form
crystalline
mol wt
239.5
packaging
pkg of 5 mL (100 mg)
manufacturer/tradename
Roche
concentration
0.1-1.0 mg/mL
technique(s)
blocking: suitable, protein purification: suitable
optimum pH
neutral
mp
175-185 °C
solubility
soluble (Solubility and stability of the protease inhibitor remains unchanged.)
storage temp.
2-8°C
Quality Level
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General description
Pefabloc SCは、セリンプロテアーゼの特異的かつ強力な不可逆的阻害剤です。阻害活性はPMSFまたはDFPに匹敵しますが、Pefabloc SCは細胞に対して無毒です。Pefabloc SC PLUSセットは、セリンプロテアーゼ阻害剤Pefabloc SCと独自に処方されたPefabloc SCプロテクター（PSC-Protector）を組み合わせて、Pefabloc SCが提供する安全かつ安定したプロテアーゼ阻害の利便性と信頼性を向上させます。
最近の発見により、Pefabloc SCやPMSFなどのスルホニル型セリンプロテアーゼ阻害剤がたんぱく質に共有結合できることが示されました。これは、阻害剤が高濃度で使用される場合、またはアルカリ条件下での長時間にわたる培養中に発生する可能性があります。この相互作用は、遊離アミノ末端だけでなく、たんぱく質のチロシンおよびリジン残基にも悪影響を及ぼします。このセットに含まれるPLUS添加剤（PSC-Protector）を高濃度で使用し、アルカリ性pHで長時間にわたって培養すると、たんぱく質へのPefabloc SCの共有結合は発生しません。
最近の発見により、Pefabloc SCやPMSFなどのスルホニル型セリンプロテアーゼ阻害剤がたんぱく質に共有結合できることが示されました。これは、阻害剤が高濃度で使用される場合、またはアルカリ条件下での長時間にわたる培養中に発生する可能性があります。この相互作用は、遊離アミノ末端だけでなく、たんぱく質のチロシンおよびリジン残基にも悪影響を及ぼします。このセットに含まれるPLUS添加剤（PSC-Protector）を高濃度で使用し、アルカリ性pHで長時間にわたって培養すると、たんぱく質へのPefabloc SCの共有結合は発生しません。
Application
- Pefabloc® SCは、分取たんぱく質精製中にプロテアーゼの有害な影響を抑制するために使用されます。PSCプロテクターソリューションは、Pefablocをさらに高い濃度で使用し、アルカリ性pHでの培養時間を延ばした場合（質量分析でテスト）にたんぱく質の非特異的共有結合修飾を防ぎます。
- 真核細胞に対する毒性が低いため、形質転換細胞発酵中の組換えたんぱく質製造に適用できます。その場合、望ましい生成物の収量がたんぱく質分解により減少する可能性があります。
- Pefabloc SCは、アガロースプラグでの染色体DNA調製中にプロテイナーゼKを完全に不活性化するために使用されます。それには、細胞をアガロースに包埋し、プロテイナーゼKで消化してすべてのたんぱく質を分解します。特定の制限エンドヌクレアーゼを加える前に、アガロースプラグを10 mMのTris-HCl、1 mMのpH 7 EDTA中の1～5 mM Pefabloc SCで2時間+37°Cまたは一晩培養することにより、プロテイナーゼKを不活性化します。
- PMSFとは対照的に、Pefabloc SCは血清または血漿中のトロンビン活性の優れたブロッカーです。PMSFはこれらの体液中でアルブミンと可逆的に相互作用し、その遊離濃度が低下してトロンビンの不活性化が遅れます。一方、Pefabloc SCは血清アルブミンと反応せず、同様の条件下でトロンビンを不活性化する能力が3倍高いことを示します。
- Pefabloc SCは生細胞で使用できます。
Pefabloc® SC PLUSは、THP-1細胞のジギトニン抽出緩衝液およびカテプシンB活性アッセイ緩衝液で使用されています。また、アフリカツメガエル（Xenopus）胚から核を単離するためのイオジキサノール溶液およびスクロース緩衝液の成分としても使用されています。
Biochem/physiol Actions
Pefabloc SCは、セリンプロテアーゼを不可逆的にブロックするスルホニルフルオリドのファミリーに属します。Pefablocは強力なセリントレオニンホスファターゼ阻害剤としても説明されました。
セリンプロテアーゼの特異的かつ強力な不可逆的阻害剤。Pefabloc SCの阻害活性はPMSFまたはDFPに匹敵しますが、Pefabloc SCは非毒性です。セリンプロテアーゼを特異的に阻害し、質量分析法でテストされたたんぱく質の非特異的共有結合修飾を防ぎます。
Features and Benefits
- 簡素化された2試薬システムを活用してください。PSC-Protectorソリューションを使用すると、高濃度、長時間の培養、アルカリ性pHであってもたんぱく質とPefabloc SC間の共有結合は発生しません。
- 使いやすい阻害剤の利点。水溶性Pefabloc SCを水性バッファーに直接添加します。
- 危険な化合物を避けます。あなたやあなたの周りの人々にリスクを及ぼさずに、無毒でプロテアーゼを阻害します。
- 安定性を向上させて確実に保護します。7.0を超えるpHレベル、+4°Cを超える温度でも一貫したプロテアーゼ阻害を達成します。
- 阻害を最大化。確実に溶解する安定した製品を使用することにより、活性阻害剤のレベルが十分に高いことを確認してください。
Packaging
2つのコンポーネントを含むセット
Preparation Note
作用濃度：0.1～1.0 mg/mL（0.4～4 mM）
Pefabloc SCとそれに対応する量のPSCプロテクター
標準溶液：推奨される溶媒は蒸留水または水性バッファー（Pefabloc SC用）です。
Pefabloc SCに対する溶解度は最大0.1 Mです。
貯蔵条件（標準溶液）：-15～-25°C（保存溶液）
プロテアーゼ阻害剤の溶解度と安定性は変わりません。Pefabloc SCを参照してください。
Pefabloc SCとそれに対応する量のPSCプロテクター
標準溶液：推奨される溶媒は蒸留水または水性バッファー（Pefabloc SC用）です。
Pefabloc SCに対する溶解度は最大0.1 Mです。
貯蔵条件（標準溶液）：-15～-25°C（保存溶液）
プロテアーゼ阻害剤の溶解度と安定性は変わりません。Pefabloc SCを参照してください。
プロテアーゼ阻害剤の溶解度と安定性は変わりません。Pefabloc SCを参照してください。
Other Notes
生命科学研究専用です。診断手順には使用しません。
Legal Information
Pefabloc is a registered trademark of Pentapharm
キットの構成要素のみ
製品番号
詳細
- Pefabloc SC, 100 mg
- PSC-Protector solution, 5 mL ready-to-use
signalword
Danger
hcodes
Hazard Classifications
Eye Dam. 1 - Flam. Liq. 3 - Skin Corr. 1B
保管分類
3 - Flammable liquids
wgk
WGK 1
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