Cocktail d′inhibiteurs de protéases cOmplete^™

Le cocktail d′inhibiteurs de protéases cOmplete^™ a été utilisé comme constituant :

• D′un tampon d′extraction destiné à l′extraction de protéines à partir de semis végétaux d′Arabidopsis.
• D′un tampon pour essai de radioimmunoprécipitation (RIPA) destiné à l′isolement d′une protéine à partir de lymphocytes.
• D′un tampon d′extraction destiné à la lyse de protoplastes.

cOmplete^™ est utilisé pour l'inhibition des protéases à sérine et à cystéine et des métalloprotéases dans les extraits de cellules bactériennes, végétales, de mammifère et de levure.
cOmplete contient des inhibiteurs de protéases réversibles et irréversibles. Par conséquent, nous recommandons l'ajout de cOmplete à tous les tampons et solutions mères normalement protégés avec des inhibiteurs de protéases, et pas seulement durant les étapes de purification initiale.
cOmplete contient de l'EDTA (1 pastille dans 50 ml produit une solution d'EDTA 1 mM). Le tampon d′extraction ne doit donc pas contenir de cations divalents comme Ca²⁺, Mg²⁺ ou Mn²⁺, sous peine de rendre incomplète l′inhibition des métalloprotéases. Si la protéine d'intérêt est purifiée par IMAC (chromatographie d'affinité sur ions métalliques immobilisés), comme c′est le cas des protéines recombinantes avec étiquette Poly-His par exemple, l'EDTA doit être éliminé (par dialyse par exemple) avant la chromatographie. Il est également possible d′utiliser le produit cOmplete sans EDTA. Ces pastilles sont identiques aux pastilles cOmplete, la seule différence étant qu′elles ne contiennent pas d′EDTA ni aucun autre agent chélateur.
Les pastilles cOmplete inhibent l'activité protéolytique dans les grands volumes d'extraction (jusqu'à 50 ml). Si vous travaillez avec des volumes plus petits (jusqu'à 10 ml), nous vous recommandons d'utiliser cOmplete Mini. La composition des pastilles cOmplete Mini est identique à celle des pastilles cOmplete normales.

Inhibe un large éventail de protéases à sérine et à cystéine, de métalloprotéases, ainsi que les calpaïnes.

Utilisez les pastilles d'inhibiteurs de protéases cOmplete pour protéger vos protéines d'un large éventail de protéases. En seulement quelques minutes, la non-inhibition de l'activité protéolytique peut dégrader la protéine que vous avez passé des jours à isoler. Chacune de ces pastilles hydrosolubles contient un mélange d'inhibiteurs de protéases qui inhibe l'activité protéolytique de la plupart des types de cellules, y compris les cellules animales, végétales, bactériennes et de levures. Aucune pesée ou mesure n'est nécessaire, ce qui garantit l'uniformité de vos résultats.

• Pratique : il vous suffit de pousser la pastille à dissolution rapide à travers le papier aluminium de l′emballage EASYpack et de la faire tomber dans votre tampon.
• Protection complète : protégez instantanément vos protéines contre une large gamme de protéases.
• Flexible : protégez les protéines contenues dans les extraits de quasiment n'importe quels tissus ou cellules, y compris ceux d'origine animale, végétale, bactérienne, de levures ou de champignons.
• Sûr : optez pour des inhibiteurs non toxiques qui ne présentent aucun risque pour vous ou votre entourage.

Les pastilles d'inhibiteur de protéases cOmplete inhibent un large éventail de protéases à sérine et à cystéine, de métalloprotéases, ainsi que les calpaïnes. Grâce à leur composition optimisée, les pastilles montrent d'excellents effets d'inhibition et conviennent particulièrement bien à la protection des protéines isolées de tissus animaux, de plantes, de levures et de bactéries.
Les pastilles cOmplete contiennent de l'EDTA et des inhibiteurs de protéases à la fois réversibles et irréversibles. Les inhibiteurs de protéases présents dans les pastilles cOmplete ne forment pas de complexes irréversibles avec les groupements SH des protéines.

Mélange exclusif de plusieurs inhibiteurs de protéases présentant une large spécificité inhibitrice.

20 pastilles de cocktail d′inhibiteurs de protéases cOmplete sous emballage individuel en plaquette alvéolée avec film d′aluminium.

Pastilles en plaquettes alvéolées avec scellage aluminium

Concentration de travail : 1 pastille pour 50 ml de solution d'extraction
Solution de travail : Manipulation

Pousser délicatement la pastille en dehors de la plaquette à travers le papier aluminium à l'aide du pouce (pour éviter de briser la pastille, ne pas utiliser l'ongle).

Préparation de la solution de travail

Une pastille cOmplete suffit à inhiber l'activité protéolytique de 50 ml de solution d'extraction. En cas d'activité protéolytique extrêmement élevée, il est recommandé d'utiliser une pastille pour 25 ml de tampon d′extraction. Les pastilles peuvent être ajoutées directement au milieu d'extraction. Il est également possible de préparer une solution mère (concentrée 25X).

Préparation de la solution mère (conc. 25 X)

Dissoudre une pastille cOmplete dans 2 ml d'eau distillée ou de tampon phosphate 100 mM à pH 7,0.
Conditions de stockage (solution de travail) : La solution mère peut être stockée 1 à 2 semaines entre 2 et 8°C et au moins 12 semaines entre -15 et -25°C.

Soluble dans les tampons aqueux, ou à ajouter directement au milieu d'extraction. Sinon, préparer une solution mère concentrée 25x dans 2 ml d'eau ou de tampon phosphate 100 mM à pH 7,0. La solution mère est stable 1 à 2 semaines entre 2 et 8 °C et au moins 12 semaines entre -15 et -25 °C, et peut être utilisée dans les solutions contenant des thiols entre 15 et 25 °C.

À conserver entre 2 et 8 °C (un stockage entre -15 et -25 °C est également possible).

cOmplete is a trademark of Roche