デオキシリボヌクレアーゼ I ウシ膵臓由来

DNase I、あるいはデオキシリボヌクレアーゼIは、ウシ膵臓から単離したエンドヌクレアーゼです。

• メルクのDNase Iは、二重鎖および一重鎖DNAをオリゴおよびモノヌクレオチドへと分解します。
• ウシ膵臓DNaseには、等電点A、B、CおよびDを持った4つのアイソザイムが存在します（5.22、4.96、5.06および4.78）。3。最も多いのはAであり、次いでBおよびCが多く、Dは少量存在します。
• DNase Iの構造はエキソヌクレアーゼIIIの構造と類似しており、2つの中心的なβシートを有します。各βシートは6本のβ鎖からなります。このβシートの複合体は、広範なループとαヘリックス領域で囲まれています。本酵素はエキソヌクレアーゼIIIと類似した構造を持っています。^[1]

タンパク質サンプルからDNAを除去する際に使用します。

DNアーゼIは、ピリミジンに隣接するホスホジエステル結合に作用して、末端に5'-リン酸を持ったポリヌクレオチドを生成するエンドヌクレアーゼです。DNアーゼIは、Mg²⁺の存在下、DNAの各鎖を独立して切断し、その切断場所はランダムです。両方のDNA鎖は、Mn²⁺存在下、ほとんど同じ場所で切断されます。Mn²⁺、Ca²⁺、Co²⁺、およびZn²⁺などの二価カチオンは、酵素を活性化します。5 mMのCa²⁺は、プロテアーゼ消化に対して酵素を安定化します。至適pHは7～8であることが分かっています。ウシ膵臓由来DNアーゼIは、クロマトグラフィーによって区別される4つのコンポーネント A、B、CおよびDからなり、それらのモル比はそれぞれ、4：1：1です。Dは少量だけ含まれます。2-メルカプトエタノール、キレート剤、ドデシル硫酸ナトリウム（SDS）およびアクチンは、酵素活性を阻害することが知られています。

メルクのデオキシリボヌクレアーゼDNAse Iは、基本的にRNAseを含まず、製品応用をサポートします。

粗製試薬、塩化カルシウムを含有

0.15 MのNaClに溶解したDNアーゼIの10 mg/mL溶液のアリコートを-20°Cで1週間保存した場合、10％以下の活性が失われることがあります。同様の溶液を2～8°Cで保存した場合、約20％の活性が失われます。pH 5～7、60°Cでは、5時間まで活性が維持され、68°Cでは10分以下で活性が消失します。1 mg/mLの濃度で、酢酸バッファー（pH 5.0）およびトリスバッファー（pH 7.2）中では、1時間あたり6％の速さで活性が失われます。

ビウレット法により定量したタンパク質。

1 Kunitz単位は、タイプIまたはIIIのDNAを基質に使用して、pH 5.0、25°C、1 mLで、1分間に、0.001のA₂₆₀における吸光度変化を生成します。