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Merck

D4693

ディスパーゼ®II

protease

別名:

プロテアーゼ Bacillus polymyxa由来

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この商品について

CAS番号:
42613-33-2
UNSPSC Code:
12352204
EC Number:
255-914-4
NACRES:
NA.54
MDL number:
MFCD02253017

主要文書

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製品名

ディスパーゼ®II, protease

form

lyophilized solid

specific activity

≥0.5 units/mg solid

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable
single cell analysis: suitable

solubility

10 mM NaAc (pH 7.5) and 5 mM CaAc: soluble

storage temp.

2-8°C

Quality Level

100

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Analysis Note

本酵素は、最初に50 mM Hepes/KOH（pH 7.4）、150 mM NaClに10 mg/mLで溶解させることができます。 解離する細胞に最も適した細胞培養培地でさらに希釈する必要があります。 ディスパーゼはメタロプロテイナーゼであり、Ca2+、Mg2+、Mn2+およびFe2+などの二価カチオンにより活性化されます。

Application

Sigmaの酵素は、マウス胚乳腺芽のex vivo培養のためのプロトコルの作成に使用されています。これは、ラット心臓からミトコンドリアを単離するときのラット心臓片の処理に使用されています。また、酵素加水分解による歯髄幹細胞（DPSC）の単離にも使用されています。これらの細胞は、それらの幹細胞および分化特性を分析するために、移植法により単離されたDPSCと比較されています。
ディスパーゼ®IIは、蛍光活性化細胞選別（FACS）用に使用されています。また、内臓卵黄嚢の分離にも用いられています。
シーケンシング用の単一細胞懸濁液の調製における使用に適しています。

Biochem/physiol Actions

ディスパーゼ®IIは、非極性アミノ酸残基のN末端ペプチド結合を加水分解する中性プロテアーゼです。これは、in vitroで増殖した多くの組織および細胞を分離するために使用される場合があります。酵素反応は非常に穏やかで、細胞膜を傷つけません。これは、懸濁培養における凝集を防止するためにも使用できます。このプロテアーゼは、フィブロネクチンとIV型コラーゲンを切断しますが、ラミニン、V型コラーゲン、血清アルブミンやトランスフェリンは切断しません。ディスパーゼ®IIは、ロイシン-フェニルアラニン結合を特異的に切断します。Ca2+、Mg2+、Mn2+、Fe2+、Fe3+およびAl3+は酵素を活性化させます。EDTA、EGTA、Hg2+および他の重金属は、酵素活性を阻害します。本酵素は、精製酵素1 g-モルあたり亜鉛1 g-原子を含有しています。この亜鉛成分がEDTAまたはEGTAのようなキレート剤により除去されると、不活性のアポ酵素が得られます。酵素は血清により阻害されません。

Other Notes

1ユニットは、特記しない限り、pH 7.5、37°C、1分間で、カゼインを加水分解し、1.0 μmol(181 μg)のチロシンに相当する呈色を生ずる酵素量です(Folin-Ciocalteu試薬で発色)。

Physical form

凍結乾燥品(酢酸カルシウムと乳糖を含有)

Preparation Note

50 U/mLの保存溶液は、10 mMのNaAc（pH 7.5）および5 mMのCaAcを含有する緩衝液に粉末を溶解することにより調製できます。これは、4℃で保存する必要があります。

Legal Information

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.

pictograms

Health hazardExclamation mark
GHS08,GHS07

signalword

Danger

Hazard Classifications

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

target_organs

Respiratory system

保管分類

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 3

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

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試験成績書（COA）

Lot/Batch Number
BCCP0926
BCCN3338
BCCN4883
BCCM8755
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