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Albúminas y proteínas transportadoras

Representación colorida e intrincada de un complejo de proteínas de albúmina de suero bovino (BSA). Se resalta la compleja estructura de la proteína BSA, destacando su papel como proteína portadora crucial, estándar proteico y suplemento de cultivos celulares. La imagen subraya la significación de la BSA en diversos procesos biológicos y su importancia en el campo de la biotecnología.

Muchas moléculas son inestables o insolubles cuando existen en formas no complejas. In vitro, las albúminas y otras proteínas transportadoras se utilizan a menudo para unir, secuestrar y estabilizar una serie de pequeñas moléculas y proteínas importantes. Las albúminas son proteínas hidrosolubles simples que se encuentran en los fluidos y tejidos animales y, en menor medida, en las plantas. Las albúminas se utilizan en la biomanufactura de anticuerpos monoclonales terapéuticos y proteínas recombinantes.

Proporcionamos albúminas para necesidades de aplicación integrales, incluidos cultivos celulares, cuantificación de proteínas, estabilización de enzimas, ELISA y procesos relacionados con anticuerpos. Junto con albúminas de diversas fuentes, ofrecemos estas proteínas esenciales en diferentes formatos y formulaciones.


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Albúminas en cultivo celular

Las albúminas, en particular las procedentes del suero bovino (BSA), son un componente importante de muchos sistemas de cultivo celular sin suero, en particular los que utilizan células de hibridoma o de ovario de hámster chino (CHO). En los medios de cultivo celular, la albúmina actúa uniendo y transportando otras moléculas esenciales a las células en cultivo. Dado que no todas las albúminas tienen la misma eficacia en los medios de cultivo, es aconsejable elegir aquellas que hayan sido probadas para aplicaciones en cultivos celulares.

Albúmina sérica bovina (BSA)

Un recipiente de albúmina de suero bovino (BSA) con un pequeño vial al lado. Esta configuración es típica de un laboratorio, donde la BSA se utiliza en diversas aplicaciones bioquímicas debido a su estabilidad y a que no interfiere en las reacciones biológicas. El vial sugiere que pueden almacenarse cantidades precisas de BSA y utilizarse según sea necesario.

La albúmina sérica bovina (BSA) es una proteína globular (~66 kDa MW) que se utiliza en numerosas aplicaciones bioquímicas debido a su estabilidad y a su falta de interferencia con las reacciones biológicas. La estructura de la BSA es una única cadena polipeptídica formada por unos 583 residuos de aminoácidos y sin carbohidratos. Obtenga más información sobre la estructura de la proteína BSA, el peso molecular de la BSA, sus propiedades y aplicaciones en nuestra guía de propiedades físicas y aplicaciones de la BSA.

La BSA es el caballo de batalla clásico de los productos de albúmina utilizados en numerosas aplicaciones. Nuestros diversos formatos de albúmina de suero bovino incluyen purezas que oscilan entre el 95-99%. Fabricamos y distribuimos BSA purificada a partir de una variedad de métodos primarios que incluyen el verdadero método de fraccionamiento de Cohn, métodos modificados de fraccionamiento de etanol, choque térmico y cromatografía. Otros pasos de purificación pueden incluir la cristalización o la filtración con carbón vegetal. Para mayor comodidad, nuestras BSA se definen por el método de preparación:

BSA.

  • La purificación cromatográfica de la albúmina suele producir una conformación nativa de la proteína más altamente conservada que los métodos de fraccionamiento por etanol y choque térmico.
  • El método de etanol y choque térmico combina ambos procesos utilizando el fraccionamiento de Cohn para realizar la purificación inicial seguido de un paso de calor para purificar aún más la albúmina hasta ≥ 99% mediante electroforesis de agarosa.
  • El fraccionamiento con etanol es un método de fraccionamiento que incluye el ajuste de la concentración de etanol, el pH y la temperatura. A diferencia del método de choque térmico, este proceso se mantiene a baja temperatura, lo que garantiza una condición no desnaturalizante para las proteínas y preserva la estructura y función nativas de la albúmina.
  • El proceso de fraccionamiento por choque térmico de ajuste de calor y pH se basa en la adición de un estabilizador de proteínas. Esta adición permite que la albúmina tolere el aumento de temperatura de > 65 °C. La mayoría de las otras proteínas plasmáticas se desnaturalizan y precipitan durante este proceso produciendo una albúmina con mayor pureza.

Albúmina sérica humana (HSA)

La albúmina sérica humana (HSA) es la proteína más abundante en el plasma humano con un peso molecular de ~66 kDa (basado en la composición de aminoácidos). La albúmina sérica puede denominarse Fracción V de Cohn. Esta denominación procede del método original de Cohn de fraccionamiento de las proteínas séricas mediante precipitación en frío con etanol, ya que la albúmina sérica se encontraba en la quinta fracción de etanol con el método de Cohn. Desde entonces, el término "Fracción V de Cohn" ha sido utilizado por algunos para describir la albúmina de suero independientemente del método de preparación. Producimos albúminas de suero humano mediante un proceso de fraccionamiento en alcohol frío derivado del método tradicional de Cohn, así como del método de choque térmico, y ofrecemos versiones nativas y recombinantes de HSA en formatos de polvo y solución.

Otros productos de albúmina

Nuestra cartera incluye productos de albúmina adicionales para aplicaciones específicas que requieren proteínas humanas y de otras especies no bovinas. Las albúminas humanas recombinantes y la albúmina libre de componentes animales (ACF) se suministran en tampones acuosos o en formatos de polvo liofilizado. Las albúminas disponibles de otras especies incluyen las derivadas de las siguientes fuentes:

  • blanca de huevo de pollo
  • suero de ratón
  • suero de rata
  • suero porcino
  • suero ovino

Nuestras albúminas son de alta pureza y solubilidad superior para garantizar un bajo fondo en los ensayos de cuantificación de proteínas, y para minimizar las interferencias en los bioprocesos.

Transferrinas y sustitutos de transferrina

Las células necesitan hierro para unirse al oxígeno disponible en el entorno extracelular.Las transferrinas son glicoproteínas de cadena simple que se encuentran en el suero y facilitan la captación de hierro en el medio de cultivo y su posterior transporte intracelular.Aunque la transferrina es el método fisiológicamente óptimo para suministrar hierro a las células en cultivo y, por lo tanto, ha sido esencial en la producción de productos biofarmacéuticos como los anticuerpos monoclonales, los sistemas sin animales de menor riesgo han llevado a la adopción de alternativas de moléculas pequeñas a la transferrina en la biofabricación. Muchas de estas alternativas a la transferrina son quelantes del hierro, que deben utilizarse con protocolos adecuados en los sistemas de cultivo, ya que muchos no gestionan el ciclo redox del hierro y, por lo tanto, pueden contribuir al estrés oxidativo.


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