ジアホラーゼ from Clostridium kluyveri

Clostridium kluyveri由来のジアホラーゼ、又はリポイルデヒドロゲナーゼは、好気的代謝における2-オキソ酸デヒドロゲナーゼでのリポ酸会合時の、タンパク質間相互作用を評価する研究で使用されています。リポイルデヒドロゲナーゼは、チロシンニトロ化の酸化還元調節と、抗酸化剤による3-ニトロチロシン還元を検討する研究でも使用されています。

メチレンブルー（MB）含有ポリアクリルアミドナノ粒子プラットフォーム（NP）は、 Clostridium kluyveri由来ジアホラーゼと補助因子NADHを含む溶液で試験されました。この試験は、MBをNPに封入することでMBの還元が防止されるかどうか、そしてそれにより光力学的効果が保護されるかどうかを確認するために、実施されました。Sigmaの酵素は、アルデヒドデヒドロゲナーゼとともに、固定化によるアセトアルデヒドのバイオセンサーの構築に使用されています。NADPからNADPHへの再酸化にも使用されています。この反応では、レザズリンの高蛍光性レゾルフィンへの変換が同時に触媒され、微量のNAADPも検出されました。NAADPは最初に、別の酵素によってNADP及びNADPHに変換されました。

未変性ジアホラ-ゼ単位に基づい販売されています。

「ジアホラ-ゼ」という名称は、メチレンブル-や2,6-ジクロロフェノ-ル-インドフェノ-ルなどの電子受容体の存在下でβ-NADHまたはβ-NADPHの酸化を触媒する酵素の総称として広く使用されています。多くの異なる測定法や活性単位が使用されています。
ジアホラ-ゼの中には、β-NADHやβ-NADPHに特異的なものが存在することが知られています。Straubのブタ心臓酵素は、リポ酸デヒドロゲナ-ゼ活性やリポアミドデヒドロゲナ-ゼ活性だけでなく、天然のジアホラ-ゼ活性(β-NADH特異的)も持つかのような挙動を示します。この酵素は、単一のタンパク質であると報告されています。しかし、Masseyの報告にあるように、ジアホラ-ゼは変性リポアミドデヒドロゲナ-ゼであるという見方もあります。ブタ心臓調製サンプルをCu²⁺とともにプレインキュベ-ションすると、リポアミドデヒドロゲナ-ゼ活性が減少し、それに伴いβ-NADHジアホラ-ゼ活性が増加します。当社の行った実験では、ブタ心臓酵素には銅による影響がある程度認められましたが、Clostridium kluyveriやトルラ酵母から抽出した酵素には銅による影響は認められませんでした。リポアミドデヒドロゲナ-ゼ:ジアホラ-ゼ比は、変性の尺度となります。

「ジアホラーゼ」、「リポイル」のいずれのデヒドロゲナーゼについても、1ユニットは、pH7.5、25°C、1分間で、1.0 μmolのβ-NADHを酸化する酵素量です。このとき、対応する2,6-ジクロロフェノールインドフェノールの還元を伴います。