Amplification du génome entier
La disponibilité de quantités suffisantes d’ADN génomique est essentielle pour de nombreuses analyses utilisées dans l’étude des troubles humains et animaux. Dans de nombreux cas, la source d’ADN est limitée, ou l’ADN disponible est endommagé ou dégradé, ce qui empêche le chercheur de réaliser des analyses cruciales. Notre gamme de produits d’amplification du génome entier (WGA) offre une méthode robuste et précise permettant d’amplifier des quantités de matière première de l’ordre du nanogramme pour obtenir des rendements de l’ordre du microgramme, avec une perte d’allèles minimale. Nous continuons à élargir notre gamme de produits WGA afin de vous proposer un éventail de solutions pour l’amplification du génome entier à partir d’une grande variété de matériaux de départ, notamment des prélèvements buccaux, des échantillons de tissus frais, des échantillons de tissus congelés, des cartes de sang, du sang périphérique et des tissus fixés au formol et inclus dans la paraffine (FFPE). La technologie WGA permet l’immortalisation d’un échantillon limité, offrant ainsi aux chercheurs la possibilité d’effectuer toutes les analyses souhaitées à partir d’un seul échantillon d’ADN.
Products
Kits d'amplification du génome entier (WGA)
Les analyses et la caractérisation génomiques sont devenues des outils essentiels pour comprendre les systèmes biologiques. Souvent, ces analyses sont entravées par le nombre d'échantillons à examiner et par la disponibilité de quantités suffisantes d'ADN génomique. Cela pose particulièrement problème pour les sources d'ADN rares et archivées. Les kits d'amplification du génome entier (WGA) GenomePlex® ont été développés pour être utilisés comme système à haut débit permettant l'amplification rapide et hautement représentative de l'ADN génomique à partir de quantités infimes de matériel de départ.
Les kits GenomePlex® WGA utilisent une technologie d’amplification exclusive reposant sur la fragmentation aléatoire de l’ADN génomique et la conversion des petits fragments ainsi obtenus en molécules de bibliothèque OmniPlex® amplifiables par PCR, flanquées de sites d’amorçage universels. La bibliothèque OmniPlex® est ensuite amplifiée à l’aide d’amorces oligonucléotidiques universelles et d’un nombre limité de cycles. Les kits GenomePlex® WGA ne nécessitent que des quantités de l’ordre du nanogramme d’ADN génomique et permettent d’obtenir des rendements de 5 à 10 µg après PCR. Ce système est adapté à une grande variété d’échantillons d’ADN purifié, notamment le sang total, les cartes de sang, les prélèvements buccaux, les sources végétales et les échantillons de tissus fixés au formol et inclus dans la paraffine.
Stratégies d’amplification du génome entier d’une cellule unique
Le kit GenomePlex® d’amplification du génome entier à partir d’une seule cellule (WGA4) est conçu pour amplifier le génome d’une seule cellule, ce qui permet une amplification un million de fois supérieure et donne des quantités de l’ADN génomique de l’ordre du microgramme. Les méthodes traditionnelles d’amplification du génome entier à partir d’une seule cellule produisent des quantités insuffisantes et présentent un biais de représentation important. En revanche, la technologie GenomePlex® offre une efficacité d’amplification grâce à l’ADN polymérase WGA. Le kit WGA pour cellule unique comprend tous les réactifs nécessaires à la lyse cellulaire et à l’amplification du génome entier qui s’ensuit.
Le kit WGA unicellulaire a été validé pour de nombreuses applications en aval et convient à l’amplification à partir d’une grande variété de sources, notamment des cellules végétales, des cellules fixées au polycarbonate, des lymphocytes, des cellules cancéreuses rénales, des cellules épithéliales, des cellules leucémiques et des cellules amniotiques fibroblastiques. Le génome amplifié est compatible avec de nombreuses applications en aval, notamment l’hybridation génomique comparative (CGH), l’analyse des microsatellites/STR, l’analyse des SNP, la QPCR et d’autres analyses de génotypage.
Amplification du transcriptome complet
Les kits d’amplification du transcriptome complet (WTA) ont été développés pour générer une quantité suffisante de transcrits cibles à partir de quantités infimes d’ARN. Une WTA réussie nécessite une réplication précise des transcrits représentatifs présents dans un échantillon, sans perte ni biais concernant des ARNm spécifiques. Nos kits WTA offrent une méthode précise, rapide et simple d’amplification de l’ARN total provenant de diverses sources, notamment le sang, les tissus fixés et congelés, les cultures cellulaires, les cellules triées par FACS, les plantes et les micro-organismes. De plus, les kits WTA (WTA1, WTA2, SeqR) permettent une amplification rapide de l’ARN total en moins de 4 heures, sans biais 3’. L’ARN amplifié (ADNc) est adapté à la qPCR, à l’analyse par micropuces et au clonage traditionnel. Pour plus d’informations, veuillez consulter nos pages produits WTA1, WTA2 ou SeqR.
Kits d’amplification d’ADN et d’ARN SeqPlex-I pour le séquençage de nouvelle génération Illumina®
Les kits d’amplification d’ADN et d’ARN SeqPlex-I pour l’amplification du génome entier (WGA) et l’amplification du transcriptome entier (WTA) sont conçus pour faciliter le séquençage de nouvelle génération (NGS) Illumina® à partir de quantités extrêmement faibles d’ADN et d’ARN, ou de matériel dégradé ou fortement fragmenté. Les kits WGA et WTA utilisent tous deux une technologie exclusive basée sur l’amorçage aléatoire de l’ADN ou de l’ARN génomique et sur la conversion des petits fragments ainsi obtenus en molécules de bibliothèque amplifiables par PCR, flanquées de sites d’amorçage universels. Les kits SeqPlex-I WGA et WTA permettent une amplification aisée d’échantillons de départ limités pour une introduction directe et pratique dans les cellules de flux NGS Illumina®, vous permettant ainsi d’accélérer votre prochaine grande découverte.
Ressources connexes
- Brochure : Guide des notions fondamentales de biologie moléculaire
Découvrez comment notre gamme complète d'outils et de réactifs moléculaires vous offre des solutions précises et prêtes à l'emploi pour vos flux de travail.
- Article : Extraction de l'ADN à partir de la salive et amplification par WGA
Whole Genome Amplification products, including kits for DNA extraction, support various DNA sources.
- Article : Protocole d'amplification du génome entier à partir de sérum ou de plasma
Whole genome amplification (WGA) of plasma and serum DNA presents a unique challenge due to the small amount of nucleic acid in such samples.
- Article : Protocole d'extraction d'ADN à partir de tissus animaux et d'amplification WGA
GenomePlex® Whole Genome Amplification efficiently extracts DNA from animal samples for genomic analysis.
- Article : Protocole d'extraction de l'ADN végétal et d'amplification WGA
La technique d'amplification du génome entier GenomePlex® a été utilisée pour amplifier l'ADN génomique du soja, du maïs, de la tomate, de l'échinacée pourpre et du ginseng.
- Article : « Blood Card » - Protocole de la WGA
Protocol extracts genomic DNA from blood cards, useful for limited DNA samples in amplification.
- Article : Extraction et amplification d'ADN à partir de sang total selon le protocole WGA
Simple DNA isolation protocol from whole blood samples for genomic analysis, followed by GenomePlex® amplification.
- Article : Protocole d'extraction d'ADN buccal et d'amplification WGA
This protocol provides a simple and convenient method to isolate, amplify, and purify genomic DNA from buccal swabs. Buccal swabs are a convenient method of acquiring a DNA sample.