Anticorps monoclonal de souris anti-tubuline acétylée antibody produced in mouse

L'anticorps monoclonal anti-tubuline acétylée (isotype IgG2b de souris) est dérivé de l'hybridome 6-11B-1 produit par la fusion de cellules de myélome de souris avec des splénocytes issus d'une souris immunisée avec de la tubuline acétylée provenant du bras extérieur de Strongylocentrotus purpuratus (oursin comestible). La tubuline est un hétérodimère constitué de tubuline a et de tubuline b ; les deux sous-unités ont un poids moléculaire de 50 000 et partagent une homologie considérable.

Le gène de la tubuline α, également appelée tubuline α 4a (TUBA4A), est situé sur le chromosome 2q35 de l'homme. Ce gène code un membre de la famille des tubulines α qui contient 448 acides aminés. TUBA4A appartient à la sous-famille des tubulines, éléments constitutifs essentiels des microtubules. La sous-unité α de la tubuline a un poids moléculaire de 50 000 Da.

tubuline acétylée issue du bras extérieur de Strongylocentrotus purpuratus (oursin comestible).

L'anticorps monoclonal anti-tubuline acétylée produit chez la souris a été utilisé dans les techniques suivantes :

• dot blot quantitatif
• immunofluorescence
• western blot
• immunocytochimie
• essai immuno-enzymatique (ELISA)
• dosage radio-immunologique (RIA) en phase solide
• microscopie électronique

L'anticorps anti-tubuline acétylée a aussi été employé pour colorer des coupes incluses en paraffine colorées au X–gal pour des analyses d'immunohistochimie.

Cet anticorps a été utilisé pour détecter des tubulines α acétylées issues de nombreux organismes, notamment des protistes, des plantes, des invertébrés et des vertébrés. Il reconnaît un épitope situé sur l'isoforme α3 de la tubuline α axonémique de Chlamydomonas, à moins de quatre résidus de Lys⁴⁰ lorsque cet acide aminé est acétylé. Une séquence très similaire à celle détectée par l'anticorps dans Chlamydomonas est présente dans la majorité des tubulines α, mais la région correspondante diverge nettement dans certaines isoformes de tubuline α du poulet, de Drosophila et de levures. Parfois, l'épitope reconnu par l'anticorps peut être absent ou masqué, comme c'est le cas dans la lignée cellulaire de type cellule épithéliale du kangourou-rat PtK₂.

La tubuline acétylée est associée à l'assemblage des axonèmes dans divers organismes. Elle pourrait jouer un rôle crucial dans la différenciation de la structure et de la fonction des microtubules. Une modification post-translationnelle de la tubuline α, à savoir l'addition réversible d'un groupe acétyle sur Lys40 par une acétylase spécifique, produit la tubuline acétylée.

En solution dans une solution saline tamponnée au phosphate 0,01 M à pH 7,4, contenant de l‘azide de sodium 15 mM.

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