HPLC 버퍼
버퍼는 약산과 그 짝염기, 또는 약염기와 그 짝산의 용액입니다. 분석 화학에서, 버퍼는 일반적으로 샘플이 산 또는 염기 작용기를 함유하는 경우에 역상 고성능 크로마토그래피(RP-HPLC)에서 사용됩니다. 버퍼는 수소/하이드로늄 및 수산화 이온의 영향을 완화하여 pH 변동을 줄입니다.
Products
관련 자료
- Brochure: LC-MS Resource Guide
A Comprehensive Portfolio for Consistent Results in Routine and Advanced LC-MS applications
- HPLC Method Transfer Calculator
Easily transfer a method between HPLC columns, (scale between microbore through preparative range), based on the 2 column dimensions and current method conditions.
이동상 버퍼
완충 종류, 이온 강도 및 pH를 고려하여 적절한 버퍼를 선택하는 것은 이온 분석물에 대한 RP-HPLC 분석법 개발에서 가장 중요한 단계입니다. RP-HPLC 내 이온 분석물질 보존성은 근본적으로 이동상의 pH에 의해 영향을 받습니다. 따라서, RP-HPLC 내 이동상의 pH 조절은 효과적인 분석물 분리에 대한 가장 중요한 변수입니다.
실리카 기반 컬럼에서 역상 분리를 위한 일반적인 pH 범위는 2에서 8 사이입니다. 버퍼는 pKa에서 pH를 가장 잘 제어하기 때문에 원하는 pH에 가까운 pKa를 반드시 가져야 합니다. 일반적으로 원하는 이동상 pH가 pKa 값 < 2 단위인 버퍼를 선택하는 것이 이상적입니다. 머크는 귀하의 모든 크로마토그래피 요구 조건에 맞춰 넓은 pH 범위에 대한 HPLC 등급 버퍼를 제공합니다.
HPLC 버퍼 선택 시 고려해야 할 요소
화학적 순도
HPLC 실험에 활용되는 유기 용매와 함께 이동상 첨가제(버퍼, 염, 산 및 염기)의 품질은 검출기 감도 및 용출 프로토콜에 맞게 조정되어야 합니다. 최적의 크로마토그래피를 위해 고품질 용매 밎 시약을 권장합니다.
화학적 적합성
이동상 pH와 함께 버퍼 조성은 컬럼 하우징 재료 및 고정상 특성에 맞게 선택해야 합니다. 이는 컬럼 하드웨어 및 베드에 가해지는 손상을 방지합니다.
버퍼 용해도
이상적인 버퍼는 완전히 수용성이고 침전되지 않아야 합니다. 버퍼 농도를 신중하게 선택하여 버퍼가 유기 용매와 혼합되면서 더 높은 농도에서 침전되는 일이 없도록 해야 합니다. 이를 간과하는 경우, 펌프 작동에 문제가 발생하거나 HPLC 컬럼이 막힐 수 있습니다.
버퍼 강도
고정상과 약한 상호 작용을 보이는 용출액은 컬럼에서 약하게 결합된 분석물만 용출할 수 있는 반면에, 강한 상호 작용을 보이는 용출액은 강하게 결합된 샘플 분자를 용출합니다. 다양한 용매의 용출 또는 용매 강도는 어떤 고정상 유형을 사용하느냐에 따라 다릅니다. 용출 강도 외에도, 버퍼의 점도와 UV 흡광도는 HPLC 분석에 사용하기 적합한지를 정하는 데 중요한 역할을 합니다.
계속 읽으시려면 로그인하거나 계정을 생성하세요.
계정이 없으십니까?