細胞死検出 ELISA^PLUS

本キットを、アポトーシスの誘導後、またはネクローシス細胞からの遊離後の、細胞の細胞質外のヒストン複合体 DNA 断片（モノおよびオリゴヌクレオソーム）の相対定量に使用してください。アッセイには細胞のプレラベルが必要ないため、細胞がin vitroで増殖していない場合、例えば単離したばかりの腫瘍細胞におけるアポトーシスの間でも、ゲノム DNA のヌクレオソーム間の分解を検出できます。アッセイで使用される抗体は種特異的ではないため、本キットは幅広い種に由来する細胞のアッセイに使用可能です。

研究のみに使用できます。診断には使用できません。

細胞死検出 ELISA^PLUS 測光酵素イムノアッセイは、細胞死誘導後の細胞質内ヒストン関連 DNA 断片（モノおよびオリゴヌクレオソーム）のin vitro測定に使用されます。
本キットは、定義した条件下で基質反応とアッセイを停止できるストップソリューションを含んでおり、ハイスループットなアプリケーションにおける使用に適しています。

抗ヒストン抗体は、様々な種（ヒト、マウス、ラット、ハムスター、ウシ、オポッサム、Xenopusなど）のヒストン H1、H2A、H2B、H3、および H4 と反応します。抗 DNA 抗体は、一重および二重鎖の DNA に結合します。そのため、本 ELISA は、様々な種に由来するモノおよびオリゴヌクレオソームの検出が可能であり、多くの異なる細胞システムにおけるアポトーシス性細胞死の測定に応用可能です。

アッセイ時間：3～4 時間
ネガティブコントロール：細胞培養の条件に応じて、それぞれの指数関数的に増殖している永久細胞は、特定の量の死細胞を含んでいます（通常は約 3～8％）。イムノアッセイでは、非処理（細胞死誘導試薬なし）サンプルにおけるこれらの内在的な死細胞は、一定の吸収値を示します（ネガティブコントロール）。
ポジティブコントロール：DNA-ヒストン複合体を、ポジティブコントロールとして使用します。
サンプル材料：細胞株の細胞質内分画（ライセート）、細胞 ex vivo、細胞培養上清、および血清または血漿

1 キットは 10 コンポーネントを含みます

特定サンプル中の死細胞の正確な検出限界は、細胞死のカイネティクス、使用した細胞毒性試薬、および全細胞集団中の影響を受けた細胞の量、などに依存します。細胞死のモデルシステムとして U937/カンプトテシン（CAM）を使用した場合、本イムノアッセイは、125 細胞相当／ウェルの細胞質内画分のモノおよびオリゴヌクレオソームの特異的検出が可能です。

ワーキング溶液：ワーキングソリューションの調製

本キットにて提供される ready-to-use ソリューションと共に、以下のワーキングソリューションを調製する必要があります：
注意：凍結乾燥物の溶解には、再蒸留水のみを使用してください。

抗ヒストンビオチン
凍結乾燥物を 450 uL の再蒸留水に 10 分間溶解し、十分に混合してください。
使用法：免疫試薬のコンポーネント。
抗 DNA ペルオキシダーゼ
凍結乾燥物を 450 uL の再蒸留水に 10 分間溶解し、十分に混合してください。
使用法：免疫試薬のコンポーネント。
ポジティブコントロール
凍結乾燥物を 450 uL の再蒸留水に 10 分間溶解し、十分に混合してください。
使用法：ELISA ステップ 1
ABTS タブレット
試験するサンプル数に応じて、ボトル 7 から 1、2、または 3 錠を、5、10、または 15 mL の基質バッファーに溶解します。
使用法：ELISA ステップ 5
ABTS ストップソリューション
溶液に濁りや沈殿が見える場合、37°Cに温めて、それらが無くなるまで撹拌します。
使用法：ELISA ステップ 6
保管条件（ワーキングソリューション）。抗ヒストンビオチン：2～8°Cで 2 ヶ月間
ABTS タブレット：遮光して 1 ヶ月間。使用前に、15～25°Cにしてください。
ABTS ストップソリューション：2～8°Cで、ラベルに記載の消費期限まで。

ユニット換算：1 mU = 1 x 10-3 OD (1 mU = 0.001 OD)。

ライフサイエンス研究専用。診断目的での使用はできません。