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Merck

R6513

Ribonucléase A from bovine pancreas

Molecular Biology, ≥70 Kunitz units/mg protein, lyophilized

Synonyme(s) :

RNAse a, RNase A, Ribonucléase pancréatique, Ribonucléate 3′-pyrimidino-oligonucléotido-hydrolase

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About This Item

Numéro CAS:
9001-99-4
NACRES:
NA.53
UNSPSC Code:
12352204
EC Number:
232-646-6
MDL number:
MFCD00132181
Numéro CE :
3.1.27.5 (BRENDA, IUBMB)

Nom du produit

Ribonucléase A from bovine pancreas, Molecular Biology, ≥70 Kunitz units/mg protein, lyophilized

SMILES string

[nH]1cnc(c1)CC(NC(=O)CCN)C(=O)O

InChI key

CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N

InChI

1S/C9H14N4O3/c10-2-1-8(14)13-7(9(15)16)3-6-4-11-5-12-6/h4-5,7H,1-3,10H2,(H,11,12)(H,13,14)(H,15,16)

grade

Molecular Biology

form

lyophilized

specific activity

≥70 Kunitz units/mg protein

mol wt

13.7 kDa
 ~13,700

foreign activity

Exonuclease and endonuclease, none detected
NICKase and DNase, none detected

storage temp.

−20°C

Quality Level

300

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Analysis Note

Protéine déterminée par E.

Application

  • La RNase A est utilisée pour supprimer l′ARN présent dans les préparations d′ADN plasmidique et d′ADN génomique ainsi que dans les échantillons protéiques.
  • Elle est également employée dans l′analyse de séquences d′ARN et les tests de protection.
  • Elle a également servi d′outil dans la conception de médicaments assistée par ordinateur.
  • La RNase A supporte l′analyse des séquences d′ARN.
  • Elle hydrolyse l′ARN contenu dans les échantillons protéiques.
  • La purification de l′ADN est supportée par la RNase A.
La ribonucléase A de pancréas de bovin a été utilisée :
  • pour la purification d'ADN plasmidique
  • pour digérer l'ADN double brin et éviter sa coloration lors de la coloration de noyaux
  • dans des techniques de détection par immunoperoxydase et par immunofluorescence
  • pour traiter des cellules avant cytométrie en flux
  • comme constituant d'un tampon post-hybridation pour le lavage de coupes histologiques fixées au formol et incluses en paraffine après hybridation in situ
  • pour traiter des cellules lors de la préparation d'extraits de protéines de membrane externe (OMP)
  • dans des tests de protection à la RNase
  • pour l'élimination d'ARN liés de manière non spécifique
  • dans l'analyse de séquences d'ARN
  • pour l'hydrolyse de l'ARN contenu dans des échantillons de protéines

Features and Benefits

Notre ribonucléase A, ou RNase A, d′une grande stabilité, convient à l′élimination d′ARN, au séquençage d′ARN et à la purification d'ADN.

General description

La RNase A est un polypeptide monocaténaire composé de 124 acides aminés liés par 4 ponts disulfure. Contrairement à la RNase B, la RNase A n'est pas une glycoprotéine. La RNase A peut être inhibée par l'alkylation du résidu His12 ou His119 situé au niveau de son site actif. La RNase A peut être activée par les sels de potassium et de sodium.
La RNase A est une endoribonucléase qui attaque le phosphate en 3'-OH d'un nucléotide pyrimidique. La séquence pG-pG-pC-pA-pG est clivée en pG-pG-pCp et en A-pG. Son activité est maximale sur les substrats d'ARN simple brin.
La RNase A, ou ribonucléase A, est une endoribonucléase qui clive les liaisons phosphodiester de l′ARN simple brin après les nucléotides pyrimidiques. Elle attaque l′extrémité phosphate en 3′ (par exemple, la séquence pG-pG-pC-pA-pG est clivée en donnant pG-pG-pCp et A-pG). L′activité est maximale avec l′ARN simple brin. La RNase A est un polypeptide à chaîne unique contenant 4 ponts disulfure. Contrairement à la RNase B, ce n′est pas une glycoprotéine. Les ribonucléases n′hydrolysent pas l′ADN, car celui-ci est dépourvu des groupements 2′-OH essentiels à la formation d′intermédiaires cycliques. La RNase A peut également hydrolyser l′ARN présent dans les échantillons protéiques. Elle peut être inhibée par l′alkylation de His12 et His119 et est activée par les sels de potassium et de sodium. Cette RNase est inhibée en présence d′ions de métaux lourds. Elle est également inhibée par l′ADN par un effet de compétition.

Other Notes

La RNase A peut être activée par les sels de potassium et de sodium. Elle peut être inhibée par l′alkylation de His12 ou His119.
Une application importante de la RNase A est l′élimination de l′ARN présent dans les préparations d′ADN plasmidique. Pour ce faire, de la RNase A exempte de DNases est utilisée à une concentration finale de 10 μg/ml.

Il n′est pas nécessaire de faire bouillir des solutions mères de ce produit de RNase A pour inactiver les DNases résiduelles. Cette ébullition peut faire précipiter la RNase et entraîner une éventuelle perte d′activité enzymatique. Le chauffage d′une solution de RNase A à pH neutre provoque une précipitation. Un chauffage à pH plus bas peut produire une légère précipitation du fait des impuretés protéiques présentes.

pictograms

Health hazard
GHS08

signalword

Danger

hcodes

H334

Hazard Classifications

Resp. Sens. 1

Classe de stockage

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 3

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

ppe

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)

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Certificats d'analyse (COA)

Lot/Batch Number
0000494300
0000494300
0000494302
0000494302
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  1. Which document(s) contains shelf-life or expiration date information for a given product?

    If available for a given product, the recommended re-test date or the expiration date can be found on the Certificate of Analysis.

  2. What is the solubility of Product R6513, Ribonuclease A from bovine pancreas (RNase A)?

    Stock solutions of RNase A can be made in 10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 15 mM NaCl at a concentration of 10 mg/mL.

  3. What is the shelf life of Product R6513, Ribonuclease A from bovine pancreas (RNase A)? 

    This product is stable for at least 3 years when stored properly at -20 °C.

  4. How are solutions of Product R6513, Ribonuclease A from bovine pancreas (RNase A), stored?

    RNase A solutions can be stored, aliquoted and frozen at -20 °C.

  5. Do I need to boil Product R6513, Ribonuclease A from bovine pancreas (RNase A), to inactivate residual DNases?

    Boiling of stock solutions to inactivate residual DNase is not necessary and may cause precipitation of RNase with loss of enzymatic activity. 

  6. What working concentration of Product R6513, Ribonuclease A from bovine pancreas (RNase A), do you suggest?

    We suggest using RNase A at a concentration of 10 ug/ml.

  7. How do I get lot-specific information or a Certificate of Analysis?

    The lot specific COA document can be found by entering the lot number above under the "Documents" section.

  8. How do I find price and availability?

    There are several ways to find pricing and availability for our products. Once you log onto our website, you will find the price and availability displayed on the product detail page. You can contact any of our Customer Sales and Service offices to receive a quote.  USA customers:  1-800-325-3010 or view local office numbers.

  9. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product. 

  10. Why is RNase A activity not listed as micromoles per minute, and what is a Kunitz unit?

    The Kunitz unit was created to reflect the non-linear nature of the RNAse enzymatic reaction. As the reaction progresses the activity changes due to RNA as a heterogeneous polymeric substrate; therefore, the unit of moles or micomoles per minute becomes inaccurate. As such, our enzymatic assay describes a unit that varies throughout the reaction: One unit will cause a decrease of 100% per minute in the value of E0 - Ef at pH 5.0 at 25°C. Ef is determined in the RNAse control step, while E0 reflects the current reaction rate.

  11. My question is not addressed here, how can I contact Technical Service for assistance?

    Ask a Scientist here.

Santella, Regina M., and Yu-Jing Zhang
DNA Fingerprinting: An Introduction (2011)
Rapid and irreversible CD4+ T-cell depletion induced by the highly pathogenic simian/human immunodeficiency virus SHIVDH12R is systemic and synchronous
Igarashi Tatsuhiko, et al.
Journal of Virology (2002)
Production of hen egg yolk immunoglobulins simultaneously directed against Salmonella Enteritidis and Salmonella Typhimurium in the same egg yolk
Chalghoumi, Raja, et al.
Poultry Science (2008)
Kento Kurata et al.
International journal of oncology, 49(6), 2303-2308 (2016-10-18)
Anaplastic thyroid cancer (ATC) is a rare malignancy that progresses extremely aggressively and often results in dismal prognosis. We investigated the efficacy of inhibiting the activated RAS/RAF/MEK pathway in ATC cells aiming to clarify the mechanism of effect and resistance.
Berg JM, Tymoczko JL, Stryer L.
BioChemistry: An Indian Journal (2002)
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Data Sheet - R6513

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