Puromycine dihydrochloride

La puromycine est un aminonucléoside aux propriétés antibiotiques dérivé de Streptomyces alboniger. Elle permet de sélectionner les cellules qui contiennent le gène de résistance puromycine N-acétyltransférase (PAC). Elle a été utilisée pour étudier la viabilité des cellules musculaires lisses vasculaires après traitement chez le lapin. La puromycine permet de produire des porcelets transgéniques exprimant la protéine fluorescente verte (GFP) après clonage de cellules somatiques et transplantation embryonnaire.

Mode d'action : La puromycine inhibe la synthèse des protéines au moyen d'une terminaison prématurée de la chaîne en se comportant comme un analogue de l'extrémité 3′-terminale de l'aminoacyl-ARNt. La puromycine est également un inhibiteur réversible de la dipeptidyl peptidase II (protéase à sérine) et de l'alanyl aminopeptidase cytosolique.

Mode de résistance : Le gène de la puromycine acétyltransférase est un gène de résistance efficace.

Spectre antimicrobien : Ce produit est actif sur les micro-organismes à Gram positif, moins actif sur les bacilles acidorésistants et encore moins actif sur les micro-organismes à Gram négatif. La puromycine peut empêcher la croissance des bactéries, des protozoaires, des algues et des cellules de mammifères ; elle agit rapidement, tuant 99 % des cellules en 2 jours.

La puromycine, aussi appelée clomycine ou chlorhydrate de stylomycine, est une aminonucléase antibiotique et un inhibiteur de la synthèse des protéines. Elle est produite par Streptomyces alboniger, une bactérie du sol du type actinomycète, via une série de réactions enzymatiques. La puromycine est efficace contre les cellules procaryotes et eucaryotes ; elle interfère avec le fonctionnement de l'ARN et inhibe ainsi la synthèse des protéines. Elle permet également d'inhiber l'aminopeptidase et l'enképhalinase. La croissance des bactéries, des protozoaires, des algues et des cellules de mammifères est rapidement stoppée par la puromycine, hormis pour les cellules contenant le gène pac qui lui résistent. Le gène pac permet de produire la puromycine-N-acétyl-transférase, qui inactive la puromycine par acétylation.

La similitude structurale de la puromycine avec l'extrémité de l'ARNt portant l'acide aminé lui permet de pénétrer dans le ribosome durant la synthèse des protéines, de se lier à la chaîne polypeptidique naissante et de stopper l'allongement de celle-ci. Couramment utilisée en culture cellulaire, la puromycine sert d'agent sélectif pour les cellules qui ont été transformées avec un gène conférant une résistance à la puromycine.

Conserver le récipient bien fermé dans un endroit sec et bien ventilé.

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Ce produit est concentré à 10 mg/ml dans de l'eau. Il a été testé sur des cellules HeLa pour l'arrêt de la croissance cellulaire et la sélection des cellules après transfection du gène de résistance pac.