Chromolith® Prep

Comparación con el material particulado

La selectividad de las columnas monolíticas Chromolith® Prep RP-18 desactivadas es comparable a la de las columnas habituales de fase inversa RP-18 desactivadas. Sin embargo, la gran velocidad y eficiencia de estas columnas preparativas las hace excelentes para separaciones de compuestos básicos y ácidos no polares, así como de péptidos.

En la mayor parte de las casos, los métodos existentes utilizando columnas de partículas pueden transferirse fácilmente a Chromolith® Prep. Sin embargo, para algunas aplicaciones, merece la pena optimizar el método para hacer uso del potencial completo de esta tecnología mejorada.

Comparación de Chromolith® Prep RP-18 desactivada 100-25 mm con material particulado: separación de derivados oxima

La comparación de una columna Chromolith® Prep RP-18 desactivada con una columna de partículas Purospher RP-18 desactivada (250-50 mm) demuestra que ambas separaciones tienen una resolución similar bajo las mismas condiciones cromatográficas. Sin embargo, la Chromolith® Prep RP-18 desactivada tiene mejor selectividad que la Purospher RP-18 desactivada, como demuestra la resolución del pico añadido del isómero a los 7 minutos.

Columna empaquetada NW 50 (250-50) rellena con Purospher RP-18 desactivada, 10 μm

Columna	Columna empaquetada NW 50 (250-50) rellena con Purospher® RP-18 desactivada, 10 μm
Fase móvil	A: Agua + TFA al 0,05 % B: Acetonitrilo + TFA al 0,05 %
Gradiente	lineal en 30 min hasta B al 100 %
Caudal	100 ml/min
Detección	UV 210 nm
Muestra	125 mg de derivados oxima en 500 μl de acetonitrilo

Chromolith® Prep RP-18 desactivada 100-25 mm

Columna	Chromolith® Prep RP-18 desactivada 100-25 mm
Fase móvil	A: Agua + TFA al 0,05 % B: Acetonitrilo + TFA al 0,05 %
Gradiente	lineal en 11 min hasta B al 100 %
Caudal	100 ml/min
Detección	UV 210 nm
Muestra	125 mg de derivados oxima en 500 μl de acetonitrilo

Separación de hirudina (filtrado de extracto crudo)

Sin preparación de la muestra, se inyectó la muestra cruda directamente en la columna Chromolith® Prep RP-18 desactivada. La separación tardó sólo 5 minutos, en los cuales el producto problema se aisló satisfactoriamente de las impurezas.

Chromolith® Prep RP-18 desactivada 100-25 mm

Columna	Chromolith® Prep RP-18 desactivada 100-25 mm
Fase móvil	B: Agua + ácido fórmico al 0,1 % B: Acetonitrilo al 100 %
Gradiente	Tiempo [min]	A %	B %
	0	90	10
	10	70	30
	10,1	90	10
Caudal	60 ml/min
Detección	UV 254 nm
Muestra	23 mg de hirudina (filtrado de extracto crudo) inyectados en 5 ml de disolución

Separación de dihidropiridinas (nifedipina, nimodipina y nisoldipina)

Con la tecnología de varilla de sílice monolítica de las columnas Chromolith® Prep RP-18 desactivadas, es posible acelerar significativamente las separaciones a la vez que se reduce la contrapresión.

Chromolith® Prep RP-18 desactivada 100-25 mm

Columna	Chromolith® Prep RP-18 desactivada 100-25 mm
Fase móvil	A: Agua B: Acetonitrilo
Gradiente	Tiempo [min]	A %	B %
	0	80	20
	8	20	80
	8,1	80	20
Caudal	10 ml/min
Detección	UV 224 nm
Muestra	90 mg de mezcla de nifedipina, nimodipina y nisoldipina

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