Anti-Ash2L Antibody

濃度：ロットに固有のデータシートを参照してください。

0.05%アジ化ナトリウムを含むウサギポリクローナル抗体血清。

未精製。

C2C12筋芽細胞ライセートにおいてウェスタンブロッティングにより評価済み。

ウェスタンブロッティング： 希釈倍率1:1,000で使用、この抗血清は、10 µgのC2C12マウス筋芽細胞ライセートにおいてAsh2Lを検出できます。

クロマチン免疫沈降（ChIP）：分化中のC2C12マウス筋芽細胞において、CkmとMyogのプロモーター部位へのAsh2Lの動員を検出できます。MAP kinase p38阻害またはshRNA介在型Mef2c/Mef2d二重ノックダウンにより、標的プロモーター部位におけるAsh2L濃縮が減少しました（Rampalli, S., et al. (2007).Nat. Struct.Mol. Biol. 14(12):1150-1156）。

免疫沈降：分化中のC2C12マウス筋芽細胞の核抽出物からAsh2Lと共にMef2を同時免疫沈降できます（Rampalli, S., et al. (2007).Nat. Struct.Mol. Biol. 14(12):1150-1156）。

ウェスタンブロッティング：全長、N末端（a.a. 96 281）およびC末端（a.a. 317-628）のリコンビナントヒトAsh2Lコンストラクトを検出できます。全長およびC末端フラグメントは、GSTタグ付きRbBP5によりプルダウンアッセイにおいて検出されますが、N末端フラグメントは検出されません（Avdic, V., et al. (2011).構造19(1):101-108）。

ウェスタンブロッティング：分化中のC2C12マウス筋芽細胞からのMef2、MLL1、MLL2、MLL3、MLL4、SET1の免疫沈降物においてAsh2Lを検出できます。Mef2 IP中のAsh2Lは、p38 MAPキナーゼ阻害薬で処理した細胞からのライセートを使用したところ、大幅に減少しました（Rampalli, S., et al. (2007).Nat. Struct.Mol. Biol. 14(12):1150-1156）。

ウェスタンブロッティング：p38alphaによるリン酸化後のFLAGタグ付きMef2cおよびMef2dにより、分化中のC2C12マウス筋芽細胞の核抽出物からのAsh2Lプルダウン量の増加を検出できますが、Mef2d p38リン酸化部位変異体ではAsh2Lのプルダウンは確認されませんでした（Rampalli, S., et al. (2007).Nat. Struct.Mol. Biol. 14(12):1150-1156）。

ウェスタンブロッティング：全細胞ライセートおよび核抽出物においてAsh2Lを検出できますが、分化中のC2C12マウス筋芽細胞からの細胞質抽出物では検出されず、Ash2L shRNA処理により標的バンド強度は低下します（Rampalli, S., et al. (2007).Nat. Struct.Mol. Biol. 14(12):1150-1156）。

抗Ash2L（カタログ番号ABE1972）は、特異性の高いウサギポリクローナル抗体であり、Set1/Ash2 histone methyltransferase complex subunit Ash2Lを標的とし、クロマチン免疫沈降（ChIP）、免疫沈降、ウェスタンブロッティングにおいて検証されています。

研究カテゴリー
エピジェネティクス・核内機能分子&

特異性は、Ash2L shRNAで処理したC2C12細胞において標的バンド検出が低下したことにより確認されました（Rampalli, S., et al. (2007).Nat. Struct.Mol. Cell. 14(12):1150-1156）。

メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。

Set1/Ash2 histone methyltransferase complex subunit ASH2（UniProt Q9UBL3 & Q91X20）（別名：ASH2-like protein）は、ヒトASH2L（別名：ASH2L1）およびマウスAsh2l遺伝子（Gene ID 9070 & 23808）によってコードされています。Ash2Lは、Ash2L、RBBP5、WDR5、HDPY-30、7つのSET/MLLタンパク質（SETA、SETB、MLL1～MLL5）の1つ、およびその他のMLL複合体特異的非コアタンパク質で構成されているMLL histone H4 Lys4 (H4K4) methyltransferase複合体の成分です。例えば、MLL3/4複合体には、H3K27 demehtylase UTXと受容体コアクチベーターNCOA6が含まれます。Ash2Lは、RbBP5およびWdr5を含みますが、SET/MLLタンパク質は含まない複合体の中にも存在しています。Ash2Lは、そのN末端領域内にDNA結合フォークヘッド様ヘリックス・ウィング・ヘリックスドメイン（ヒトAsh2Lのa.a. 67-177、マウスAsh2Lのa.a. 63-172）を有し、タンパク質間相互作用に関与しているそのC末端領域内にB30.2/SPRY（ヒトAsh2Lのa.a. 360-583、およびマウスAsh2Lのa.a. 355-578）ドメインを持ちます。Ash2Lは、AP2G、GATA3、MEF2およびTBX1と相互作用し、これらの転写活性化に関与していることが報告されています。さらに、p53の誘導は、H3K4me3のアポトーシス促進性標的プロモーターにおけるエピジェネティック修飾を増加させ、Wdr5、RbBP5、Ash2Lのそれぞれのアポトーシス促進遺伝子プロモーターにおける占有率を高めることが明らかになっています。Ash2Lの過剰発現は、化学療法に反応してp53のアポトーシス促進遺伝子発現とがん細胞のp53依存的アポトーシスを亢進させることが報告されていますが、Ash2Lのサイレンシングは、p53依存的標的遺伝子発現を抑制します。

実測値：約77 kDa。算出値：68.72/56.48/60.21 kDa（ヒトアイソフォーム1/2/3）、68.25 kDa（マウス）。一部のライセートでは、特性が明らかになっていないバンドが認められることがあります。

リコンビナント全長ヒトAshL。

-20°Cで受領日から1年間安定です。

取扱い推奨事項：25 μLのろ過された実験室グレードの水またはPBSを加えて溶解します。微小遠心管に分注してから、-20°Cで保存してください。凍結融解を繰り返さないでください。IgGに損傷を与える、または製品性能に影響を及ぼすおそれがあります。