form
solution
usage
sufficient for 50 labeling reactions
packaging
pkg of 200 μL
manufacturer/tradename
Roche
technique(s)
nucleic acid labeling: suitable
color
colorless
pH
~7.5 (68 °F)
solubility
water: miscible
suitability
suitable for fluorescent labeling techniques, suitable for molecular biology
application(s)
genomic analysis
life science and biopharma
storage temp.
−20°C
Quality Level
General description
最適化された酵素混合物：ニックトランスレーションでは、DNase と DNA ポリメラーゼの組合せを利用して、DNA 螺旋の一本の鎖に切れ目を入れたのち、ポリメラーゼが切れ目の入った部位を調べるとき、または「校正する」ときにラベルヌクレオチドを取り込みます。
個々のテンプレートは標準的な 90 分の反応で一貫性のある結果をもたらし、平均プローブ長は 200 塩基対から 500 塩基対までとなります。
アッセイ時間：100 分間
サンプル材料
個々のテンプレートは標準的な 90 分の反応で一貫性のある結果をもたらし、平均プローブ長は 200 塩基対から 500 塩基対までとなります。
アッセイ時間：100 分間
サンプル材料
- スーパーコイル状および線状のプラスミド DNAスーパーコイル状および線状のコスミド DNA精製 PCR 産物
Application
蛍光in situハイブリダイゼーション（FISH）用の高感度プローブの生成について。
Nick Translation Mix は、in situプローブの直接的な蛍光物質ラベリング用にデザインされています。Roche Applied Science のフルオレセイン-12-dUTP およびテトラメチルローダミン-5-dUTP、またはその他の市販の蛍光物質ラベルヌクレオチドは、Nick Translation Mix と組み合わせて使用できます。In situプローブにおける直接的なラベル蛍光物質は、マルチコピーまたは分裂中期の染色体または間期の核の非常に大きなハイブリダイゼーション標的の検出に使用されます。
20 μL の全反応容量中で 1μg のテンプレートを使用する標準的なラベリング反応の場合、4 μL の 5 倍濃縮の蛍光物質ラベリング混合物が必要です。
Nick Translation Mix は、in situプローブの直接的な蛍光物質ラベリング用にデザインされています。Roche Applied Science のフルオレセイン-12-dUTP およびテトラメチルローダミン-5-dUTP、またはその他の市販の蛍光物質ラベルヌクレオチドは、Nick Translation Mix と組み合わせて使用できます。In situプローブにおける直接的なラベル蛍光物質は、マルチコピーまたは分裂中期の染色体または間期の核の非常に大きなハイブリダイゼーション標的の検出に使用されます。
20 μL の全反応容量中で 1μg のテンプレートを使用する標準的なラベリング反応の場合、4 μL の 5 倍濃縮の蛍光物質ラベリング混合物が必要です。
Biochem/physiol Actions
熱失活：1 μL 0.5 M EDTA（pH 8.0）の添加および 65°Cで 10 分間の加熱により、反応を停止させます。
ニックトランスレーション法は、低酵素濃度における MgCl2存在下で、ランダムに分布した切れ目を DNA に導入するという DNase I の能力に基づいています。
大腸菌 DNA ポリメラーゼ I は、プライマーとして切れ目の 3′-OH 末端を用い、未変成の鎖に相補的な DNA を、5′?3′ 方向に合成します。DNA ポリメラーゼ I の 5′?3′ エクソヌクレオチド分解活性により、同時に合成方向にヌクレオチドが除去されます。除去されたヌクレオチドは、ポリメラーゼ活性により、同位体ラベルしたまたはハプテンラベルしたデオキシリボヌクレオシド三リン酸に順次置き換えられます。このため、低温（+15°C）において、反応液中の非ラベル DNA は新たに合成されたラベル DNA に置き換えられます。
大腸菌 DNA ポリメラーゼ I は、プライマーとして切れ目の 3′-OH 末端を用い、未変成の鎖に相補的な DNA を、5′?3′ 方向に合成します。DNA ポリメラーゼ I の 5′?3′ エクソヌクレオチド分解活性により、同時に合成方向にヌクレオチドが除去されます。除去されたヌクレオチドは、ポリメラーゼ活性により、同位体ラベルしたまたはハプテンラベルしたデオキシリボヌクレオシド三リン酸に順次置き換えられます。このため、低温（+15°C）において、反応液中の非ラベル DNA は新たに合成されたラベル DNA に置き換えられます。
Preparation Note
凍結と融解の繰り返しは避けてください。
Analysis Note
ドットスポットアッセイで検査された機能。
Other Notes
ライフサイエンス研究専用。診断にはご使用になれません。
ニックトランスレーションの前にテンプレートを変性する必要はありません。
ニックトランスレーションの前にテンプレートを変性する必要はありません。
内容物
5 倍濃縮溶液を含むバイアル 1 本、安定した反応バッファーの 50%グリセロール（v/v）溶液、DNA ポリメラーゼ I および DNase I。
5 倍濃縮溶液を含むバイアル 1 本、安定した反応バッファーの 50%グリセロール（v/v）溶液、DNA ポリメラーゼ I および DNase I。
保管分類
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
Jane Kenney-Hunt et al.
Mammalian genome : official journal of the International Mammalian Genome Society, 25(3-4), 160-179 (2014-01-22)
The rodent genus Peromyscus is the most numerous and species-rich mammalian group in North America. The naturally occurring diversity within this genus allows opportunities to investigate the genetic basis of adaptation, monogamy, behavioral and physiological phenotypes, growth control, genomic imprinting
R Symonová et al.
Cytogenetic and genome research, 141(2-3), 153-162 (2013-09-21)
We applied comparative genomic hybridization (CGH) and genomic in situ hybridization (GISH) to examine genomes of artificially produced sturgeon hybrids between sterlet, Acipenser ruthenus female (∼120 chromosomes) or Russian sturgeon, A. gueldenstaedtii female (∼240 chromosomes) and a spontaneous triploid Siberian
Ruoyu Wen et al.
PloS one, 7(9), e44681-e44681 (2012-09-13)
In most eukaryotes that have been studied, the telomeres cluster into a bouquet early in meiosis, and in wheat and its relatives and in Arabidopsis the centromeres pair at the same time. In Arabidopsis, the telomeres do not cluster as
Kristin D Kernohan et al.
MethodsX, 1, 30-35 (2014-01-01)
Emerging studies demonstrate that three-dimensional organization of chromatin in the nucleus plays a vital role in regulating the genome. DNA fluorescent in situ hybridization (FISH) is a common molecular technique used to visualize the location of DNA sequences. The vast
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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