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Merck

DN25

デオキシリボヌクレアーゼ I ウシ膵臓由来

lyophilized powder, Protein ≥85 %, ≥400 Kunitz units/mg protein

別名:

デオキシリボヌクレアーゼ, DNase I, デオキシリボ核酸 5′-オリゴヌクレオチド-ヒドロラーゼ

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この商品について

CAS番号:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-667-0
MDL number:
EC Number:
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製品名

デオキシリボヌクレアーゼ I ウシ膵臓由来, lyophilized powder, Protein ≥85 %, ≥400 Kunitz units/mg protein

biological source

bovine pancreas

form

lyophilized powder

specific activity

≥400 Kunitz units/mg protein

mol wt

~31 kDa

composition

Protein, ≥85%

technique(s)

DNA extraction: suitable

solubility

0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, hazy

suitability

suitable for molecular biology

application(s)

diagnostic assay manufacturing
diagnostic assay manufacturing

foreign activity

RNase ≤0.02%

shipped in

wet ice

storage temp.

−20°C

Quality Level

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Analysis Note

ビウレット法により定量したタンパク質。

Application

  • 粘度を減少させて、初代細胞単離におけるDNA除去による収量を向上:
  • DNAへの標識塩基の取り込み:DNAニック
  • 放射活性標識
  • バイオプロセシング用途:DNA除去
  • RT-PCRの前にRNA調製物からゲノムDNAを除去する
  • in vitro転写
  • ニック翻訳
  • DNaseフットプリント法
  • 細胞中のアクチン重合のアクチン調節、および細胞アポトーシス
  • 核酸へのタンパク質のUV架橋結合
  • DNaseは、細胞中のアクチン重合の調節に一定の役割を果たし、アポトーシスプロセスに関与[1]
タンパク質サンプルからDNAを除去する際に使用します。

Biochem/physiol Actions

DNアーゼIは、ピリミジンに隣接するホスホジエステル結合に作用して、末端に5'-リン酸を持ったポリヌクレオチドを生成するエンドヌクレアーゼです。DNアーゼIは、Mg2+の存在下、DNAの各鎖を独立して切断し、その切断場所はランダムです。両方のDNA鎖は、Mn2+存在下、ほとんど同じ場所で切断されます。Mn2+、Ca2+、Co2+、およびZn2+などの二価カチオンは、酵素を活性化します。5 mMのCa2+は、プロテアーゼ消化に対して酵素を安定化します。至適pHは7~8であることが分かっています。ウシ膵臓由来DNアーゼIは、クロマトグラフィーによって区別される4つのコンポーネント A、B、CおよびDからなり、それらのモル比はそれぞれ、4:1:1です。Dは少量だけ含まれます。2-メルカプトエタノール、キレート剤、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)およびアクチンは、酵素活性を阻害することが知られています。

Features and Benefits

メルクのデオキシリボヌクレアーゼDNAse Iは、基本的にRNAseを含まず、製品応用をサポートします。

General description

DNase I、あるいはデオキシリボヌクレアーゼIは、ウシ膵臓から単離したエンドヌクレアーゼです。
  • メルクのDNase Iは、二重鎖および一重鎖DNAをオリゴおよびモノヌクレオチドへと分解します。
  • ウシ膵臓DNaseには、等電点A、B、CおよびDを持った4つのアイソザイムが存在します(5.22、4.96、5.06および4.78)。3。最も多いのはAであり、次いでBおよびCが多く、Dは少量存在します。
  • DNase Iの構造はエキソヌクレアーゼIIIの構造と類似しており、2つの中心的なßシートを有します。各βシートは6本のβ鎖からなります。このβシートの複合体は、広範なループとαヘリックス領域で囲まれています。本酵素はエキソヌクレアーゼIIIと類似した構造を持っています。[1]

Other Notes

1 Kunitz単位は、タイプIまたはIIIのDNAを基質に使用して、pH 5.0、25°C、1 mLで、1分間に、0.001のA260における吸光度変化を生成します。

Physical form

粗製試薬、塩化カルシウムを含有

Preparation Note

0.15 MのNaClに溶解したDNアーゼIの10 mg/mL溶液のアリコートを-20°Cで1週間保存した場合、10%以下の活性が失われることがあります。同様の溶液を2~8°Cで保存した場合、約20%の活性が失われます。pH 5~7、60°Cでは、5時間まで活性が維持され、68°Cでは10分以下で活性が消失します。1 mg/mLの濃度で、酢酸バッファー(pH 5.0)およびトリスバッファー(pH 7.2)中では、1時間あたり6%の速さで活性が失われます。

pictograms

Health hazard

signalword

Danger

hcodes

Hazard Classifications

Resp. Sens. 1

保管分類

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 3

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

ppe

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


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Purification of rat spermatogenic cells and preliminary biochemical analysis of these cells.
M L Meistrich et al.
Biology of reproduction, 25(5), 1065-1077 (1981-12-01)
Murali Muniraju et al.
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Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 73(5), 1485-1488 (1976-05-01)
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J Salnikow et al.
The Journal of biological chemistry, 245(21), 5685-5690 (1970-11-10)
Enzymes of Molecular Biology
Weir, A.F.
Methods in Molecular Biology, 16(2), 2-16 null

プロトコル

To standardize a procedure for the enzymatic assay of Deoxyribonuclease I.

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グローバルトレードアイテム番号

カタログ番号GTIN
FTPF0334504053252447778

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