プラスミドDNA 大腸菌RRI由来

Plasmid DNA from Escherichia coli RRI confers ampicillin resistance and complement defects in β-galactosidase in appropriate host strains. The multiple cloning site (MCS) is within the β-galactosidase gene. pUC8 and 9 have nine unique sites within the MCS while pUC18 and 19 have thirteen.

Plasmid DNA from E. coli RRI has also been used for in vitro DNA transfection studies.

Plasmid DNA from Escherichia coli RRI has been used in polymerase chain reaction (PCR).

これらのプラスミドは適合する宿主株に、アンピシリン耐性、β-ガラクトシダ-ゼ相補欠損を付与します。マルチクロ-ニングサイト(MCS)はβ-ガラクトシダ-ゼ遺伝子内に存在します。pUC8, 9は9ヶ所、pUC18, 19は13ヶ所の特異部位をMCS内に有しています。
外来DNAをMCSに挿入することで、乳糖分解能が失われます。プラスミドを含む宿主株は乳糖陽性・アンピシリン耐性で、アンピシリンとX-Galを含むプレ-ト上に青色コロニ-を形成します。一方、MCS内に外来DNAを有するプラスミドを含む宿主株は乳糖陰性・アンピシリン耐性で、培地上に白色のコロニ-を形成します。pUCプラスミドのMCS領域の方向は対応するM13ファ-ジのと同様です。

Foreign DNA inserted at the MCS interrupts the β-galactosidase gene and abolishes the ability to catabolize lactose. Lactose-positive, ampicillin-resistant colonies (host strain containing plasmid) form blue colonies on plates containing ampicillin and X-Gal; lactose-negative, ampicillin-resistant colonies (host strain containing plasmid with foreign DNA inserted at the MCS) form white colonies on this medium.

pUC18 Plasmid DNA, 10 μg is supplied at approximately 0.5 mg/ml in 10 mM Tris-HCl (pH 8.0) with 1 mM EDTA.