モノクロナール抗アクチン マウス宿主抗体

アクチンは、すべての細胞タイプにおける細胞骨格および収縮性構造の両方の主成分である、高度に保存されたタンパク質です。細胞および組織の分化の種類や、機能の状態に関連して、その量は異なります。アクチンは、2つの異なる凝集体フォーム、つまり球状または繊維状として存在し、脊椎動物では最低で6つの異なるアイソフォームが存在します。アクチンは、90％以上の配列相同性を示しますが、各アイソフォームは特有のN末端配列を持っています。アイソフォームは、3つのαアクチン（骨格、心臓、平滑）、１つのβアクチン（β非筋肉）および2つのγアクチン（γ平滑筋およびγ非筋肉）から構成されます。ヒトγアクチン遺伝子はヒト第17染色体にマッピングされます。
抗体は、すべてのアクチンアイソフォームで保存されている、アクチンのC末端に位置するエピトープを認識します。さまざまな組織および種のアクチンを特異的に標識します。本抗体によって認識されるエピトープは、ホルマリン固定やパラフィン包埋に抵抗性です。亜鉛-ホルマリン、B5、エタノール、methacarn、BrunnelまたははBouin液も、固定液として使用されます。
モノクローナル抗アクチン（マウスIgG2aアイソタイプ）は、マウス骨髄腫細胞と免疫化マウスの脾細胞の融合によって作製されるAC-40ハイブリドーマに由来します。多抗原ペプチド（MAP）骨格に付着した合成アクチンC末端ペプチドが、免疫原として使用されました。アイソタイプは、マウスモノクローナル抗体アイソタイピング試薬（カタログ番号ISO2）を用いて決定されます。

本抗体は、すべてのアクチンアイソフォームに保存されているアクチンC末端に位置するエピトープを認識します。幅広い組織や種において、アクチンを特異的に標識します。本抗体によって認識されるエピトープは、ホルマリン固定やパラフィン包埋に対して抵抗性です。また、亜鉛-ホルマリン、B5、エタノール、メタカン、BrunnelまたはBouin溶液も固定化剤として使用できます。

多抗原ペプチド（MAP）骨格に付着した合成アクチンC末端ペプチド。

マウスモノクローナル抗アクチン抗体は、ウェスタンブロッティングアッセイに使用されます。さらに本製品は、免疫細胞染色（10～20 μg/mL、メタノール／アセトン固定したニワトリまたはヒト線維芽細胞を使用した場合）、マイクロアレイ、免疫組織染色、および間接ELISAにも使用できます。
マウスで産生されたモノクローナル抗アクチン抗体は、免疫組織染色アッセイを使用した、ヒト気管支上皮細胞中のアクチンの検出に使用されています。また、心筋細胞における免疫蛍光検出にも使用されています。

モノクローナル抗アクチン抗体が、Cos-7細胞溶解物のウエスタンブロット解析において、タンパク質負荷量を等しくするために使用されました。

一次抗体としてモノクローナル抗-アクチン抗体を使用した、MDCK細胞ライセートのウェスタンブロット解析が行われています。

アクチンとミオシンは、多くの種類の細胞の成分であり、運動、分泌、細胞質流動、ファゴサイトーシス、および細胞質分裂を含めた細胞プロセスに関与しています。アクチンのN末端領域が主要な抗原性領域であるとみられ、アクチンのミオシンなどの他のタンパク質との相互作用に関与すると考えられます。アクチンの6つのアイソフォームのうち、4つは筋組織の分化マーカーであり、2つはほぼすべての細胞に存在します。アイソフォームには、3つのαアクチン（骨格、心臓、および平滑筋）、1つのβアクチン（非筋肉）、および2つのγアクチン（γ平滑筋およびγ非筋肉）があります。アクチンのアイソフォームは、全体では90％以上の配列相同性を示しますが、N末端の残基では50～60％となります。
さまざまな種および組織起源の細胞内のアクチンは、電気泳動およびアミノ酸配列分析により示された免疫学的および物理学的特徴が非常に類似しています。T細胞の活性化の際に細胞骨格のリモデリングを仲介します。γ-アクチンおよびβ-アクチン遺伝子の変異は、Baraitser-Winter症候群と呼ばれる発達障害に関連します。γ-アクチンの変異は難聴を引き起こします。

モノクローナル抗アクチン抗体の、ヒト、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ウサギ、イヌ、マウス、ラット、モルモット、ハムスター、ニワトリ、コイ、毒ヘビ、カエル、カタツムリとの交差反応が観察されています。本抗体は、メタノール固定、冷凍切片の染色に使用できます。

0.01M PBS溶液 (pH 7.4, 15mMアジ化ナトリウム含有)

継続して使用する場合は、2～8℃で保存し、最大1ヵ月間使用できます。さらに長期間保管する場合は、使用液のアリコートを冷凍保存してください。凍結融解の繰り返しはお勧めしません。「霜取り不要」のフリーザーでの保管はお勧めしません。長期保存により僅かな濁りが発生した場合は、使用前に遠心分離し、溶液を透明にしてください。使用希釈サンプルは、12時間以内に使用しない場合は破棄してください。

アクチン抗体セレクションガイドについては、www.sigmaaldrich.com/actinをご参照ください。

当社のカタログまたは製品に添付された当社のその他の文書に別段の記載がない限り、当社の製品は研究にのみ使用することを意図しており、無許可での商用使用、in vitro診断での使用、ex vivoもしくはin vivo治療での使用、または人間もしくは動物でのあらゆるタイプの消費もしくは適用など、その他の目的には使用しないでください。