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A propos de cet article
NACRES:
NA.21
UNSPSC Code:
12352204
Biological source:
Bacillus polymyxa (dispase), Bacillus sp. (thermolysin - Bacillus thermoproteolyticus), Clostridium histolyticum (collagenase)
Service technique
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Laissez-nous vous aiderbiological source
Bacillus polymyxa (dispase), Bacillus sp. (thermolysin - Bacillus thermoproteolyticus), Clostridium histolyticum (collagenase)
description
low Thermolysin concentration
form
lyophilized
packaging
pkg of 10 mg (2x5 mg)
manufacturer/tradename
Roche
parameter
35-37 °C optimum reaction temp.
technique(s)
tissue processing: suitable
optimum pH
7.4
Catégories apparentées
General description
La technique de décellularisation la plus courante, par exemple pour la dissociation de tissus et la récolte de cellules, repose sur l'utilisation d'enzymes protéolytiques. Les protéases dégradent la matrice extracellulaire des tissus pour permettre la libération de cellules individuelles ou le détachement de cellules de culture en vue d'un repiquage. Le but de l'isolement des cellules est de maximiser le rendement des cellules dissociées viables et fonctionnelles.
Mélanges enzymatiques purifiés Liberase
Les enzymes Liberase sont des mélanges d′enzymes hautement purifiées conçus pour renforcer la qualité et la reproductibilité de la dissociation tissulaire tout en améliorant la viabilité et l'activité fonctionnelle des cellules isolées. Les mélanges enzymatiques purifiés Liberase remplacent les collagénases traditionnelles, qui sont un sous-produit brut et variable de la fermentation de Clostridium histolyticum.
Technologie enzymatique Liberase
La technologie enzymatique Liberase consiste à obtenir par purification des isoformes de collagénase clostridienne hautement spécifiques et à les mélanger à des protéases neutres hautement spécifiques, selon un rapport optimal, afin de dissocier efficacement les tissus primaires et les cellules en culture.
Pour plus d′informations, notamment sur la fabrication, la technologie ou le stockage, consulter le document « Liberase Research Grade Insights ». Vous trouverez également d'autres lectures sur le sujet dans l'onglet Documents.
Roche propose des préparations de mélanges enzymatiques purifiés Liberase de qualité spéciale, fabriqués conformément aux BPF. Pour en savoir plus sur les préparations de qualité « BPF ».
Remarques importantes :
Mélanges enzymatiques purifiés Liberase
Les enzymes Liberase sont des mélanges d′enzymes hautement purifiées conçus pour renforcer la qualité et la reproductibilité de la dissociation tissulaire tout en améliorant la viabilité et l'activité fonctionnelle des cellules isolées. Les mélanges enzymatiques purifiés Liberase remplacent les collagénases traditionnelles, qui sont un sous-produit brut et variable de la fermentation de Clostridium histolyticum.
Technologie enzymatique Liberase
La technologie enzymatique Liberase consiste à obtenir par purification des isoformes de collagénase clostridienne hautement spécifiques et à les mélanger à des protéases neutres hautement spécifiques, selon un rapport optimal, afin de dissocier efficacement les tissus primaires et les cellules en culture.
Pour plus d′informations, notamment sur la fabrication, la technologie ou le stockage, consulter le document « Liberase Research Grade Insights ». Vous trouverez également d'autres lectures sur le sujet dans l'onglet Documents.
Roche propose des préparations de mélanges enzymatiques purifiés Liberase de qualité spéciale, fabriqués conformément aux BPF. Pour en savoir plus sur les préparations de qualité « BPF ».
Remarques importantes :
- Ce produit est réservé à la recherche en sciences de la vie et à un usage in vitro. Ces produits ne peuvent être utilisés à des fins diagnostiques ou cliniques telles que la greffe d'îlots pancréatiques humains.
- Tous les produits Liberase et Liberase Blendzyme de première génération (Liberase HI, CI, RI, PI et Liberase Blendzyme 1, 2, 3, 4) ont été remplacés par les gammes de mélanges enzymatiques de deuxième génération Liberase de qualité « recherche » et Liberase de qualité « BPF ». Pour savoir comment opérer la transition depuis les anciennes enzymes Liberase.
Application
Le mélange Liberase™ TL (Thermolysin Low) de qualité « recherche » permet de dissocier un grand nombre de types de tissus différents, étape dans laquelle le mélange enzymatique doit avoir une grande pureté pour garantir une viabilité et un rendement cellulaires élevés. La quantité des sous-produits bactériens, comme les endotoxines, est divisée par un facteur pouvant aller jusqu'à plusieurs milliers.
Ce produit a servi à isoler des îlots pancréatiques de souris.
Ce produit a servi à isoler des îlots pancréatiques de souris.
Features and Benefits
Le mélange Liberase TL de qualité « recherche » contient de la collagénase I et de la collagénase II de grande pureté. Ces deux isoformes de la collagénase, mélangées selon un rapport précis, sont associées à une faible concentration de thermolysine, une protéase neutre non clostridienne.
- Optimisez la viabilité et le rendement des cellules isolées avec un mélange enzymatique à plus faible activité clostripaïne et trypsine et une teneur réduite en endotoxines.
- Bénéficiez d'un mélange enzymatique présentant une activité spécifique supérieure résultant de la grande pureté des collagénases I et II (déterminée par HPLC).
- Obtenez une meilleure reproductibilité expérimentale grâce à une plus grande uniformité entre les lots.
- Améliorez la sécurité grâce à une enzyme exempte de matières premières issues de tissus de mammifères ou d'oiseaux.
Preparation Note
Stabilisants : Calcium
Concentration de travail du mélange enzymatique Liberase de qualité « recherche »
Les enzymes Liberase ont une activité spécifique nettement supérieure à celle des collagénases traditionnelles. Cela signifie que la concentration de travail des enzymes purifiées Liberase de qualité « recherche », exprimée en mg/ml, est inférieure à celle des collagénases traditionnelles.
Si votre application figure dans la liste des applications Roche sur le site www.collagenase.com, utilisez la concentration de mélange Liberase de qualité « recherche » recommandée.
Si elle ne figure pas dans la liste, commencez par une concentration de 0,08 à 0,28 unité Wünsch/ml.
Le but est de trouver la concentration de départ la plus adaptée à vos besoins. Il s'agit d'un point de départ, la concentration finale pouvant varier en raison des différences entre les méthodes et les lots de collagénase traditionnelle.
Concentration de travail en collagénase
Multipliez la concentration de travail en collagénase obtenue précédemment (en mg/ml) par son activité spécifique (en unités Wünsch/mg, déterminée ci-dessus) pour obtenir une concentration en unités Wünsch/ml. Pour connaître la quantité de mélange enzymatique Liberase de qualité « recherche » à utiliser, commencez par multiplier votre concentration de travail en collagénase (en unités Wünsch/ml) par le volume total de votre solution enzymatique de travail de façon à connaître l'activité collagénase totale dont vous avez besoin (en unités Wünsch). Divisez cette valeur par la concentration de la solution mère de mélange Liberase de qualité « recherche » (voir « Reconstitution et stockage »). Vous obtenez le nombre de millilitres de solution mère de mélange enzymatique Liberase de qualité « recherche » à ajouter à votre solution enzymatique de travail.
Conditions de stockage (solution de travail) : Conservez la solution mère non utilisée sous forme d'aliquotes à usage unique entre -15 et -25 °C. Pour en savoir plus sur la stabilité du produit, rendez-vous sur le site internet de l'enzyme Liberase de Roche à l'adresse www.collagenase.com.
Remarque : Éviter les congélations et décongélations répétées !
Concentration de travail du mélange enzymatique Liberase de qualité « recherche »
Les enzymes Liberase ont une activité spécifique nettement supérieure à celle des collagénases traditionnelles. Cela signifie que la concentration de travail des enzymes purifiées Liberase de qualité « recherche », exprimée en mg/ml, est inférieure à celle des collagénases traditionnelles.
Si votre application figure dans la liste des applications Roche sur le site www.collagenase.com, utilisez la concentration de mélange Liberase de qualité « recherche » recommandée.
Si elle ne figure pas dans la liste, commencez par une concentration de 0,08 à 0,28 unité Wünsch/ml.
Le but est de trouver la concentration de départ la plus adaptée à vos besoins. Il s'agit d'un point de départ, la concentration finale pouvant varier en raison des différences entre les méthodes et les lots de collagénase traditionnelle.
Concentration de travail en collagénase
Multipliez la concentration de travail en collagénase obtenue précédemment (en mg/ml) par son activité spécifique (en unités Wünsch/mg, déterminée ci-dessus) pour obtenir une concentration en unités Wünsch/ml. Pour connaître la quantité de mélange enzymatique Liberase de qualité « recherche » à utiliser, commencez par multiplier votre concentration de travail en collagénase (en unités Wünsch/ml) par le volume total de votre solution enzymatique de travail de façon à connaître l'activité collagénase totale dont vous avez besoin (en unités Wünsch). Divisez cette valeur par la concentration de la solution mère de mélange Liberase de qualité « recherche » (voir « Reconstitution et stockage »). Vous obtenez le nombre de millilitres de solution mère de mélange enzymatique Liberase de qualité « recherche » à ajouter à votre solution enzymatique de travail.
Conditions de stockage (solution de travail) : Conservez la solution mère non utilisée sous forme d'aliquotes à usage unique entre -15 et -25 °C. Pour en savoir plus sur la stabilité du produit, rendez-vous sur le site internet de l'enzyme Liberase de Roche à l'adresse www.collagenase.com.
Remarque : Éviter les congélations et décongélations répétées !
Reconstituez l'enzyme lyophilisée dans de l'eau stérile pour préparation injectable ou dans un tampon de dissociation tissulaire. N'ajoutez pas de sérum ou d'autres composés susceptibles d′influer sur l′activité enzymatique, tels que de l'albumine ou des inhibiteurs de protéase, au tampon de dissociation. La stabilité enzymatique diminue lorsque la concentration et la température augmentent (4 °C). Veillez donc à éviter ces conditions.
Reconstituez la totalité du flacon. Ne divisez pas le lyophilisat en aliquotes. L'introduction d'humidité dans le flacon provoque une baisse de l'activité enzymatique.
Placez le flacon sur de la glace pour réhydrater l'enzyme lyophilisée.
Agitez doucement le flacon à une température de 2 à 8 °C jusqu'à dissolution complète de l'enzyme (max. 30 min).
En fonction du type de tampon de dissociation tissulaire utilisé pour dissoudre le Mélange enzymatique purifié de qualité « recherche » Liberase, une légère précipitation peut se produire ; le précipité se dissout facilement dans la solution de travail diluée et n'influe en rien sur l'activité enzymatique.
Utilisez une aliquote de la solution mère pour préparer la solution de travail.
Volume de reconstitution
2 ml (1 flacon avec un conditionnement de 5 mg–10 mg), 10 ml (1 flacon avec un conditionnement de 50 mg–100 mg)
Collagénase (en unités Wünsch/ml)
13 (1 flacon avec un conditionnement de 5 mg–10 mg), 26 (1 flacon avec un conditionnement de 50 mg–100 mg)
Concentration totale en collagénase [mg/ml]
2,5 (1 flacon avec un conditionnement de 5 mg–10 mg), 5,0 (1 flacon avec un conditionnement de 50 mg–100 mg)
Reconstituez la totalité du flacon. Ne divisez pas le lyophilisat en aliquotes. L'introduction d'humidité dans le flacon provoque une baisse de l'activité enzymatique.
Placez le flacon sur de la glace pour réhydrater l'enzyme lyophilisée.
Agitez doucement le flacon à une température de 2 à 8 °C jusqu'à dissolution complète de l'enzyme (max. 30 min).
En fonction du type de tampon de dissociation tissulaire utilisé pour dissoudre le Mélange enzymatique purifié de qualité « recherche » Liberase, une légère précipitation peut se produire ; le précipité se dissout facilement dans la solution de travail diluée et n'influe en rien sur l'activité enzymatique.
Utilisez une aliquote de la solution mère pour préparer la solution de travail.
Volume de reconstitution
2 ml (1 flacon avec un conditionnement de 5 mg–10 mg), 10 ml (1 flacon avec un conditionnement de 50 mg–100 mg)
Collagénase (en unités Wünsch/ml)
13 (1 flacon avec un conditionnement de 5 mg–10 mg), 26 (1 flacon avec un conditionnement de 50 mg–100 mg)
Concentration totale en collagénase [mg/ml]
2,5 (1 flacon avec un conditionnement de 5 mg–10 mg), 5,0 (1 flacon avec un conditionnement de 50 mg–100 mg)
À conserver entre 15 °C et 25 °C (au sec). Veuillez noter que la date de péremption ne figure pas sur les flacons individuels.
Other Notes
Produit réservé à la recherche en sciences de la vie. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.
Legal Information
Liberase is a trademark of Roche
signalword
Danger
Hazard Classifications
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
target_organs
Respiratory system
Classe de stockage
11 - Combustible Solids
wgk
WGK 1
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
hcodes
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