製品名
PCR DIGプローブ合成キット, sufficient for 25 reaction (50 μL final reaction volume)
usage
sufficient for 25 reaction (50 μL final reaction volume)
manufacturer/tradename
Roche
technique(s)
PCR: suitable
storage temp.
−20°C
Quality Level
Analysis Note
PCR DIGプローブ合成キットの各ロットは、PCRによって機能テスト済みです。増幅生成物は、ゲノミックサザンブロットにおいて分析されます。
パッケージ内の説明書に記載のPCR条件において、コントロール反応により、442 bpの増幅生成物が得られます。PCRプロセスにおける複数のDIG-dUTPの取り込みにより、PCR生成物の分子量は、非標識の場合と比べて大幅に増加します。10 μgのヒトゲノムDNAのPCR生成物のハイブリダイゼーション後、化学発光検出により、特定のフラグメントパターンが検出されます。
パッケージ内の説明書に記載のPCR条件において、コントロール反応により、442 bpの増幅生成物が得られます。PCRプロセスにおける複数のDIG-dUTPの取り込みにより、PCR生成物の分子量は、非標識の場合と比べて大幅に増加します。10 μgのヒトゲノムDNAのPCR生成物のハイブリダイゼーション後、化学発光検出により、特定のフラグメントパターンが検出されます。
Application
PCR DIGプローブ合成キットにより生成されたジゴキシゲニン（DIG）標識化DNAプローブは、サザンブロット法およびノーザンブロット法においてまれなmRNAの低（単一）コピー遺伝子の検出に適しています。DIG標識化DNAプローブは、in situでのハイブリダイゼーション中にDNAを標識することにも使用されています。
提供されるdUTP-ヌクレオチドミックスの濃度は、プローブの長さによって調節できます。標識化の効果は、アガロースゲル上で迅速に確認できます。
膜の剥離と再プローブは、添付文書のプロトコールに従って複数回行うことが可能です。
1回のPCR標識反応（50 μL）により通常、20 mLのハイブリダイゼーション溶液に十分なプローブが作成されます。本キットは、約25回分の反応（50 μL）に使用できます。
提供されるdUTP-ヌクレオチドミックスの濃度は、プローブの長さによって調節できます。標識化の効果は、アガロースゲル上で迅速に確認できます。
膜の剥離と再プローブは、添付文書のプロトコールに従って複数回行うことが可能です。
1回のPCR標識反応（50 μL）により通常、20 mLのハイブリダイゼーション溶液に十分なプローブが作成されます。本キットは、約25回分の反応（50 μL）に使用できます。
General description
PCR DIG プローブ合成キットには、アルカリに不安定なジゴキシゲニン（DIG）-11デオキシウリジン三リン酸（dUTP）が含まれています。このキットは、ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）において感受性の高いプローブである、DIG標識化DNAプローブを簡便かつ効率的に生成します。プローブは、PCRの手法により、（アルカリに不安定な）DIG-11dUTPで標識されます。DIG-dUTPとdTTPの比率は1：2です。
PCR DIGプローブ合成キットには、Expand High Fidelity DNAポリメラーゼミックスが含まれています。プルーフリーディング活性を有する、この堅牢な酵素ミックスは、10 pgプラスミドDNAと10 ngゲノムDNAをテンプレートとして用いて、長さ40 bpから5 kbまでのプローブを重合します。DIG標識化プローブは、1年以上安定です。
PCR DIGプローブ合成キットには、Expand High Fidelity DNAポリメラーゼミックスが含まれています。プルーフリーディング活性を有する、この堅牢な酵素ミックスは、10 pgプラスミドDNAと10 ngゲノムDNAをテンプレートとして用いて、長さ40 bpから5 kbまでのプローブを重合します。DIG標識化プローブは、1年以上安定です。
Packaging
1つのキットには6のコンポーネントが含まれています。
キットの構成要素のみ
製品番号
詳細
- Enzyme Mix, Expand High Fidelity 3.5 U/μl
- PCR DIG Probe Synthesis Mix, containing dATP, dCTP, dGTP (2 mM each) 10x concentrated
- PCR Buffer with MgCl2 10x concentrated
- dNTP Stock Solution, containing dATP, dCTP, dGTP, dTTP (2 mM each), pH 7.0 10x concentrated
- Control Template, plasmid DNA in Tris/EDTA buffer, pH 8.0. The 5-kb plasmid contains the cDNA for the human tissue-type plasminogen activator (tPA) 20 pg/μl
- Control PCR Primer Mix, containing 50 pmol of each primer, control PCR primer 1 and 2 2 mM each
hcodes
pcodes
Hazard Classifications
Aquatic Chronic 3
保管分類
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 2
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
Zengrong Zhu et al.
Methods in enzymology, 546, 215-250 (2014-11-16)
Human pluripotent stem cells (hPSCs) have the potential to generate all adult cell types, including rare or inaccessible human cell populations, thus providing a unique platform for disease studies. To realize this promise, it is essential to develop methods for
Early tissue patterning recreated by mouse embryonic fibroblasts in a three-dimensional environment.
Lluís Quintana et al.
Tissue engineering. Part A, 15(1), 45-54 (2008-11-26)
Cellular self-organization studies have been mainly focused on models such as Volvox, the slime mold Dictyostelium discoideum, and animal (metazoan) embryos. Moreover, animal tissues undergoing regeneration also exhibit properties of embryonic systems such as the self-organization process that rebuilds tissue
Handeng Liu et al.
Parasitology research, 112(3), 1011-1020 (2012-12-21)
Microsporidia are a group of obligate intracellular parasites of medical and agricultural importance, which can infect almost all animals, including human beings. Using the genome data of Nosema bombycis, four families of miniature inverted-repeat transposable elements (MITEs) in ribosomal DNA
Andreas R Gruber et al.
Molecular biology and evolution, 25(9), 1923-1930 (2008-06-21)
The 7SK small nuclear RNA (snRNA) is a key player in the regulation of polymerase (pol) II transcription. The 7SK RNA was long believed to be specific to vertebrates where it is highly conserved. Homologs in basal deuterostomes and a
Dervla T Isaac et al.
Infection and immunity, 81(2), 411-420 (2012-11-28)
Histoplasma capsulatum is a fungal respiratory pathogen that survives and replicates within the phagolysosome of macrophages. The molecular factors it utilizes to subvert macrophage antimicrobial defenses are largely unknown. Although the ability of H. capsulatum to prevent acidification of the
資料
Digoxigenin (DIG) labeling methods and kits for DNA and RNA DIG probes, random primed DNA labeling, nick translation labeling, 5’ and 3’ oligonucleotide end-labeling.
DNAおよびRNA DIGプローブ用のジゴキシゲニン（DIG）による標識方法とキット、ランダムプライミングによるDNA標識、ニックトランスレーションによる標識、5'および3'オリゴヌクレオチド末端標識。
SDS-PAGEサンプル調製の際に生じる課題の原因と対応策を特定し、電気泳動条件を最適化しましょう。
Identify causes and remedies for SDS-PAGE sample preparation challenges and optimize electrophoresis conditions.
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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