Anti-HA antibody produced in rabbit

L'anticorps anti-HA peut être utilisé dans des analyses par immunoprécipitation et western blotting.
Il est également adapté aux analyses par immunofluorescence indirecte (10 à 20 μg/ml, sur cellules transfectées avec des protéines de fusion marquées à l'HA), par immunoprécipitation (2,5 à 4 μg/test, sur protéines de fusion marquées à l'HA provenant de lysats cellulaires) et par western blotting (0,5 à 0,8 μg/ml, sur extraits de cellules transfectées avec des protéines de fusion marquées à l'HA).

L'anticorps anti-HA est spécifique des protéines de fusion marquées à l'HA à l'extrémité N- ou C-terminale.

L'anticorps réagit spécifiquement avec les protéines de fusion marquées à l'HA, par immunoblotting et immunoprécipitation.

L'hémagglutinine (HA) est une glycoprotéine du virus de la grippe qui régule les fonctions de fusion membranaire et d'attachement aux récepteurs lors de la pénétration virale et de l'infection cellulaire. Le virus pénètre dans la cellule hôte par endocytose suivie d'une fusion membranaire médiée par l'antigène HA. L'HA joue un rôle clé dans la pathogenèse virale et la réponse de l'hôte à l'infection.
Le gène HA est souvent utilisé comme marqueur d'affinité des protéines cibles dans les systèmes de vecteur d'expression recombinants. Les protéines marquées à l'HA produites par ces systèmes créent des produits de fusion stables qui ne perturbent ni la fonction ni la répartition des protéines cibles. Les anticorps anti-HA peuvent détecter des bandes présentant une réactivité croisée dans certaines cellules de mammifères. Le peptide HA inducteur d'immunité (référence I2149) inhibe spécifiquement la coloration de la bande des protéines marquées à l'HA. La séquence d'acide nucléique qui code le peptide HA a été intégrée dans divers plasmides d'expression à côté du site de clonage, permettant ainsi le clonage et l'expression de protéines de fusion marquées à l'HA. Ces protéines de fusion peuvent être exprimées dans des cellules de différents organismes : bactéries, levures, insectes et mammifères. Dans la protéine de fusion, la séquence HA peut constituer un site de reconnaissance cible pour certains anticorps, permettant ainsi la détection, la localisation cellulaire, la caractérisation, la quantification, l'analyse fonctionnelle et la purification par affinité de la protéine marquée à l'HA et des protéines qui y sont liées. L'insertion de l'épitope HA dans différentes régions d'une protéine cellulaire et l'étude de l'immunoréactivité de cet épitope dans des cellules intactes et perméabilisées permettent d'analyser le niveau d'expression cellulaire, la topologie et l'activité fonctionnelle de la protéine marquée. La détection de l'étiquette HA au moyen d'anticorps fait gagner du temps en évitant de produire des anticorps spécifiques de protéines faiblement immunogènes, présentant une réactivité croisée, difficiles à purifier, instables, peu abondantes ou d'identification récente.

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Le gène de l'hémagglutinine (HA) se situe sur le segment 4 du génome du virus de la grippe B. L'antigène HA est un antigène dominant présent à la surface du virus de la grippe. L'HA est un homotrimère dont chaque monomère se présente sous la forme d'un polypeptide unique. Chaque monomère est clivé en deux sous-unités, HA1 et HA2, par la protéase de l'hôte.
La protéine hémagglutinine du virus de la grippe est un nonapeptide dérivé de la glycoprotéine majeure de la membrane spiculée du virus de la grippe humaine. Cette glycoprotéine souche-spécifique est un homotrimère constitué de monomères de 84 kDa. Chaque monomère contient deux sous-unités reliées par un pont disulfure : HA1 et HA2.
L'anticorps anti-HA est produit chez le lapin à l'aide d'un peptide de synthèse correspondant aux résidus d'acides aminés de l'hémagglutinine (HA) du virus de la grippe humaine, conjugué à l'hémocyanine de patelle (KLH). Cet anticorps est purifié par affinité sur le peptide inducteur d'immunité immobilisé.

L'anticorps anti-HA est spécifique des protéines de fusion marquées à l'HA à l'extrémité N- ou C-terminale. Il peut détecter des bandes présentant une réactivité croisée dans certaines cellules de mammifères. Le peptide HA inducteur d'immunité (référence I2149) inhibe spécifiquement la coloration de la bande des protéines marquées à l'HA.

Peptide de synthèse correspondant aux résidus d'acides aminés de l'hémagglutinine (HA) du virus de la grippe humaine, connu sous le nom d'étiquette HA ou HA-tag, conjugué à l'hémocyanine de patelle (KLH).

Solution dans un tampon phosphate salin 0,01 M (pH 7,4) contenant 1 % de sérum albumine bovine et de l'azide de sodium 15 mM.

En cas d'utilisation en continu, conserver le produit entre 2 °C et 8 °C pendant un mois maximum.
Pour un stockage prolongé, congeler le produit en aliquotes de travail. Il est déconseillé de procéder à des congélations/décongélations répétées. Si une légère turbidité apparaît lors d'un stockage prolongé, clarifier la solution par centrifugation avant utilisation. Toute dilution de travail non utilisée dans les 12 heures doit être jetée.