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세포 및 조직 배양용 혈청 FAQ

혈청 제품에 관한 생물학적, 품질 및 규제 정보

세포 및 조직 배양에 혈청이 필요한 이유는 무엇인가요?

혈청은 배지 보충제로 2~10% 농도로 첨가되어 영양 인자, 호르몬, 성장 인자 및 부착 인자의 혼합물을 제공합니다. 또한 혈청은 pH 변화, 단백질 분해 활성, 중금속 또는 내독소 존재와 같은 세포 성장에 대한 다양한 교란 및 독성 효과로부터 세포 배양 시스템을 보호하는 완충제 역할을 합니다.

냉동 상태로 가공 시설에 공급된 혈청은 해동 후 세균, 바이러스, 내독소 및 헤모글로빈 함량 검사를 실시합니다. 최상급 혈청은 일련의 막 여과기를 거쳐 무균 상태에서 최종적으로 0.1 마이크론 구멍 크기의 여과를 완료합니다. 여과 후 무균 상태를 유지하며 혈청을 멸균 병에 분주하고, 즉시 -20°C로 급속 냉동한 후 모든 배치의 품질 관리 기준 충족 또는 초과 확인 시까지 격리 보관합니다. 각 배치에 대한 분석 증명서는 요청 시 제공됩니다.

혈청의 권장 보관 온도는 -5°C에서 -20°C 사이입니다. 이는 필요할 때까지 냉동 보관할 때 가장 안정적이기 때문입니다. 서리가 생기지 않는 냉동고에 혈청을 보관하는 것은 권장되지 않습니다. 온도 변화가 발생하면 용기가 깨질 수 있으며, 이는 제품의 오염이나 품질 저하를 초래할 수 있기 때문입니다.

혈청은 분해를 방지하기 위해 2-8°C에서 하룻밤 동안 해동하거나, 내용물을 재현탁시키기 위해 주기적으로 흔들어 주면서 실온에서 해동할 수 있습니다. 해동된 혈청은 세포 배양액에 첨가하기 전에 완전히 혼합해야 합니다.

반복적인 동결-해동 과정은 혈청 품질에 심각한 영향을 미칠 수 있으므로, 해동된 혈청은 단일 사용을 위해 분할하여 -20°C에서 보관할 것을 권장합니다. 2-8°C에서 보관된 혈청은 2-4주 이내에 사용해야 합니다.

참고: 37°C 이상의 온도는 영양 성분을 분해하고 혈청 성능을 저하시킬 수 있습니다.

혈청은 드라이아이스로 포장되어 동결 상태로 도착해야 합니다. 그러나 배송 지연으로 인해 혈청이 부분적으로 해동된 경우에도 사용이 가능합니다. 혈청을 완전히 해동한 후, 보관 및 추가 사용을 위해 일회용 분량으로 분할하여 보관하십시오.

혈청의 유통기한은 제조일로부터 5년입니다.

일반적인 실내/실험실 조명 하에서 혈청을 정상적으로 취급하는 것은 거의 영향을 미치지 않습니다. 그러나 혈청에는 빛에 민감한 특정 성분이 포함되어 있습니다. 따라서 혈청을 고강도 또는 단파장 빛에 노출시키는 것은 권장되지 않습니다.

혈청에 침전물이 나타나는 데는 여러 가지 이유가 있습니다:

  • 반복적인 동결-해동 주기는 혈청 지단백질을 변성시켜 탁도를 유발합니다. 이는 일회용 분량을 준비함으로써 최소화할 수 있습니다.
  • 성장 특성을 유지하기 위해 혈청은 저온에서 신속히 처리되는데, 이 과정에서 일부 피브리노겐이 혈청에 잔류할 수 있으며, 이는 해동 시 피브린으로 전환될 수 있습니다. 혈청 내 과다한 피브린은 응집 물질로 관찰되며, 400xg 원심분리기로 제거할 수 있습니다. 응집물 제거를 위한 혈청 여과는 권장되지 않습니다. 여과기가 막히거나, 의도하지 않게 원하는 단백질이 여과기에 잔류할 수 있기 때문입니다.

무균 취급을 철저히 준수할 경우, 혈청이 첨가된 배지는 2~8°C에서 최대 6주까지 보관할 수 있습니다. 배지가 탁해지면 보관 기간과 관계없이 해당 기관의 생물안전 프로토콜에 따라 폐기해야 합니다.

당사의 모든 혈청 제품과 마찬가지로 FBS 역시 이러한 관련 미생물 오염 물질의 존재 여부를 철저히 검사합니다. 각 배치에 대한 분석 증명서(CoA, CofA)는 요청 시 제공 가능합니다.

예. 모든 시그마-알드리치 혈청은 BSE 발생이 없거나 위험이 낮은 국가에서 조달되었습니다. 정부 간 기구인 세계동물보건기구(OIE)는 각국의 OIE 지침 및 기준 준수 여부를 모니터링함으로써 전 세계적 차원에서 동물 질병 퇴치에 힘쓰고 있습니다.

감마선 조사 혈청은 바이러스 및 기타 외래 미생물(예: 마이코플라스마)을 불활성화하기 위해 코발트-60 방사선원에 25-35 kGy 선량을 조사하였습니다. 감마선 조사는 혈청의 물리화학적 특성이나 세포 배양 성능에 영향을 미치지 않습니다.

보체 단백질은 포유류 혈청에 자연적으로 존재하며 세포 용해 반응을 매개하고, 평활근을 수축시키며, 림프구 및 골수성 세포를 활성화합니다. 가열 불활성화는 혈청 내 보체의 활성을 파괴합니다. 따라서 이 방법은 면역학적 응용 및 배아줄기세포(ESCs), 곤충 세포 및 평활근 세포 배양에 권장됩니다.

열 불활성화 과정은 세포 및 조직 증식에 필수적인 혈청의 핵심 구성 성분인 유용한 혈청 단백질의 변성을 방지하기 위해 신중하게 제어되어야 합니다.

혈청을 56°C에서 30분간 가열하면 열불활화가 발생합니다.

혈청은 생물학적 원료에서 추출한 용액이므로 배치마다 성분이 다를 수 있습니다. 적용 시 변동성을 최소화하기 위해 각 배치에 대해 엄격한 품질 검사를 수행하며, 고객사가 자체 실험실에서 테스트할 수 있도록 배치 샘플을 제공할 수 있습니다. 고객사의 배치 적격성 평가 과정 동안 테스트 배치에서 원료를 별도로 보관합니다.

혈청의 색상은 헤모글로빈 농도에 따라 달라지며, 이 매개변수의 변동은 혈청 성능에 영향을 미치지 않습니다.

혈청의 원산지(때로는 '원료 공급처'라고도 함)는 정제되지 않은 혈액을 채취한 국가를 의미합니다. 이는 혈청을 분리, 여과 또는 기타 방식으로 가공한 국가와 혼동해서는 안 되며, 두 국가가 다를 수 있습니다. 혈청 공급업체의 원산지 증명서에는 혈청 원료 공급처 및 가공 정보가 명확히 기재되어야 합니다.

재료

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