Anti-GAD67 Antibody

Contrôle
Lysat de cellule SKNSH (neuroblastome humain), cortex cérébral de souris.

Évaluée en routine par immunohistochimie avec du lysat de cellules SKNSH.

Analyse d′immunohistochimie (paraffine) :
Morphologie et schéma de coloration représentatifs de la GAD67 dans le tonneau de l′aire somatosensorielle 1 du cortex cérébral de souris. Tous les points marron sont des neurones de la lamina VI a. Aucun démasquage d′épitope ne s′est avéré nécessaire. Ce lot d′anticorps a été dilué au 1/500ème, avec détection par HRP-DAB IHC-Select.
Morphologie/schéma de coloration optimaux de GAD67 : Cerveau de souris.

Domaine de recherche
Neurosciences

L'utilisation du clone 1G10.2 de cet anticorps anti-GAD67 a été validée en IH, IH(P) et WB pour la détection de la GAD67. Cet anticorps anti-GAD a été cité dans plus de 75 références bibliographiques.

Sous-domaine de recherche
Neurotransmetteurs et récepteurs

Marqueurs neuronaux et gliaux

Western blot : Une dilution au 1/5 000-1/10 000ème dans de l′ECL d′un lot précédent a été appliquée sur un lysat cérébral de rat et de souris.

Immunohistochimie sur du tissu de souris et de rat fixé avec 4 % de paraformaldéhyde : 1/1000-1/5000. L′anticorps a également donné de bons résultats, à des dilutions au 1/2500-1/5000ème, sur un tissu humain fixé pendant 10 minutes dans 4 % de PFA à 4 °C, 100 % d′éthanol à +20 °C, ou 100 % d′acétone à -20 °C.
Une version polyclonale de l′anticorps dirigé contre la GAD est également disponible sous la référence AB5992.

Les dilutions de travail optimales doivent être déterminées par l′utilisateur final.

l'anticorps anti-GAD67, clone 1G10.2, réagit avec l'isoforme de 67 kDa de la glutamate décarboxylase (GAD67) de rat, de souris et de l'homme. Les autres espèces n'ont pas encore été testées. Aucune réaction croisée n'a été détectée avec la GAD65 en western blotting sur du lysat cérébral de rat, comparativement à un blotting réalisé avec une sonde à base de AB1511 qui réagit avec la GAD65 et la GAD67.

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67 kDa

L′acide glutamique décarboxylase (GAD, n° E.C. 4.1.1.15) est l′enzyme responsable de la conversion de l′acide glutamique en acide gamma-aminobutyrique (GABA), principal transmetteur inhibiteur au sein des régions cérébrales supérieures, et hormone paracrine putative des îlots de Langerhans. Deux formes moléculaires de la GAD (65 kDa et 67 kDa, dont les a. a. sont identiques à 64 %) sont largement conservées, et toutes deux sont exprimées dans le SNC, les cellules des îlots de Langerhans, le testicule, la trompe utérine et l′ovaire. Les isoformes sont réparties par régions dans le cytoplasme des cerveaux de rat et de souris (Sheikh, 1999). La GAD65 est une protéine amphiphile à ancrage membranaire (de 585 a. a.), codée sur le chromosome 10 de l′homme, qui est responsable de la production de GABA au niveau vésiculaire. La GAD67 est une protéine cytoplasmique (de 594 a. a.), codée sur le chromosome 2, qui semble responsable d′une production importante de GABA au niveau cytoplasmique. L′expression de la GAD change durant le développement nerveux dans la moelle épinière du rat. La GAD65 est exprimée de manière transitoire dans les axones commissuraux autour de E13 mais est régulée à la baisse le lendemain tandis que l′expression de la GAD67 augmente essentiellement dans le soma de ces neurones (Phelps, 1999). Dans le pancréas mature du rat, la GAD65 et la GAD67 semblent être localisées à différents endroits, la GAD65 se concentrant principalement dans les cellules bêta contenant de l′insuline et la GAD67 dans les cellules (A) contenant du glucagon (Li, 1995). L′expression de la GAD67 semble être particulièrement plastique et peut évoluer en réponse à une manipulation expérimentale (par exemple une stimulation ou une transection neuronale) ou à la progression d′une maladie et à des troubles émergents comme la schizophrénie (Volk, 2000). La colocalisation des deux isoformes de la GAD indique également des modifications au niveau de la répartition de la GAD65 et de la GAD67 qui sont corrélées à certains états pathologiques du type DID (diabète insulino-dépendant) ou SMS.

Protéine GAD67 recombinante

Remplace : AB5992, AB5862P

Format : Purifié

IgG2a monoclonale de souris purifiée dans un tampon contenant 0,1 % d′azide de sodium.

Protéine A purifiée

Stable 6 mois entre 2 et 8 ºC en aliquotes non diluées à partir de la date de réception.

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