リボヌクレアーゼA ウシ膵臓由来

RNアーゼA は、ピリミジンヌクレオチドの 3′OH リン酸をアタックするエンドリボヌクレアーゼです。配列pG-pG-pC-pA-pGが切断されて、pG-pG-pCpとA-pGになります。一本鎖RNAに対して最も高い活性を示します。

RNアーゼA、すなわちリボヌクレアーゼAは、ピリミジンヌクレオチドの後でホスホジエステル結合の一本鎖RNAを切断するエンドリボヌクレアーゼです。RNアーゼAは3′リン酸末端を攻撃します（たとえば、pG-pG-pC-pA-pGが切断されて、pG-pG-pCpとA-pGになります)。一本鎖RNAに対して最も高い活性を示します。RNアーゼAは、4箇所でジスルフィド架橋された一本鎖ポリペプチドです。RNアーゼBとは異なり、糖タンパク質ではありません。DNAは環状中間体の形成に必要な2′-OH基を持たないため、リボヌクレアーゼはDNAを加水分解しません。また、RNアーゼAは、タンパク質サンプル中のRNAを加水分解できます。RNアーゼAは、His12とHis119のアルキル化によって阻害され、カリウム塩およびナトリウム塩によって活性化されます。RNアーゼは、重金属イオン存在下で阻害されます。また、RNアーゼは、DNAによって競争的に阻害されます。

RNアーゼAは、4箇所でジスルフィド架橋された一本鎖ポリペプチドで、124個のアミノ酸から構成されています。RNアーゼBとは異なり、RNアーゼAは糖タンパク質ではありません。RNアーゼＡは、RNアーゼの活性部位に存在するHis¹²あるいはHis¹¹⁹のアルキル化によって阻害できます。RNアーゼA は、カリウムやナトリウム塩によって活性化されます。

ウシ脾臓由来のリボヌクレアーゼAは、以下の用途に使用されています：

• プラスミドDNAの精製
• 核の染色中に二本鎖RNAの染色を消化・回避するため
• 免疫ペルオキシダーゼおよび免疫蛍光検出
• フローサイトメトリーに供する細胞を処理するため
• In situハイブリダイゼーション後にFFPE組織セクションを洗浄するためのハイブリダイゼーション後バッファーの成分として
• 外膜タンパク質（OMP）抽出物の調製中に細胞を処理するため
• RNアーゼ保護アッセイ
• 非特異的に結合したRNAの除去
• RNA配列の解析
• タンパク質サンプルに含まれるRNAの加水分解

安定性が高いメルクのリボヌクレアーゼA（RNアーゼA）は、RNA除去、RNAシーケンシング、およびDNA精製に適しています。

Eにより測定したタンパク質。

RNアーゼA の主なアプリケーションは、プラスミド DNA サンプルからの RNA の除去です。このアプリケーションでは、DNアーゼ フリー RNアーゼA が、最終濃度 10 μg/mL で使用されます。

残存 DNアーゼ の不活化のために本 RNアーゼA 製品の煮沸ストック溶液は必要なく、RNアーゼ の沈殿や酵素活性の損失を引き起こす場合があります。RNアーゼA 溶液を中性 pH で加熱した場合、沈殿が生じます。より低い pH で加熱した場合は、存在するタンパク質不純物により、多少の沈殿が生じることがあります。

RNアーゼA は、カリウムやナトリウム塩によって活性化されます。 RNアーゼA は、His12 または His119 のアルキル化によって阻害されます。