product line
Duolink®
technique(s)
proximity ligation assay: suitable
fluorescence
λex 554 nm; λem 576 nm (Cyanine 3; Zeiss Filter set 20)
suitability
suitable for fluorescence
shipped in
dry ice
storage temp.
−20°C
Quality Level
関連するカテゴリー
Application
Duolink®In Situ Fluorescence Protocolに従ってこの製品を使用してください。一連の簡潔な指示も用意しています。Duolink®実験を行う方法、用途、トラブルシューティングなどに関する情報については、
当社のDuolink®PLA Resource Centerのサイトにアクセスしてください。
完全なDuolink®PLAin situ実験を実施するには、2つの標的エピトープを認識する2つの一次抗体(バリデートされたPLA、IHC、ICCまたはIF)が必要です。必要な他の試薬としては、異なる種に由来する1対のPLAプローブ(プラスプローブとマイナスプローブ)、検出試薬、洗浄バッファー、封入剤などがあります。一次抗体は、Duolink® PLA プローブと同じ種に由来するものでなければならないことに注意してください。分析は、標準的な免疫蛍光アッセイ機器を使用して行います。
特異性
シアニン3フィルターと共にオレンジ蛍光検出試薬が多く使用されます。
使用に関する注意
異なる種で生じた2つの一次抗体が必要です。ご使用になる一次抗体(IgGクラス、モノまたはポリクローナル)を標準免疫蛍光(IF)アッセイ、免疫組織化学(IHC)アッセイまたは免疫細胞化学(ICC)アッセイで検査し、最適な固定、ブロックおよび力価の条件を確認してください。Duolin®in situ試薬は、固定細胞、サイトスピン細胞、スライド上で増殖した細胞、ホルマリン固定細胞、パラフィン包埋(FFPE)細胞または組織 (新鮮または凍結)への使用に適しています。最小数の細胞とする必要はありません。
お客様のために用意した当社のCustom Service Programについて詳しく知ることで、Duolink®プロジェクトを迅速に進めることができます。
全Duolink®製品のリストを見る
Orange蛍光検出試薬には、しばしばCyanine 3フィルターが使用されます。
アプリケーションノート
異なる種に由来する2つの一次抗体が必要です。ご使用になる一次抗体(IgGクラス、モノまたはポリクローナル)を標準免疫蛍光(IF)アッセイ、免疫組織染色(IHC)アッセイまたは免疫細胞染色(ICC)アッセイで検査し、最適な固定、ブロッキングおよび力価の条件を確認してください。Duolink® in situ試薬は、固定細胞、サイトスピン細胞、スライド上で増殖した細胞、ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)切片、または組織 (新鮮または凍結)への使用に適しています。細胞の最小数は不要です。
私たちはお客様と協力して作業します。私たちのカスタム・サービス・プログラムに対する理解が深まると、お客様のDuolink®プロジェクトが加速されます。
Duolink®全製品のリストをご覧ください。
Features and Benefits
- 大量発現や遺伝子操作は必要ありません
- 高い特異性(偽陰性が少ない)
- ローリングサイクル増幅による単一分子感度
- 相対的定量化が可能
- 特別な機器は不要
- FRETに比べ迅速でシンプル
- co-IPに比べ精度が高い
- すぐに発表できる結果
Other Notes
- 5xライゲーション- PLAプローブへハイブリダイズするオリゴヌクレオチドと、リガーゼ以外のライゲーションに必要なすべての構成要素を含む
- 1x リガーゼ(1単位/μL)
- 1x ポリメラーゼ(10単位/μL)
- 5x Amplification Orange - ポリメラーゼ以外のローリングサークル増幅(RCA)に必要なすべての構成要素を含むまた、RCA生成物へハイブリダイズする蛍光色素分子で標識されたオリゴヌクレオチドプローブも含む。
検出キットには以下は含まれません:
一次抗体、PLAプローブ、洗浄緩衝液、マウンティング培地
Legal Information
signalword
Danger
hcodes
pcodes
Hazard Classifications
Resp. Sens. 1
保管分類
10 - Combustible liquids
資料
細胞および組織中のタンパク質の免疫蛍光検出プロトコル
実験のTips & Tricks、FAQ、基本的なトラブルシューティングなどのサポート情報。
近接ライゲーションアッセイ技術の仕組みと、EGFによるEGFR-HER2二量体化のin situ検出を確認できるタンパク質間相互作用コントロールキットの仕組みについてご紹介します
Duolink™アッセイプロトコルの準備・セットアップ・実施にあたり考慮すべき事項
プロトコル
このページでは、蛍光顕微鏡観察のためのDuolink™ In Situの簡易プロトコルを紹介しています。
This protocol describes how to perform immunofluorescent detection of proteins in cells and tissue.
This page details the Duolink® In Situ Short Protocol for fluorescence detection
関連コンテンツ
View an automated protocol for Duolink® assays on the AAW™ automated assay workstation and see results comparing manual vs automated runs.
近接ライゲーションアッセイを用いたタンパク質間相互作用、翻訳後修飾、低発現タンパク質の検出、定量および可視化などの応用例
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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