (46 kD) et CNP2 (48 kD) (Sprinkle, 1989, Sprinkle et al., 1987). Même si le rapport CNP1/CNP2 peut varier d'une espèce à l'autre, la séquence primaire commune aux deux protéines est conservée phyIogénétiquement. Le gène CNP a récemment été localisé chez l'homme sur le chromosome 17 par amplification d'ADN hybride de cellules somatiques avec une amplification en chaîne par polymérase (PCR) et par southern blotting d'hydrolysats d'ADN génomique produits par Hind Ill (Sprinkle et al., 1991). Comme l'anticorps anti-CNP réagit avec une région fortement conservée de l'enzyme, il peut être considéré comme un anticorps anti-pan-CNP (Sprinkle et al., 1987). L'anticorps anti-CNP peut servir de marqueur pour l'identification des cellules de Schwann et des oligodendrocytes dans les cultures cellulaires et les coupes tissulaires, et pour la localisation de la CNP dans les fractions de membrane cellulaire. Comme la CNP est exprimée assez tôt au cours du développement post-natal, l'anticorps anti-CNP est particulièrement utile pour l'identification précoce des oligodendrocytes.

Nucléotide 2’,3’-cyclique 3’-phosphodiestérase

Immunohistochimie :
Un précédent lot de cet anticorps a été utilisé en IH (anticorps à 10 μg/ml, préparé quotidiennement de frais).

Immunocytochimie :
Un précédent lot de cet anticorps a été utilisé en IC (anticorps à 10 μg/ml, préparé quotidiennement de frais).

Les dilutions de travail optimales doivent être déterminées par l'utilisateur final.

L'utilisation de l'anticorps anti-CNPase, clone 11-5B, a été validée en IC, IH, IH(P) et WB pour la détection de la CNPase.

L'anticorps anti-CNP réagit à la fois avec CNP1 et CNP2 chez de nombreuses espèces.

Format : Produit purifié

IgG1 monoclonale de souris purifiée dans un tampon contenant du tampon phosphate 0,02 M à pH 7,6, du NaCl 0,25 M et 0,1 % d'azoture de sodium.

Contrôle
Culture d'oligodendrocytes, lysat cérébral

Produit évalué par western blotting sur des lysats de cerveau de souris.

Analyse par western blotting :
Une dilution au 1/500e de cet anticorps a permis de détecter la CNPASE 1/2 dans 10 µg de lysats de cerveau de souris.

Concentration : La concentration de chaque lot figure sur le certificat d'analyse.

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