M9、最小塩類、5倍濃縮

M9 Minimal Salts 5xは以下の用途に使用されています：

• 選択寒天培地での硫酸塩還元菌の単離
• GMML最小培地でのファージ耐性DH10B細胞の増殖
• M9最小培地での細胞遊走アッセイ

M9 Minimal Salts 5x（5倍濃縮のM9最小塩類培地）は、E. coliの繁殖およびプラスミド増幅に使用するM9最小培地の調製に適しています。クローニング、DNAプラスミド製造、およびリコンビナントタンパク質製造のための、E. coli株の非選択的培養に適しています。また、必須アミノ酸を産生するE. coliに対する正の選択圧の維持や、M13増殖用のF′含有細菌株の維持にも適しています。

M9粉末は以下のものを提供します：

• 標準製剤
• 低予算で購入できる液体の代替品

M9最小塩類は、E. coliの培養に使用され、頻繁に文献参照される微生物増殖培地です。 この緩衝された最小微生物培地は、塩類と窒素しか含有されていないため、従来、必要に応じてグルコース、アミノ酸およびビタミンを補給します。

1.蒸留水1 Lに56.4 gを溶解させます。
2.121℃で15分間オートクレーブします。
この簡便な5x濃縮液は貯蔵可能であり、必要に応じて希釈し1× M9最小塩類5Lを調製することができます。

M9最小培地の調製：
1.M9最小塩類の5×濃縮液200 mLを、滅菌水800 mLを用いて無菌操作で希釈します。必要に応じ、45～50℃に冷却します。
2.無菌1 Mブドウ糖20 mLおよび無菌1 M硫酸マグネシウム2 mLを無菌操作で添加し、M9最小培地1 Lを調製します。
3.必要に応じ、M9最小培地に無菌1 M塩化カルシウム0.1 mLを無菌操作で添加します。また、M9最小培地に対し適切なアミノ酸を補充することもできます。

56.4 gの粉末を水1 Lに加えて攪拌することにより、5倍濃縮保存溶液を調整します。 121℃で15分間オートクレーブ滅菌します。 抗生物質などを添加する前に放冷します（必要に応じて）。

200 mLの5倍濃縮のM9保存溶液を800 mLの滅菌水に加えることにより、5倍濃縮のM9濃縮保存溶液を1倍濃縮のワーキング溶液に希釈します。 抗生物質などを添加する前に放冷します（必要に応じて）。