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Merck

D2821

デオキシリボヌクレアーゼI ウシ

recombinant, expressed in Pichia pastoris, lyophilized powder, RNAse and protease, free

別名:

DNAse I, デオキシリボ核酸5′-オリゴヌクレオチド-ヒドロラーゼ

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この商品について

UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
MDL number:
MFCD00130918
Specific activity:
≥4,000 units/mg protein
Biological source:
bovine
Recombinant:
expressed in Pichia pastoris

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製品名

デオキシリボヌクレアーゼI ウシ, recombinant, expressed in Pichia pastoris, lyophilized powder, RNAse and protease, free

biological source

bovine

recombinant

expressed in Pichia pastoris

form

lyophilized powder

specific activity

≥4,000 units/mg protein

mol wt

~39 kDa

technique(s)

DNA extraction: suitable

solubility

H2O: soluble (pH 4.0-9.0)

suitability

suitable for molecular biology

application(s)

diagnostic assay manufacturing

foreign activity

RNAse and protease, free

storage temp.

2-8°C

Quality Level

300

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Application

シグマの酵素は、Agave spp.クローンから抽出されたDNAの消化に使用されています。この酵素は、KNOTTED1様のHOMEOBOX（KNOX）転写因子の調節発現に対するエピジェネティックな変化の影響を調査する研究で使用されました。
タンパク質サンプルからDNAを除去する際に使用されます。
デオキシリボヌクレアーゼIウシは、ラット肝臓の抽出物によるDNAポリメラーゼの阻害を調べる研究で使用されています。デオキシリボヌクレアーゼIウシは、酵素活性に対するイオン強度の影響を調査する研究でも使用されています。
デオキシリボヌクレアーゼIウシは、組換えタグ付きたんぱく質の発現をテストするための冷細胞溶解バッファー、完全RNA溶解バッファー、細胞溶解バッファーの調製に使用されています。

Biochem/physiol Actions

DNアーゼIは、ピリミジンに隣接するホスホジエステル結合に作用して、末端5′-リン酸を持つポリヌクレオチドを生成するエンドヌクレアーゼです。最適なpHは7～8であることが分かります。Mn2+、Ca2+、Co2+、Zn2+などの二価陽イオンは酵素活性化剤です。5 mM Ca2+の濃度で、たんぱく質分解消化に対して酵素を安定化します。2-メルカプトエタノール、キレート剤、ドデシル硫酸ナトリウム（SDS）およびアクチンは酵素活動を阻害することが知られています。
一本鎖DNAおよび二本鎖DNAを切断して、5'末端にリン酸、3'末端にOH基を有するモノヌクレオチドとオリゴヌクレオチドの混合物を生じます。その触媒活性は、二価イオン依存性です。Mg2+存在下で、DNase Iは二本鎖DNAの各鎖をランダムかつ別々に加水分解します。Mn2+存在下で、両方の鎖を切断することが可能です。

Features and Benefits

  • DNAを除去してRNAを精製できます。
  • ニックトランスレーション用のDNAを調製できます1。
  • DNA-タンパク質相互作用を評価するためのフットプリント法が行えます2。

Other Notes

1 unitは、pH 5.0、25°C、1分間に、ウシ胸腺由来DNAを用いて、反応液1 mLあたりΔA260=0.001となる酵素量です。

Physical form

グリシンを安定剤として含む凍結乾燥粉末として供給

Preparation Note

動物細胞や動物由来の材料を使用せずに製造。
酵素粉末は、水またはリン酸緩衝液を除くpH 4.0～9.0の緩衝液で再構成できます。カルシウムキレート剤は避けてください。0.15 M NaCl中のDNアーゼI 10 mg/mL溶液を分けて–20°Cで1週間貯蔵すると、その活性の<10%を失う可能性があります。同じ溶液を分けて2～8°Cで貯蔵すると、活性の約20%を失う可能性があります。60°Cでは最大5時間活性を保ち、68°Cでは<10分で活性を失います。酢酸緩衝液（pH 5.0）およびトリス緩衝液（（pH 7.2）1 mg/mL濃度）では、6%/時間の割合で活性を失います。

保管分類

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 3

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

D2821-10KU: + D2821-10KU-PW: + D2821-50KU: + D2821-50KU-PW: + D2821-VAR: + D2821-BULK:

jan

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試験成績書（COA）

Lot/Batch Number
0000417618
0000417618
0000280621
0000280620
0000280621

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Protein expression and purification, 97, 29-36 (2014-03-04)
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