Cocktails d′inhibiteurs de protéases cOmplete^™

Performances évaluées à l'aide d'un extrait de pancréas.

Le cocktail d′inhibiteurs de protéases cOmplete^™ a été utilisé comme constituant

• d'un tampon de lyse pour l'homogénéisation de muscle lisse caverneux (CSM) de rat pour l'obtention de fractions cytosoliques et membranaires
• d'un tampon A froid pour préparer les extraits cytosoliques et nucléaires
• d'un tampon de lyse pour l'homogénéisation de tissus afin de déterminer l'expression protéique par western blotting
• d'une solution saline tamponnée au phosphate (PBS) pour la lyse de rétines de rat en vue d'un ELISA (enzyme linked immunosorbent assay)

cOmplete^™ est utilisé pour l'inhibition des protéases à sérine et à cystéine et des métalloprotéases dans des extraits de cellules bactériennes, végétales, de mammifère et de levure.
cOmplete contient des inhibiteurs de protéases réversibles et irréversibles. Par conséquent, nous recommandons l'ajout de cOmplete à tous les tampons et les solutions mères normalement protégés avec des inhibiteurs de protéases, et pas seulement durant les étapes de purification initiale.
cOmplete contient de l'EDTA (1 pastille produit une solution d'EDTA 1 mM EDTA dans 50 ml). Par conséquent, le tampon d'extraction ne doit pas contenir de cations divalents comme Ca²⁺, Mg²⁺ ou Mn²⁺, sinon l'inhibition des métalloprotéases pourrait être incomplète. Si la protéine d'intérêt est purifiée par IMAC (chromatographie d'affinité sur ions métalliques immobilisés), les protéines recombinantes avec étiquette Poly-His par exemple, l'EDTA doit être éliminé (par dialyse par exemple) avant la chromatographie.
Le produit cOmplete sans EDTA peut également être utilisé. Ces pastilles sont identiques à cOmplete, à l'exception de EDTA et autre agent chélatant qui ne sont pas présents.
Les pastilles cOmplete inhibent l'activité protéolytique dans les grands volumes d'extraction (jusqu'à 50 ml). Si vous travaillez avec des volumes plus petits (jusqu'à 10 ml), nous vous recommandons d'utiliser cOmplete Mini. La composition des pastilles cOmplete Mini est identique à celle des pastilles cOmplete normales.

Mélange de plusieurs inhibiteurs de protéases avec une large spécificité d'inhibition. Pour l'inhibition des protéases à sérine et à cystéine et des métalloprotéases dans des extraits de cellules bactériennes, végétales, de mammifère et de levure.

Utilisez les pastilles d'inhibiteurs de protéases cOmplete pour protéger vos protéines d'un large éventail de protéases. En seulement quelques minutes, la non-inhibition de l'activité protéolytique peut dégrader la protéine que vous avez passé des jours à isoler. Chacune de ces pastilles hydrosolubles contient un mélange d'inhibiteurs de protéases qui inhibe l'activité protéolytique de la plupart des types de cellules, y compris les cellules de bactéries, de levures, végétales et animales. Aucune pesée ou mesure n'est nécessaire, ce qui garantit l'uniformité de vos résultats.

• Facile d'utilisation : il vous suffit de placer une pastille à dissolution rapide dans votre tampon.
• Protection complète : protégez instantanément vos protéines contre une large gamme de protéases.
• Souple d'utilisation : protégez les protéines contenues dans les extraits de quasiment n'importe quels tissus ou cellules, y compris ceux d'origine animale, végétale, bactérienne, de levures ou de champignons.
• Sûr : optez pour des inhibiteurs non toxiques qui ne présentent aucun risque pour vous ou votre entourage.
• Adapté à la purification IMAC : Purifiez des protéines avec une étiquette poly-histidine avec la résine de purification His-Tag cOmplete

Les pastilles d'inhibiteur de protéases cOmplete inhibent un large éventail de protéases à sérine et à cystéine, de métalloprotéases, ainsi que des calpaïnes. Grâce à leur composition optimisée, les pastilles montrent d'excellents effets d'inhibition et conviennent particulièrement bien à la protection des protéines isolées de tissus animaux, de plantes, de levures et de bactéries. Les pastilles cOmplete contiennent de l'EDTA et des inhibiteurs de protéases à la fois réversibles et irréversibles.

L'efficacité de l'inhibition est testée rapidement et avec une sensibilité élevée avec le Universal Protease Substrate. Pour la recherche en sciences de la vie uniquement. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Mélange breveté de plusieurs inhibiteurs de protéases présentant une large spécificité d'inhibition.

Pastilles en flacons de verre

Concentration de travail : 1 pastille pour 50 ml de solution d′extraction
Solution de travail : Préparation de la solution de travail :

Une pastille d'inhibiteur de protéases cOmplete suffit à inhiber l'activité protéolytique de 50 ml de solution d'extraction. En cas d'activité protéolytique extrêmement élevée, il est recommandé d'utiliser une pastille pour 25 ml de tampon d′extraction. Les pastilles peuvent être ajoutées directement au milieu d'extraction. Il est également possible de préparer une solution mère (concentrée 25x).

Préparation de la solution mère (conc. 25X) :

Dissoudre une pastille d'inhibiteurs de protéases cOmplete dans 2 ml d'eau distillée ou 2 ml de tampon phosphate 100 mM, pH 7,0. La solution mètre peut également être préparée dans du tampon Tris 10 mM, pH 7,2 à 7,5.
Conditions de stockage (solution de travail) : La solution mère peut être stockée 1 à 2 semaines entre 2 et 8 °C et au moins 12 semaines entre -15 et -25 °C.

Soluble dans les tampons aqueux ou à ajouter directement au milieu d'extraction. Sinon, préparer une solution mère concentrée 25x dans 2 ml d'eau ou de tampon phosphate 100 mM à pH 7,0. La solution mère est stable 1 à 2 semaines entre 2 et 8 °C et au moins 12 semaines entre -15 et -25 °C; et peut être utilisée dans les solutions à base de thiols entre 15 et 25 °C.

cOmplete is a trademark of Roche