Anti-Vinculin Antibody

Analizado.

Control
CONTROL POSITIVO:

La vinculina está presente en todos los tipos de células.

Categoría de investigación
Comunicación celular

El anticuerpo anti-vinculina, clon VIIF9 (7F9), es un anticuerpo contra la vinculina para utilizar en IP, WB, IC e IH.

Inmunotransferencia Western. 1:1000; banda de ~117 kDa. El tampón de bloqueo sugerido es TBS-Tween con BSA al 2 %. El tampón de dilución sugerido es TBS-Tween con azida sódica al 0,05 %. El porcentaje de gel preferido es del 10 % y/o en gradiente 4-20 % (o similar).

Inmunohistoquímica en cortes de tejido congelados e incluidos en parafina. La fijación recomendada para los cortes de tejido congelados es acetona fija durante 6 minutos a temperatura ambiente. Para cortes de tejido incluidos en parafina y fijados en formol: microondas en tampón citrato 0,01 M (pH 6,0) durante 8-10 minutos (tenga en cuenta que todos los microondas difieren y puede que sea necesario realizar ajustes). Si es necesario, siga con la digestión enzimática (pronasa al 0,01 % durante 10 minutos). El agente bloqueante sugerido es el suero bovino fetal. El anticuerpo también se ha utilizado con éxito en tejido fijado con metil-Carnoy.

Inmunocitoquímica (véanse las notas de aplicación a continuación).

Inmunoprecipitación. El tampón de extracción recomendado es Tris-HCl 20 mM, pH 7,4, NaCl 150 mM, Triton X-100 al 1 %, SDS al 0,1 %, ácido desoxicólico-NaCl al 0,5 % y PMSF 0,5 mM. El volumen de reacción final es de 1 ml y el agente de captura recomendado es anti-IgG de ratón conjugado con agarosa. Tenga en cuenta que la isoforma específica del músculo, la meta-vinculina (PM 150  kDa) coprecipitará.

El usuario final debe determinar las diluciones de trabajo óptimas.

NOTAS DE APLICACIÓN PARA MAB3574

INMUNOCITOQUÍMICA

Para células cultivadas, utilice el método siguiente: 1) lave las células dos veces con el tampón A (Pipes 100 mM (para disolverlo, valore con KOH), MgCl2 0,5 mM, EDTA 0,1 mM, EGTA 0,01M (para disolver, valore con KOH), pH 6,9); 2) fije 15 min a RT (formol al 3,7 %, Triton X-100 al 0,2 %, glicerol 2 M, preparado en tampón A); 3) lave 3 veces con tampón A; 4) continúe con la incubación con Ac primarios, etc.

Subcategoría de investigación
Comunicación citoesquelética

Vinculina. Su ubicación celular es intracelular, asociada con el citoesqueleto.

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Extracto de músculo liso crudo de útero adulto humano sano.

Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.

Líquido en tampón fosfato 0,02 M con NaCl 0,25 M y azida sódica al 0,1 %.

Presentación: Purificada

Mantener entre 2 y 8°C en alícuotas no diluidas durante un máximo de 6 meses después de la fecha de recepción.

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