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Merck

DIUTPS-RO

Roche

Digoxigénine-11-dUTP, stable en milieu alcalin

Synonyme(s) :

Digoxigénine-11-dUTP, labile en milieu alcalin

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A propos de cet article

UNSPSC Code:
41105500
NACRES:
NA.54
Assay:
≥85% (HPLC)
Form:
solution
Storage temp.:
−20°C
Service technique
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assay

≥85% (HPLC)

form

solution

mol wt

Mr 1090.7

packaging

pkg of 125 μL (11558706910 [1 mM]), pkg of 5 × 125 μL (11570013910 [5x1 mM]), pkg of 25 μL (11093088910 [1 mM])

manufacturer/tradename

Roche

λmax

222 and 292 nm, 22430 and 8780

storage temp.

−20°C

General description

La digoxigénine-11-dUTP stable en milieu alcalin est fournie dans une solution de sel de tétralithium à 1 mM.

Application

La digoxigénine-11-dUTP stable en milieu alcalin a été utilisée pour marquer des sondes pour
l′hybridation in situ en fluorescence (FISH) et l′amplification en chaîne par polymérase (PCR).
Remarque : Lorsque ce nucléotide est exposé à 0,1 - 0,5 M NaOH entre +15 et +25 °C, la portion DIG reste attachée. Ce produit est donc idéal pour l′ADN marqué à la DIG qui doit résister à une exposition à un traitement alcalin. Cependant, si vous souhaitez préparer une sonde marquée à la DIG qui peut être retirée par dénaturation en milieu alcalin (p. ex. pour dépouiller les blots avant une réhybridation), n′utilisez pas cette préparation stable aux alcalis. Utilisez plutôt la forme de DIG-11-dUTP labile en milieu alcalin.

Biochem/physiol Actions

La digoxigénine (DIG)-11-désoxyuridine triphosphate (dUTP) remplace la désoxythimidine triphosphate (dTTP) dans la réaction de marquage de l′ADN par amorçage aléatoire ou par translation de coupure dans un rapport 35 % de DIG-11-dUTP sur 65 % de dTTP. La DIG-11-dUTP peut également remplacer la dTTP dans l′amplification en chaîne par polymérase (PCR) par l′ADN polymérase Taq, le marquage de l′extrémité 3′ (tailing) par la transférase terminale et la synthèse de l′ADNc par le kit Transcriptor ou la transcriptase inverse M-MuLV, par exemple. C′est un substrat idéal pour les ADN polymérases, notamment Taq, la transférase terminale et la transcriptase inverse.

Features and Benefits

La digoxigénine est liée à la désoxyuridine triphosphate par une liaison éther résistante aux alcalis.

Résistance aux alcalis : La préparation est stable en présence de NaOH 0,1 - 0,5 M entre +15 et +25 °C.

Preparation Note

Solution de travail : Nous vous recommandons de préparer un mélange de désoxynucléotides contenant dATP, dCTP, dGTP, dTTP (10 mM chacun) ; p. ex, pour préparer 100 μl de mélange de nucléotides, ajouter 10 μl de dATP, dCTP, dGTP, dTTP (chacun) à 60 μl d′eau de qualité PCR).
Conditions de stockage (solution de travail) : Une décomposition d′environ 5 % peut se produire dans un délai de 4 semaines quand stockée entre 15 et 25 °C.

Analysis Note

Analyse typique : Au moins 85 % DIG-11-dUTP (CLHP, % d′aire)
Contrôle fonctionnel par RPL (marquage par amorçage aléatoire).

Other Notes

Pour la recherche en sciences de la vie uniquement. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.


Classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

wgk

nwg

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does not flash

flash_point_c

does not flash



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