不妊検査

医薬品の無菌試験方法

医薬品の薬典に基づく無菌試験は、USP <71>、Ph. Eur. 2.6.1、およびJP <4.06>によって規定されており、これらは試料を2種類の異なる培地で14日間の培養期間にわたって培養することを要求している。 微生物を網羅的に検出するために、2種類の培地が使用されます。嫌気性および好気性細菌用のフルイド・チオグリコール酸培地（FTM）（32.5°Cで培養）と、好気性細菌および真菌用の大豆カゼイン消化培地（SCDM、トリプシン大豆ブロス（TSB）とも呼ばれる）（22.5°Cで培養）です。 培養後に濁りが認められた場合は、微生物による汚染の可能性があるため、調査を行う必要があります。

公定法として、膜ろ過法と直接接種法の2つが認められている。 方法の選択は、製品の性質、包装形態、および物理化学的特性によって決まります。製品の性質が許す限り、その優れた感度と阻害物質を除去する能力から、USP <71>、Ph. Eur. 2.6.1、およびJP <4.06>で規定されているように、膜ろ過法が推奨されます。ろ過が不可能な場合は、直接接種法が引き続き適用されます。

14日間の培養期間は依然として薬局方の基準であるが、ATP生物発光技術に基づく迅速微生物学的法（RMM）は、細胞療法や遺伝子治療を含む保存期間が短い製品について、規制当局によってますます受け入れられている。 新しいUSP <73>章「保存期間が短い製品における汚染の検出のためのATP生物発光に基づく微生物学的試験法」は、RMMの採用およびこの技術のバリデーションと導入に関する明確な規制の枠組みを規定しており、2025年8月から施行される。

選択された方法にかかわらず、データの完全性に関する要件はすべての無菌性試験ワークフローに等しく適用されます。つまり、試料の受領から最終結果の記録に至るまで、すべての試験データは完全にトレーサビリティが確保され、監査に対応可能であり、ALCOA++、21 CFR Part 11、およびEU附属書11に準拠していなければなりません。

膜ろ過による無菌性試験

膜ろ過は、USP <71>、Ph. Eur. 2.6.1、およびJP <4.06>において、ろ過可能な医薬品に対する推奨される規制試験法です。試料を0.45 µmの膜フィルターに通し、そこで微生物を捕捉した後、適切な培地で培養します。

この方法は、直接接種法に比べて次のような重要な利点がある。

• 高感度 — 試料全体、または混合試料を単一の膜フィルターでろ過する
• 阻害物質の除去 — 抗生物質や防腐剤などの抗菌性化合物は、培養前に洗い流すことができるため、偽陰性結果を防ぐことができる
• 密閉システムの保護 — 最新の密閉式ろ過装置により、試験中に製品が環境にさらされることがなく、外部からの汚染や試験結果の無効化のリスクを大幅に低減できる

密閉型の一回使用型膜ろ過装置の使用は、層流フードおよびアイソレーターのいずれにおいても、GMP無菌試験環境におけるベストプラクティスと見なされています。

無菌試験のための迅速微生物学的法（RMM）

イノベーションに対応するために規制の枠組みが進化する中、迅速微生物学的法（RMM）は、従来の薬典に基づく無菌試験に代わる、科学的に検証された代替法として広く受け入れられつつあります。RMMは、細胞・遺伝子治療、放射性医薬品、短寿命の生物学的製剤など、保存期間が短い製品において特に有用です。これらの製品では、14日間の培養期間が製品のリリーススケジュールや患者の治療スケジュールと両立しないためです。

最も確立されたRMM技術の一つであるATP生物発光法は、生物発光試薬との反応後に生存微生物が発する光を検出することで、迅速かつ高感度で定量的な汚染検出を可能にします。従来の培養法とは異なり、ATP生物発光法では、主観的な目視による濁度の評価を、定量的な機器による測定に置き換えることで、より早期かつ再現性の高い結果の解釈を可能にします。

2025年8月に発効するUSP <73>「短寿命製品における汚染検出のためのATP生物発光法に基づく微生物学的試験法」の導入は、規制上の重要な節目であり、検査室に対し、RMMに基づく無菌試験を実施・バリデーションするための明確な薬局方上の枠組みを提供するものである。 これを補完するのが、迅速微生物法（RMM）の導入およびバリデーションに関するより広範なガイダンスを提供するUSP <1071>です。

RMMは、最終製品の無菌試験だけでなく、製造ワークフロー全体にわたる工程内バイオバーデンモニタリングにも適しており、検査室に、複数の品質管理用途にわたる汎用性が高く、規制に準拠したソリューションを提供します。

Milliflex® Rapid System 2.0は、USP <73>の要件に完全に準拠しており、貴社の検査室が、バリデーション済みで規制に準拠したRMMベースの無菌試験ワークフローを導入することを可能にし、5日以内に結果を提供します。

無菌試験におけるデータの完全性とガバナンス

無菌試験の結果の信頼性は、その根拠となるデータの信頼性に左右されます。世界中の規制当局は、GMP微生物学コンプライアンスの核心としてデータ完全性を位置づけています。 試験方法論に加え、無菌試験データが試験ライフサイクル全体を通じてどのように生成、記録、維持されるかについても、同等の重要性が置かれています。FDA、EMA、PMDA などの規制当局は、すべての試験所データが ALCOA++ の原則を満たすことを要求しています。すなわち、データは「帰属可能（Attributable）」「判読可能（Legible）」「同時記録（Contemporaneous）」「原本（Original）」「正確（Accurate）」でなければならず、さらに完全性、一貫性、可用性についても追加の要件が求められています。

米国では、21 CFR Part 11が電子記録および電子署名の要件を定義しており、デジタル文書は紙の記録と法的に同等とみなされています。欧州では、EU附属書11がGMP環境におけるコンピュータ化システムに対して同等の要件を定めています。 これらの規制は、無菌試験を含む品質管理（QC）実験室データのデータ完全性に関する明確な枠組みを定めています。リアルタイムのデータ収集、監査証跡の自動生成、そしてオペレーターの識別情報や機器データから試料情報、最終結果に至るまでの完全なエンドツーエンドのデジタルトレーサビリティは、GMP査察において規制当局からますます求められるようになっており、業界のベストプラクティスと見なされています。M-Trace®ソフトウェアおよびモバイルアプリは、貴社の実験室がこれらの規制要件を満たすことを支援します。