EXtrelut® NT |
Anwendungsbeispiel
EXtrelut®NT-Säulen für die Flüssig-Flüssig-Extraktion werden in großem Umfang für die Probenvorbereitung von Urin, Vollblut, Plasma, Serum, Magensaft, Liquor, Fruchtwasser und Stuhl sowie tierischen und pflanzlichen Geweben eingesetzt. Andere geeignete Anwendungsgebiete sind Umwelt- und Rückstandsanalysen, einschließlich der Analyse von Industrie-, Brauch- und Abwasser. Auch die fraktionierte Elution von sauren und basischen Substanzen, wie Arzneimittel und deren Metabolite aus Körperflüssigkeiten, kann mit EXtrelut®NT-Säulen durchgeführt werden.
Bestimmung von Antiepileptika (AED) im Serum
| 500 µl Serum 500 µL Phosphatpuffer |
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| ↓ | Nacheinander auf die Säule auftragen |
| EXtrelut® NT1 | |
| ↓ | 8 Minuten einwirken lassen |
| 1 ml Dichlormethan / 2-Propanol (9+1) |
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| ↓ | 10 Minuten einwirken lassen, eluieren mit |
| 6 ml Dichlormethan / 2-Propanol (9+1) |
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| ↓ | Im Stickstoffstrom bis zur Trocknung verdampfen |
| Den Rückstand in 1 ml Methanol auflösen | |
| ↓ | |
| 10 µl der Lösung in HPLC-Säule injizieren |
* = 17,6 g NaH2PO4, 4,5 g Na2HPO4*2H2O, 1,5 g NaN3, gelöst in 1 l Wasser (pH 6,0–6,1)
HPLC-Trennung von AED nach Probenvorbereitung mit EXtrelut® NT1
| HPLC-System | LaChrom®-System | ||||||||||||||||||||||||||
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| Säule | LiChrospher® RP-Select B (5 µm) LiChroCART® 250-4 |
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| Mobile Phase | A: Wasser LiChrosolv®, Acetonitril LiChrosolv® / 1+1 (1.00030) B: Wasser LiChrosolv® |
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| Gradient |
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| Fluss | 1 ml/min | ||||||||||||||||||||||||||
| Temperatur | 30°C | ||||||||||||||||||||||||||
| Detektion | UV 205 nm | ||||||||||||||||||||||||||
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Rückgewinnung (Mittelwerte, n=3)
| 1 Ethosuximid* | 14,1 min | 84 ± 7% | |
|---|---|---|---|
| 2 Primidon | 19,4 min | 100 ± 2% | |
| 3 -Methyl--Propylsuccinimid | 22,5 min | Interner Standard | |
| 4 Phenobarbital | 26,9 min | 96 ± 2% | |
| 5 Hexobarbital | 34,2 min | 99 ± 2% | |
| 6 Carbamazepin | 36,4 min | 97 ± 1% | |
| 7 Phenytoin | 38,0 min | 100 ± 1% | |
*Ethosuximid ist bei Verdampfen flüchtig
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