ウイルスベクターのダウンストリーム処理
ウイルスベクターの精製プロセスは、従来、モノクローナル抗体用のシステムに基づいており、これらは必要な回収率を達成するようには設計されていませんでした。
遺伝子治療用ウイルスベクターのダウンストリーム処理に特化して設計された新技術の導入により、収率と処理能力を向上させる機会が生まれています。ウイルスベクターのダウンストリーム処理を最適化するために活用できる手法には、以下のようなものがあります。
- 限外ろ過／透析ろ過操作。特に、細胞やウイルスの回収・精製、下流工程におけるタンパク質の濃縮および透析ろ過、ならびに最終製剤化において、タンジェンシャルフローろ過（TFF）を活用する手法
- 高生産性のシングルユースクロマトグラフィー膜吸着器などの技術を活用し、単位操作の数と規模を削減する、強化されたクロマトグラフィープロセス
これらの下流工程技術により、ウイルスベクターの精製時間を数時間から数分に短縮しつつ、回収率を向上させる可能性が期待されます。さらに、スケールアップを促進し、プロセスに必要なスペースを削減し、施設のより効率的な活用を可能にします。
一次精製
ウイルスベクターを含む粗濾液は、深層ろ過、あるいは遠心分離と深層ろ過を併用して、大きな細胞破片やその他の不純物を除去する。
二次清澄化
一次精製で得られた精製培地は、さらなる工程を経てさらに精製されます。
限外ろ過／透析ろ過
限外ろ過は濃縮に、ダイアフィルトレーションは緩衝液交換にそれぞれ用いられる。ウイルスベクターは、分子径に基づくろ過により不純物から分離される。ダイアフィルトレーションでは、塩分やその他の分子を除去し、所定の緩衝液と置換する。
クロマトグラフィー
ウイルスベクターの精製には、イオン交換、アフィニティ、サイズ排除など、少なくとも2つのクロマトグラフィー法が用いられる。
ウイルスろ過
精製されたウイルスベクターは、15ナノメートルの孔径を持つナノろ過にかけられ、混入ウイルス、エンドトキシン、およびその他の残留不純物や凝集体が除去されます。
無菌ろ過
無菌ろ過（バイオバーデン低減）は、プロセス内で複数回実施される場合があります。供給流は、0.4 または 0.2 ミクロンの滅菌用フィルターを通過させ、処理中に混入した細菌やその他の微生物を除去します。
最終充填
精製され、無菌化されたウイルスベクターを、最終的な目的の容器に充填します。安定性と完全性を確保するためには、製剤、包装材料、保管条件について慎重な検討が必要です。
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ワークフロー
ウイルスベクターの上流工程
上流工程において適切な判断を下すことは、ウイルスベクターの力価だけでなく、下流工程、スケジュール、および規制当局の承認にも影響を及ぼします。
ウイルスベクター製剤の調製および最終充填
商業的に実現可能な遺伝子治療法を開発するには、応用面および規制面における高度な専門知識が求められる
ウイルスベクターの特性評価およびバイオセーフティ試験
ウイルスベクター製品に対する重要なバイオセーフティ試験および特性評価は、同一性、効力、安全性、安定性といった主要な品質特性を包括的に分析するのに役立ちます。
ウイルスベクターの受託開発・製造
CDMOとの提携は、臨床パイプラインの推進と商業化の成功において極めて重要な役割を果たしています