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Merck

PMEF-NL

Fibroblastes embryonnaires primaires de souris EmbryoMax®

Synonyme(s) :

MEF Feeder Cells, neo PMEFs, neo MEFs, MEFs, Mouse Feeder Cells

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A propos de cet article

UNSPSC Code:
41106509
NACRES:
NA.81
eCl@ss:
32011203
Biological source:
mouse
Service technique
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biological source

mouse

manufacturer/tradename

Specialty Media, EmbryoMax®

technique(s)

cell culture | stem cell: suitable

input

sample type primary embryotic fibroblasts (PMEFs)
sample type induced pluripotent stem cell(s)
sample type: mouse embryonic stem cell(s)

shipped in

liquid nitrogen

Quality Level

storage temp.

-140 to -196°C

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General description

Avec la gamme EmbryoMax, les chercheurs disposent d'une solution de culture de cellules souches embryonnaires simple et efficace qui leur évite les longues étapes d'isolement et de préparation des cellules nourricières. Bon nombre de protocoles de culture de cellules souches embryonnaires nécessitent l'utilisation de fibroblastes embryonnaires primaires de souris (cellules PMEF). Dans ces protocoles, les cellules souches embryonnaires sont généralement cultivées sur une monocouche de cellules PMEF nourricières. Les cellules nourricières jouent deux rôles clés dans la culture de cellules souches : elles sécrètent plusieurs facteurs de croissance essentiels dans le milieu, contribuant à maintenir la pluripotence, et fournissent une matrice cellulaire pour la croissance des cellules souches embryonnaires.
Les fibroblastes embryonnaires primaires de souris (MEF), résistants à la néomycine, souche FVB, ne sont pas traités à la mitomycine C et servent de couche nourricière pour les cellules SE/SPi humaines et de souris. Les cellules MEF sont résistantes à la néomycine. Les cellules sont fournies au stade du 3e repiquage et peuvent être encore multipliées avant congélation pour un usage ultérieur.

Mise en culture de cellules nourricières MEF

Procédure :

1. Avant de décongeler les cellules nourricières PMEF, enduire des plaques/flacons de solution de gélatine.
2. Décongeler rapidement un ou plusieurs flacons de PMEF dans un bain-marie à 37 °C puis les transférer dans un tube de 15 ml (contenant déjà 10 ml de milieu pour cellules nourricières PMEF tiède). Retourner doucement le tube et le centrifuger à 300 × g pendant 4 à 5 minutes.
3. Retirer le surnageant et remettre en suspension le culot de cellules dans du milieu pour cellules nourricières tiède.
4. Retirer des plaques/flacons la solution de gélatine, et diviser en aliquotes la suspension de cellules nourricières PMEF selon les densités recommandées dans le Tableau 4.1 du guide des protocoles pour cellules SE de souris.
5. Incuber les cellules nourricières PMEF à 37 °C avec 5 % de CO2. Utiliser les Figures 4A, B et C du guide des protocoles pour cellules SE de souris pour estimer la bonne densité et le bon aspect des PMEF. Les plaques enduites de gélatine peuvent être utilisées pendant 12 à 14 jours.

Application

Cellules PMEF, résistantes à la néomycine, souche FVB, non traitées, faible nombre de repiquages (P3)

Biochem/physiol Actions

Fibroblastes embryonnaires primaires de souris

Packaging

5-6 × 106 cellules

Physical form

Les cellules sont fournies sous forme congelée en flacons individuels contenant environ 5-6 × 106 fibroblastes par flacon. Elles sont vendues par boîte de 5 flacons, au stade du 3e repiquage.

Preparation Note

Après réception, les flacons doivent être conservés à -80 °C. Pour une durée de conservation supérieure à 6 mois, le flacon se conserve pendant 2 ans dans de l'azote liquide en phase gazeuse (s'assurer que le bouchon est hermétiquement fermé).

Legal Information

EmbryoMax is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

flash_point_f

does not flash

flash_point_c

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Certificats d'analyse (COA)

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The cell culture protocols described in this instructional manual include the in vitro culture of murine ES cells using EmbryoMax products along with ESGRO® mLIF medium supplement, as well as feeder-free and serum-free ES cell culture using the ESGRO Complete™ line of products. Also included in this instructional manual are: methods for serum-free neuronal differentiation of mouse ES cells, iPS cell generation using STEMCCA™ lentivirus kits, cre-recombinase mediated excision of STEMCCA™ genes from iPS cells, derivation and rescue of new and existing ES cell lines using RESGRO™ Culture Medium and ESGRO Complete™ system.

"As transgenic mouse core laboratories know well, mouse models are a powerful means of determining the function of mammalian genes in the context of whole organisms—especially since over 95% of the mouse genome is similar to the human genome. However, you may not know that: 1. Laboratory mouse strains are descended from ancestors in modern-day Pakistan. 2. The first inbred strain of lab mouse was created in 1909. It was named DBA for its coat color: dilute brown non-agouti. 3. There is a mutant mouse actually named“Bad Hair Day” (Bhrd). Someone get this little guy a stylist! 4. Male mice, when treated with anticancer drugs, have been shown to pass on DNA instability to their offspring. 5. The founder of Jackson Laboratories, C. C. Little, once had lunch with Walt Disney to request that an animated film be created linking Mickey Mouse and the laboratory mouse. The request was denied."

Numéro d'article de commerce international

RéférenceGTIN
PMEF-NL04053252317163

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