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Merck

DUO94004

Duolink® flowPLA Detection Kit - FarRed

Duolink® PLA kit for Flow Cytometry with FarRed Detection

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この商品について

NACRES:
NA.32
UNSPSC Code:
41105331
Fluorescence:
λex 644 nm; λem 669 nm
Technique(s):
flow cytometry: suitable
immunofluorescence: suitable
proximity ligation assay: suitable
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製品名

Duolink® flowPLA Detection Kit - FarRed, Duolink® PLA kit for Flow Cytometry with FarRed Detection

product line

Duolink®

technique(s)

flow cytometry: suitable
immunofluorescence: suitable
proximity ligation assay: suitable

fluorescence

λex 644 nm; λem 669 nm

suitability

suitable for fluorescence

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

Application

Duolink® flowPLA Detection Kit–FarRedは、下記でin situ近接ライゲーションアッセイに使用されています:
  • 細胞レチノイン酸結合タンパク質1(Crabp1)と急速進行性線維肉腫(Raf)キナーゼ- MAPK-Erkキナーゼ(Mek)シグナル伝達経路の要素の間の相互作用および複合体形成を検出するため
  • ヒト培養MOLT-4細胞とHeLa細胞のタンパク質相互作用を検討するため
  • Beclin-1タンパク質とニューロンの14-3-3tとの相互作用を可視化するため
  • 移植内皮細胞のタンパク質相互作用を検討するため 

近接ライゲーションアッセイ(PLA)で、Duolink®PLAを使用すれば、固定細胞でのタンパク質相互作用、翻訳後修飾、および1分子レベルでのタンパク質発現レベルの内在的検出が可能になります。

Duolink® flowPLA Detection Kitを使ったフローサイトメトリーにより、細胞集団内のタンパク、タンパク間相互作用、およびタンパク修飾を高感度で検出することができます。Duolink® flowPLA実験の実施には、固定細胞懸濁液、対象のタンパクを特異的に認識する2つの一次抗体、1組のPLAプローブ(100RXN PLUS 1つおよび100RXN MINUS 1つ)、洗浄バッファ、およびDuolink® flowPLA Detection Kitが必要です。flowPLA Kitでは、5つの異なるフルオロフォアを利用できます。バイオレット、赤、緑、橙、遠赤色。flowPLA Kitには、フローサイトメトリーにより、結合したPLAプローブの増幅および検出を行うために必要な試薬のすべてが含まれています。解析は、標準的なフローサイトメトリーアッセイ機器を用いて行います。固定済み細胞浮遊液、一次抗体、および対応するPLAプローブを用意します。

本製品はDuolink® PLAフローサイトメトリープロトコルに従って使用してください。

Duolink®を用いた実験方法、用途、トラブルシューティングなどの情報は、Duolink® PLAフローサイトメトリーのサイトをご覧ください。

アプリケーションノート

一次抗体が必要です。お客様の一次抗体(IgG-クラス、モノクローナルまたはポリクローナル)を標準免疫蛍光染色(IF)、免疫組織染色(IHC)または免疫細胞染色(ICC)アッセイで試験し、最適な固定、ブロッキングおよび力価条件を決定します。フロー検証済み抗体を推奨します。

Duolink®プロジェクトを推進するため、カスタムサービスプログラムで詳細をご覧になり、弊社にお申し付けください。

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Biochem/physiol Actions

遠赤色蛍光検出試薬
λ ex 644 nm励起に適したレーザーを使用してください。
λ em 669 nm蛍光に適したフィルターを使用してください。

Features and Benefits

  • フローサイトメトリー読取り値を用いてタンパク間相互作用を解析します。
  • 近接ライゲーションアッセイを用いて細胞集団を解析します。
  • 少量のターゲットに対しローリングサークル型の増幅を行うことにより感度が向上します
  • 過剰発現や遺伝子操作は不要
  • 相対的な定量が可能
  • あらゆるフローサイトメトリー機器を用いて操作できます
  • 柔軟なプロトコルに沿って容易に実施できます
  • 論文などにそのまま使用できる結果

General description

Duolink® flowPLA Detection Kitには、フルオロフォアの付いた検出用オリゴヌクレオチドが含まれています(lex = 644 nm/lem = 669 nm)。

Other Notes

本製品の構成は次のとおりです。
  • 検出液- FarRed(DUO84004)5本入り
  • ライゲーションバッファー(DUO82009)5本入り
  • 増幅バッファー(DUO82050)5本入り
  • リガーゼ(1U/μL)
  • ポリメラーゼ(10U/μL)

詳しくはデータシートを参照してください。

Legal Information

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

pictograms

Health hazard

signalword

Danger

hcodes

Hazard Classifications

Resp. Sens. 1

保管分類

10 - Combustible liquids


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

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Many cytokine receptors are cell surface proteins that promiscuously combine to form active signalling homo- or heterodimers. Thus, receptor chain dimerization can be viewed as a direct measure of a high probability of intracellular signalling by specific cytokines. Proximity ligation
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Cytometry. Part A : the journal of the International Society for Analytical Cytology, 91(2), 180-189 (2017-01-18)
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Scientific reports, 9(1), 10929-10929 (2019-07-31)
The rapidly accelerated fibrosarcoma (Raf) kinase is canonically activated by growth factors that regulate multiple cellular processes. In this kinase cascade Raf activation ultimately results in extracellular regulated kinase 1/2 (Erk1/2) activation, which requires Ras binding to the Ras binding
Karl-Johan Leuchowius et al.
Cytometry. Part A : the journal of the International Society for Analytical Cytology, 75(10), 833-839 (2009-08-04)
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資料

フローサイトメトリープロトコルのための、適切な実験デザイン、Duolink® PLAの準備と実施する際の検討事項

フローサイトメトリーのためのDuolink™ PLA実験で成果を上げるために、正しく実験を行うための一般的なヒントやコツ、問題を特定するための有用な情報と解決策を提供します。

フローサイトメトリーの測定値でタンパク質間相互作用と分析できる、近接ライゲーションアッセイ(PLA)とフローサイトメトリーを組み合わせた新しいキットについてご説明します。

近接ライゲーションアッセイ技術の仕組みと、EGFによるEGFR-HER2二量体化のin situ検出を確認できるタンパク質間相互作用コントロールキットの仕組みについてご紹介します

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